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- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- 细胞类型：
详见说明书
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 库存：
29
- 英文名：
大鼠腹膜间皮细胞
- 生长状态：
贴壁
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
电询
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
腹膜间皮细胞
- 规格：
详见说明书
产品名称： 大鼠腹膜间皮细胞规格
商品货号： EY-Z7397
中文名称： 大鼠腹膜间皮细胞
细胞数量：1*10^6
组织来源：腹膜间皮细胞
细胞种属：大鼠
生长特性：贴壁
细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养基：H-DMEM，90%；FBS，10%；双抗。
传代方法：1:2-1:4
培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃
细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1.
复苏细胞步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
细胞运输：干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶）
培养：
1.取出小鼠后沥干酒精，放入超净台内，固定在泡沫板上。
2.用镊子提起皮肤，用解剖剪剪开皮肤一个横切口，将皮肤向上撕开，然后剪开肌肉等，暴露出腹腔，在左侧找到脾脏，用弯头眼科镊取出脾脏，置于无菌培养皿中。
3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次，并剔除多余无用的组织。
4.将筛网置于平皿中，脾脏置于筛网上，用弯头镊镊住，轻轻在筛网上进行碾磨，同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。
5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中，离心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。
6.加入10ml培养液，吹打混匀，取样计数。
7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中，轻轻摇晃混匀，在培养瓶上。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象
实验事项：
1. 大鼠腹膜间皮细胞规格 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。
以下是公司正在促销的产品：
生姜油英文名称：Ginger oil规格：0.2ml放素D
荆芥油英文名称：Catnip oil规格：0.2ml放线
反丁烯二酸(富马酸)英文名称：Fumaric acid (fumarate)规格：20mg杆菌肽溶液
槲皮苷英文名称：Quercitrin规格：20mg红霉素溶液
土贝母苷甲英文名称：Tubeimoside规格：20mg环孢霉素A
白黎芦醇英文名称：Resveratrol规格：20mg利福平溶液
麦角甾苷（毛蕊花糖苷）英文名称：Acteoside (Mao Ruihua glycoside)规格：约20mg链脲佐菌素溶液
雪胆素甲英文名称：Hemslecin a规格：20mg两性霉素B
棉酚英文名称：Gossypol规格：20mg硫酸卡那霉素
7—甲氧基香豆素英文名称：7 - methoxy coumarin规格：20mg硫酸卡那霉素
异文名称：Isoborneol规格：20mg硫酸链霉素溶液
三十烷醇英文名称：Thirty alkanol规格：20mg硫酸庆大霉素
D-木糖英文名称：D- xylose规格：50mg硫酸新霉素干粉
蔗糖英文名称：Sucrose规格：50mg氯霉素干粉
D（－）阿拉伯糖英文名称：D (-) Arabia sugar规格：30mg氯霉素溶液
大鼠腹膜间皮细胞规格 Tca-81131*10^6Homo sapiens, humanadherentRPMI-1640+20% FBS+1% P/Sepithelial
TE-11*10^6Homo sapiens, humanadherentRPMI-1640+10% FBS+1% P/Sepithelial
THP-11*10^6Homo sapiens, humansuspensionRPMI-1640+10% FBS+0.05mM β-mercaptoethanol+1% P/Smonocyte
TM31*10^6
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文献和实验模型制备方法 实验动物选择7-9月龄的雌性SD或Wistar大鼠（大鼠月龄越大，其病理表现越接近成年人疾病特点）。 动物麻醉后，取仰卧位固定。腹部备皮、消毒、铺洞巾。以腹正中线距阴道口3.5cm 处为切口，向下切开皮肤1.5-2cm，钝性分离皮下组织，切开肌层、腹膜，打开腹腔。拨开脂肪层找到子宫（膀胱背侧），沿着输卵管轻柔拉出，其末端可见脂肪包裹呈粉红色桑葚状的卵巢，用组织钳夹闭卵巢下输卵管，将输卵管结扎，剪除卵巢，将断端输卵管送回腹腔，同样方法去除另一侧卵巢。逐层
模型，在复制时，应尽量考虑到今后临床应用和便于控制其疾病的发展，以利于研究的开展。如雌激素能终止大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能终止人的妊娠。因此，选用雌激素复制大鼠和小鼠终止早期妊娠的模型是不适用的，因为在大鼠和小鼠筛选带有雌激素活性的药物时，常常会发现这些药物能终止妊娠，似乎可能是有效的避孕药，但一旦用于人则并不成功。所以，如果知道一个化合物具有雌激素活，用这个化合物在大鼠或小鼠观察终止妊娠的作用是没有意义的。又如选用大小鼠作作实验性腹膜炎就不适用，因为它们对革兰氏阴性细菌具有较高的抵抗力，很不容易造成
模型，在复制时，应尽量考虑到今后临床应用和便于控制其疾病的发展，以利于研究的开展。如雌激素能终止大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能终止人的妊娠。因此，选用雌激素复制大鼠和小鼠终止早期妊娠的模型是不适用的，因为在大鼠和小鼠筛选带有雌激素活性的药物时，常常会发现这些药物能终止妊娠，似乎可能是有效的避孕药，但一旦用于人则并不成功。所以，如果知道一个化合物具有雌激素活，用这个化合物在大鼠或小鼠观察终止妊娠的作用是没有意义的。又如选用大小鼠作作实验性腹膜炎就不适用，因为它们对革兰氏阴性细菌具有较高的抵抗力，很不容易造成
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