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- 2025年07月14日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
32
- 英文名：
GolgiGreen
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
200μg
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：高尔基体绿色荧光探针说明书
英文名称：GolgiGreen
产品规格：200μg
发货周期：1～3天
高尔基体绿色荧光探针GolgiGreen（NBDC6-神经酰胺）可以用来研究神经鞘脂类的运输和代谢机制，也可以用来作为活细胞或固定细胞内高尔基体的选择性染料。NBD染料对于环境敏感，在水中荧光信号微弱，但是在非质子溶剂和非极性环境中荧光增强，Ex/Em=466/536nm。
化学名称C6-NBD-CERAMIDE
分子式C30H49N5O6
分子量575.74
储存-20℃，避光，有效期一年。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2,6-二-1,4-二-3,5-啶二羧二酯TBEV IgM (tick borne encephalitis virus) (FSME)
1,2,5-三Testosterone
米拉贝隆Testosterone (rat) Elisa
2-萘Testosterone (serum) CLA
头孢噻肟Testosterone, (Dihydrotestosterone)
奥司他韦Testosterone, Free
5-溴-2--3-啶羧酯Testosterone, Saliva
泼尼松Tetanus toxin IgG (quant.)
2-萘酰TGF beta 1 (human) (Transforming Growth Factor)
槐角苷TGF beta 2 (human) (Transfornimg Growth Factor)
高尔基体绿色荧光探针说明书D酪英文名(EN)5Bromochlorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)5G
D酪盐盐英文名(EN)4Bromonitrobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)5G
D亮英文名(EN)4Bromofluorobenzotrifluoride,98%特价促销 规格(SP)1G
D亮盐盐英文名(EN)4Bromofluorobenzotrifluoride特价促销 规格(SP)1G
D绵子糖五水；蜜三糖五水英文名(EN)3Bromofluorobenzotrifluoride,96%特价促销 规格(SP)1G
D木糖英文名(EN)3Bromofluorobenzotrifluoride,98%特价促销 规格(SP)1G
D木糖(标准品)英文名(EN)3Bromomethylbenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)1G
D鸟盐盐英文名(EN)3Bromochlorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)5G
D苹(>98%，BR)英文名(EN)2Bromofluorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)250MG
D脯英文名(EN)2Bromofluorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)1G
D葡糖糖二二水英文名(EN)2Bromonitrobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)5G
D葡萄糖英文名(EN)5Bromofluorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)5G
D葡萄糖英文名(EN)4Fluoro(trifluoromethyl)aniline,特价促销 规格(SP)1G
D葡萄糖(> 98%，BR)英文名(EN)4Bromo(trifluoromethyl)aniline,98%特价促销 规格(SP)1G
D葡萄糖内英文名(EN)4Aminofluorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)1G
D葡萄糖无水英文名(EN)2Fluoro(trifluoromethyl)aniline,特价促销 规格(SP)1G
D葡萄糖一水英文名(EN)4Fluoro(trifluoromethyl)aniline,特价促销 规格(SP)5G
D鞘英文名(EN)4Amino(trifluoromethyl)benzonitril...特价促销 规格(SP)1G
操作步骤(仅供参考)：
1、高尔基体绿色荧光探针说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：高尔基体绿色荧光探针说明书
英文名称：GolgiGreen
产品规格：200μg
发货周期：1～3天
高尔基体绿色荧光探针GolgiGreen（NBDC6-神经酰胺）可以用来研究神经鞘脂类的运输和代谢机制，也可以用来作为活细胞或固定细胞内高尔基体的选择性染料。NBD染料对于环境敏感，在水中荧光信号微弱，但是在非质子溶剂和非极性环境中荧光增强，Ex/Em=466/536nm。
化学名称C6-NBD-CERAMIDE
分子式C30H49N5O6
分子量575.74
储存-20℃，避光，有效期一年。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2,6-二-1,4-二-3,5-啶二羧二酯TBEV IgM (tick borne encephalitis virus) (FSME)
1,2,5-三Testosterone
米拉贝隆Testosterone (rat) Elisa
2-萘Testosterone (serum) CLA
头孢噻肟Testosterone, (Dihydrotestosterone)
奥司他韦Testosterone, Free
5-溴-2--3-啶羧酯Testosterone, Saliva
泼尼松Tetanus toxin IgG (quant.)
2-萘酰TGF beta 1 (human) (Transforming Growth Factor)
槐角苷TGF beta 2 (human) (Transfornimg Growth Factor)
高尔基体绿色荧光探针说明书D酪英文名(EN)5Bromochlorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)5G
D酪盐盐英文名(EN)4Bromonitrobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)5G
D亮英文名(EN)4Bromofluorobenzotrifluoride,98%特价促销 规格(SP)1G
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D绵子糖五水；蜜三糖五水英文名(EN)3Bromofluorobenzotrifluoride,96%特价促销 规格(SP)1G
D木糖英文名(EN)3Bromofluorobenzotrifluoride,98%特价促销 规格(SP)1G
D木糖(标准品)英文名(EN)3Bromomethylbenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)1G
D鸟盐盐英文名(EN)3Bromochlorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)5G
D苹(>98%，BR)英文名(EN)2Bromofluorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)250MG
D脯英文名(EN)2Bromofluorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)1G
D葡糖糖二二水英文名(EN)2Bromonitrobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)5G
D葡萄糖英文名(EN)5Bromofluorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)5G
D葡萄糖英文名(EN)4Fluoro(trifluoromethyl)aniline,特价促销 规格(SP)1G
D葡萄糖(> 98%，BR)英文名(EN)4Bromo(trifluoromethyl)aniline,98%特价促销 规格(SP)1G
D葡萄糖内英文名(EN)4Aminofluorobenzotrifluoride,特价促销 规格(SP)1G
D葡萄糖无水英文名(EN)2Fluoro(trifluoromethyl)aniline,特价促销 规格(SP)1G
D葡萄糖一水英文名(EN)4Fluoro(trifluoromethyl)aniline,特价促销 规格(SP)5G
D鞘英文名(EN)4Amino(trifluoromethyl)benzonitril...特价促销 规格(SP)1G
操作步骤(仅供参考)：
1、高尔基体绿色荧光探针说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验相关实验
主要分为两大类，第一类是 PKH67（绿色荧光）/PKH26（红色荧光），由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合，所以染色效果较好，应用较广泛。 图1 PKH67 标记的外泌体与神经元之间相互作用 Acta Neuropathol Commun. 2018 Feb 15;6(1):10. 图2 PKH26 标记的外泌体与 MDA‐MB‐231 细胞共培养 Cancer Sci. 2019 Oct;110(10):3173-3182. 第二类是 Di 系列的亲脂性染料，包括DiI（橙色荧
一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件，发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体膜电位崩溃，细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针，可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态，两者发射光谱不同。在正常细胞内，线粒体膜电位较高，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可产生红色荧光；凋亡早期，线粒体膜电位降低，JC-1不能聚集在线粒体基质中，此时JC-1为单体
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