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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
29
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
1.彩色显影液哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:彩色显影液哪家好英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
用途
免疫金银染色、彩色显影
注意事项
主要由萘酚、硝酸银、异丙醇等组成。AB液混合之后,室温下显影。
储存条件4℃,避光,3个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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LevomenolNIR2膜脂转移蛋白1抗体ELISAKitforReceptorIForTheFcRegionOfImmunoglobulinG(FcgRI)
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文献和实验法完全配对时,结合力即减弱,因此可借着增加温度,而使得非标的 DNA 序列脱离。 在经过增温处理以确定仅存专一性结合后,存在的足量金纳米粒子会使样品呈现粉红色(样品莫耳浓度为 10-8 、未以银离子显影液处理者),但是当样品中的标的 DNA 浓度降低时,粉红色即变淡,无法以肉眼觉察(样品莫耳浓度为 10-10 、未以银离子显影液处理者)。 为了解决这个问题,研究人员发现可加入含有银离子的显影液。因为金纳米粒子可促进银离子与显影液中所含还原剂(氢)之间的反应而生成还原态的银,银
(一)硝酸银显影液①1%明胶60mi.②柠檬酸缓冲液10ml,pH3.4(柠檬酸2.55g,柠檬酸钠2.35g,加水至10m1)。③对苯二酚1~1.7g,加水至30ml.④硝酸银50~100mg,加水至2ml.用前①~③液混合过滤,最后加入④液。(二)乳酸银显影液①10%一20%阿拉伯树胶60ml.②柠檬酸缓冲液10ml(配法同上)。③对苯二酚0.85g,加水至15mi.④乳酸银110mg,加水至15ml.以上①~③液用前混合过滤,最后加入④液。(三)醋酸银显影液①100mg醋酸银溶解在50
在镀有一层氧化硅的硅版上,以光蚀刻法制造出来一种微小电极,在电极间有一极细小的沟。在此沟中先固定一特定的 DNA 序列(a),再将电极浸入一种含有标的 DNA 序列(ab)与带有另一特定序列(b)的金纳米粒子的溶液中。此标的 DNA 序列的两端可分别与电极沟中的与金纳米粒子上的 DNA 序列配对结合,因此可将金纳米粒子固定在电极沟之间并形成紧密排列,再以含硝酸银的显影液加以处理。 因为金纳米粒子可促进银的还原反应,而使得银沉积在上面,浸在显影液中的时间愈久,所沉积的银粒就愈多
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