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- TSKgel
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- 2025年07月15日
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单克隆抗体（mAb）是目前市场上最大类型的糖基化蛋白质治疗剂，糖基化是mAb特异性性的主要来源。mAb的IgG-Fc的N-糖基化会影响药物的治疗作用机理（MOA），因此监测聚糖的关键质量参数（CQA）是生物药物开发的重要组成部分。同时糖基化是药物产品溶解度，动力学，稳定性，功效和免疫原性的关键因素。
在单克隆抗体药物的初期研发阶段中，通过对细胞株实施筛选出能产生滴度较高、ADCC活性较高的细胞株。此时常会用到的几种评估方法是，通过生物检定法测定ADCC活性；通过表面等离子共振法（SPR）测定人体IgG受体（FcγⅢa等）的亲和力；通过LC/MS分析抗体酶切下来的糖链结构等。但这些方法都需要花费大量的时间和精力。
TSKgel FcR-IIIA-NPR色谱柱能够将复杂的评估分析法由繁化简，TSKgel FcR-IIIA-NPR色谱柱是将Fc受体之一的重组FcγRⅢA作为配基，键合到非多孔亲水性聚合物基质的填料上，并充填至PEEK色谱柱内，它给分析抗体糖链结构、测定ADCC活性提供了一种全新的快速方法。
TSKgel FcR-IIIA-NPR色谱柱主要用途：
1、确认不同细胞株 (CHO细胞、HEK细胞等) 中抗体的性状变化。
2、确认多个细胞株筛选时抗体的性状变化。
3、确认当改变细胞培养基添加剂时抗体的性状变化。
4、细胞培养过程中随培养天数的变化导致抗体性状变化的确认。
5、细胞培养规模放大 (更改培养方法) 时，确认抗体是否发生性状变化。
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文献和实验概述一般而言，反相，离子交换/尺寸排阻色谱方法常用于粮食中的有机酸分析。反相色谱中，常用ODS柱，使用酸性洗脱液抑制有机酸和固定相之间的离子相互作用。尽管采用了这种洗脱条件，当实际样品直接注入色谱柱时，在色谱图上也常出现异常的峰形。我们调查了在TOSOH IC-2010离子色谱系统有机酸峰形异常的问题。本文讨论了在不同的实际样品中色谱条件对提高有机酸峰形的影响。实验色谱柱分析柱：TSKgel ODS-100V，3um，4.6mmID*15cm预柱：TSKgel SCX，5um，H型
的生物大分子 。如蛋白等。而TSK-GEL PW色谱柱则更加适合于如多糖和合成聚合物等多分散性样品的分析分离。TSK-GEL PW有七种不同孔径的填料，通常分析色谱柱使用的填料粒度是10和17μm，制备柱用的是17μm，22μm或25μm。TSK-GEL PWXL系列色谱柱所使用的填料是具有更高柱效的6μm，10μm或13μm的填料；混合床层的TSKgel GMPW和TSK-GEL PWXL系列色谱柱用于分离宽分子量范围，TSKgel G-Oligo-PW和TSKgel G-DNA-PW系列色谱柱
。 ( 13 ) 色谱设备。 ( 14 ) 高 S 色谱柱（Bio- Rad)。 ( 15 ) UNO-S1 色谱柱（Bio- Rad)。 ( 16 ) Superdex 75 (Amershan Biosciences)。 ( 17 ) 50 mmol/L Tris-氯化氢，pH 8.0，50 mmol/L 氯化钠和 1 mmol/L 二硫苏糖醇。 ( 18 ) PAGE 设备。 ( 19 ) DNA 测序设备。 ( 20 ) 9-芴甲氧羰基固相合成设备
