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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
32
- 英文名：
BCIP/NBT Immunohistochemistry Color Development Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100次|500次|1000次
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：BCIP/NBT免疫组织化学显色试剂盒规格
英文名称：BCIP/NBT Immunohistochemistry Color Development Kit
产品规格：100次|500次|1000次
发货周期：1～3天
储存条件冷藏（2-8℃）
概述
BCIP/NBT是碱性磷酸酶的常用底物，在碱性磷酸酶的催化下，BCIP会被分解产生强反应性的产物，该产物与NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。在碱性磷酸酶催化下，在组织切片上结合了碱性磷酸酶偶联物的地方产生深蓝色沉淀，可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。
应用
该试剂盒可用于碱性磷酸酶系统的免疫组化、原位杂交等实验的酶促显色。
组份
BCIP溶液(20X)；NBT溶液(20X)；碱性磷酸酶显色缓冲液
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
化可的松琥珀酯（H1425000 规格：;20mgEcamsule Related Compound D
化可的松（H1 00000 规格：;20mgEcamsule Related Compound C
青阳参甙元170151 规格：;20mgEcamsule Related Compound B
羟（Y0000011 规格：;20mgEcamsule Related Compound A
羟 质B（Y000001 规格：;20mgDyphylline
羟 质A（Y0000012 规格：;20mgDydrogesterone
羟脲（Y0000119 规格：;20mgDyclonine Hydrochloride
羟钴素（H1428000 规格：;20mgDuloxetine Hydrochloride
羟纤维素 邻二酯- 对照谱图（H5000000 规格：;20mgDrospirenone
羟纤维素邻二酯（Y0000915 规格：;20mgDroperidol
羟-BETA-环糊精（Y0000186 规格：;20mgDrometrizole Trisiloxane
葡 - 对照谱图（Y0000267 规格：;20mgDrometrizole
苹 - 对照谱图（Y000014 规格：;20mgDried Aluminum Hydroxide Gel
皮（H0500000 规格：;20mgDoxylamine Succinate
泮托拉唑水合物（Y00008 5 规格：;20mgDoxycycline Hyclate
BCIP/NBT免疫组织化学显色试剂盒规格 20号染色体开放阅读框94抗体 L-FABP ELISA Kit 肝型脂肪结合蛋白(L-FABP)ELISA试剂盒
白土苓（华南肖菝葜） 订购|咨询 规格 10g
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卷柏(卷柏) 订购|咨询 规格 2g
22号染色体开放阅读框13抗体 HNF-1B ELISA Kit 肝细胞核子1β(HNF-1B)ELISA试剂盒
豆 订购|咨询 规格 5g
22号染色体开放阅读框15抗体 HGF ELISA Kit 肝细胞生长子(HGF)ELISA试剂盒
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22号染色体开放阅读框26抗体 HB-EGF ELISA Kit 肝素结合性表皮生长子(HB-EGF)ELISA试剂盒
银杏内酯C(暂行) 订购|咨询 规格 20mg
补体C2b链多肽抗体 HBEGF ELISA Kit 肝素结合EGF样生长子(HBEGF)ELISA试剂盒
交联聚维 订购|咨询 规格 100mg
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后马托品 订购|咨询 规格 100mg
2号染色体开放阅读框27抗体 PHC ELISA Kit 肝癌抗原(PHC)ELISA试剂盒
卡比多巴 订购|咨询 规格 100mg
操作步骤(仅供参考)：
1、BCIP/NBT免疫组织化学显色试剂盒规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验,Santa Cruz等公司的原装抗体或进口分装抗体.具体请参见免疫学部分产品----第一抗体. C.标记二抗: 根据一抗的来源选择二抗. 购买信息: 请参见免疫学部分试剂---各种标记抗体 D.底物系统: 采用常规底物或化学发光底物. (1)显色法: 常用底物为BCIP/NBT或DAB .此法简单,但灵敏度不高,并难以从膜上去除. (2)化学发光法: 目前比较常用的方法.灵敏度较高,检测时可采用X光胶片或CCD成像系统. 不同显色方法产品比较
货号 品名 规格 价格 备注 C1601 BCIP/NBT显色试剂盒 - 深蓝色 50ml 240 Sigma原料，单一组分 C1603 单组分pNPP 显色液 - 黄色
160 国产 WB600 ECL化学发光显色液 (A 和 B 各 50ml) 套 280 WB602 BCIP/NBT显色试剂盒 50ml 240 WB603 鼠兔通用WB
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
