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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
44
- 英文名：
3-Amino-9-Ethylcarbazole
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
5g
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：AEC(过氧化物酶显色底物)价格
英文名称：3-Amino-9-Ethylcarbazole
产品规格：5g
发货周期：1～3天
3－氨基－9－乙基唑（3-amino-9-ethylcarbazole；AEC）是过氧化物酶（Peroxidase）的生色底物，在过氧化物酶的催化下，电子供体AEC底物在过氧化氢氧化下，失去电子而呈现出颜色变化和沉积，形成稳定性红色不溶性产物（能溶于有机试剂），以此鉴定过氧化物酶活性，从而确定目标分子表达情况，该种方法权威而经典。其适用于辣根过氧化酶标记蛋白的免疫学检测（蛋白质免疫印记、免疫组织化学、以及原位杂交染色等）。产品性能稳定，操作便捷，敏感度高，显色清晰，重复性好。
别名3-氨基-9-乙基卡巴唑；3-氨基-9-乙基氮杂芴
CAS132-32-1
分子式C14H14N2
分子量210.28
外观结晶
纯度(滴定)>95.0%
溶解性可溶于乙醇和DMF，参考浓度5％。
储存条件密封阴凉保存
注意事项
1．由于AEC生成的颜色产物为脂溶性，因此用于IHC显色后不适合用中性树脂封片，须用水性封片剂封片也正因为如此，可以在显色后进行多重染色技术。
2．根据情况自行优化实验条件，调整显色时间，获得最佳显色效果。
3．AEC有一定毒性，操作时请采取必要的防护措施。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
AEC(过氧化物酶显色底物)价格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
5'-ATP，Na25-三腺苷二盐100UBR，
5'-AMP，2Na腺苷-5′-单二25克生物技术级，
5-Aminovaleric acid5-50克CP
5'-ADP，Na25-二腺苷二盐1KUBR
5′-UTP,4Na尿苷-5′-三四盐10KUBR
5′-UTP,3Na尿苷-5′-三三盐1000UBR，99%
5′-UMP，2Na尿苷-5′-单二盐250毫克高，
5′-UDP,2Na尿苷-5′-二二盐5000UBR，850u/mg
5′-UDP尿苷-5′-二1000U分析标准品，99%
5′-NT5′-核苷解酶5克BR,1000BAEEu/mg,橹豆
5′-ITP，3Na肌苷-5'-三三盐500uUSP级，95%
5′-IMP，2Na肌苷-5'-单二盐500u高，
5′-IDP，3Na肌苷-5'-二三盐10KUBR，
5′-IDP，2Na肌苷-5'-二二盐2000uBR，97%
5′-GMP，2Na5′-鸟苷二500u高，97%
AEC(过氧化物酶显色底物)价格MeropenemIroquoishomeoboxprotein3Irx3蛋白抗体ELISAKitforADisintegrinAndMetalloprotease10(ADAM10)
MesalamineLHX6转录子LHX6抗体ELISAKitforProteinKinase,AMPActivatedAlpha1(PRKAa1)
MRP8+MRP14多药耐药相关蛋白8/9/14抗体ELISAKitforForkheadBoxProteinP1(FOXP1)
NEU4神经酶4抗体ELISAKitforForkheadBoxProteinO1(FOXO1)
MesoridazineBesylatePPHLN1脉周蛋白1抗体（胃癌抗原蛋白Ga50）ELISAKitforForkheadBoxProteinC1(FOXC1)
MestranolS100alpha2S100A2抗体ELISAKitforForkheadBoxProteinO3(FOXO3)
SART1T淋巴细胞识别的鳞状细胞癌抗原抗体ELISAKitforClusterOfDifferentiation14(CD14)
MetforminHydrochlorideSCELSCEL蛋白抗体ELISAKitforMembraneProtein,Palmitoylated2(MPP2)
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验底物范围较广，包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物，在水和醇中不溶解。多数情况下，推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中，辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色，且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB，0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3％ (W
素与生物素高度特异性结合的关系来放大免疫组化信号，但此方法有产生内源性生物素背景的可能性。而酶标聚合物法，利用聚合物与二抗结合，形成聚合物-二抗复合物，实现信号放大，该方法不受内源性生物素的干扰。 表 2 免疫组化多种检测系统分类 图 2 酶标聚合物法检测系统 图 3 链霉亲和素-生物素法检测系统 在显色法中，针对 HRP（辣根过氧化物酶）显色系统，其常用底物为DAB/AEC（HRP/DAB 呈棕褐色染色，具有很好的光稳定性，HRP/AEC 呈红色染色，在阳光下会褪色，不易保存。 基础 IHC
底物范围较广，包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺／金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物，在水和醇中不溶解。多数情况下，推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中，辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色，且在水及醇中稳定。DAB／金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1．需要的溶液和特殊设备 DAB，0．05mol／LTris缓冲液(pH7．6)； 0．3％
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