- 询价
- 上海研生
- YSRIBIO-C5842
- 进口、国33产
- 2025年07月13日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
E.coli DH5α
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
200μl
1．DH5α甘油菌价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称：DH5α甘油菌价格英文名称：E.coli DH5α
产品规格：200μl
发货周期：1～3天
本产品是收集生长在对数期的DH5α菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。DH5α常用于质粒扩增和质粒构建。
注意事项
1.使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。
2.为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
储存条件-20℃，有效期一年。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
大鼠肌球蛋白MYS定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠横纹肌辅肌动蛋白αsmActininα定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠血纤蛋白原Fbg定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠β内啡肽βEP定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠胃动素MTL定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠酶CA定量检测试剂盒 免疫测定
大鼠心肌细胞膜B1AR Rat B1AR ELISA Kit
大鼠BALP Rat BALP ELISA Kit
大鼠I 型胶原C 端肽 Rat CTXI ELISA Kit
大鼠内皮素（ET1)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Endothelin1 ELISA Kit
大鼠凝血子IX Rat F IX ELISA Kit
大鼠凝血酶原段F1+2 Rat F1＋2 ELISA Kit
大鼠生长激素释放肽（Ghrelin)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Ghrelin ELISA Kit
DH5α甘油菌价格 15号染色体开放阅读框52抗体 C7 ELISA Kit 补体7(C7)ELISA试剂盒
次黄嘌呤;6-Hydroxypurine 订购|咨询 规格 20mg
2号染色体开放阅读框89抗体 C3SP ELISA Kit 补体3裂解产物(C3SP)ELISA试剂盒
重楼皂苷Ⅶ;Polyphyllin VI 订购|咨询 规格 20mg
凋亡加强结构域蛋白15抗体 C1INH-IgG ELISA Kit 补体1抑制物抗体-IgG(C1INH-IgG)ELISA试剂盒
补骨脂;Bakuchiol 订购|咨询 规格 20mg
BCL10结合蛋白和激活核转录子抗体 C1INH-IgM ELISA Kit 补体1抑制物抗体-IgM(C1INH-IgM)ELISA试剂盒
白花前胡素E;Praeruptorin 订购|咨询 规格 20mg
慢性淋巴细胞白血病缺失6蛋白抗体 C1INH ELISA Kit 补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA试剂盒
五脂素;Anwuligan 订购|咨询 规格 20mg
13号染色体开放阅读框38抗体 C1q ELISA Kit 补体1q(C1q)ELISA试剂盒
喹;品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格 0.1g
14号染色体开放阅读框140抗体 VN/CD51+CD61 ELISA Kit 玻连蛋白/体外粘连蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA试剂盒
;品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格 0.1g
阳离子转运调节样蛋白2抗体 VTN ELISA Kit 玻连蛋白(VTN)ELISA试剂盒
敌草快;品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格 0.1g
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验woowe97417 要转一个带氯霉素抗性的质粒到DH5α保存，但是发现用的DH5α对氯霉素不敏感，氯霉素是用无水乙醇配的，有做过类似实验的站友帮忙解答一下，谢谢啦！ gingivalis 严谨型质粒 25 ug/ml 松弛性质粒 170 ug/ml 《现代分子生物学实验技术》--P753 (卢圣栋) DH5α应该对氯霉素敏感，如果在上述两个浓度条件下，DH5α能生长
相关专题 大肠杆菌的基因工程 Xl1-Blue菌株 基因型：endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。 特点：具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。 用途：分子 克隆和质粒提取。 DH5α菌株 基因
法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞：处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子)：带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞，用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态，然后与 pUC18质粒共保温，实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因，因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性，用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释，在含氨
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
