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人类甲状腺未分化癌培养

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  • 上海一研
  • EY-Z7103
  • 进口、国产
  • 2025年07月09日
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    • 供应商

      上海一研

    • 库存

      22

    • 英文名

      人类甲状腺未分化癌

    • 生长状态

      贴壁

    • 年限

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    • 运输方式

      电询

    • 器官来源

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    • 是否是肿瘤细胞

    • 免疫类型

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    • 物种来源

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    • 相关疾病

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    • 组织来源

      甲状腺癌;女性

    • 规格

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    培养步骤:
    人类甲状腺未分化癌培养对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    以下是产品信息的认购信息:
    产品名称: 人类甲状腺未分化癌培养
    商品货号: EY-Z7103
    中文名称: 人类甲状腺未分化癌
    规格:T25

    组织来源:甲状腺癌;女性
    生长特性:贴壁生长
    细胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
    特征特性:人甲状腺未分化癌细胞(anaplastic thyroid carcinoma, ATC),未分化,每支细胞量1×106。每个批次均通过本库支原体检测,结果为阴性。经本库STR检测结果无误。STR结果如下:D5S818: 10,13;D13S317: 9,9;D7S820: 8,10;D16S539: 10,11;vWA: 14,16;THO1: 6,7;Amelogenin: X,X;TPOX: 8,8;CSF1PO: 9,12
    培养条件:EMEM + 2mM Glutamine + 1% NEAA + 10% FBS.
    传代方法:1:6传代
    冻存条件:无血清细胞冻存液
    细胞传代步骤:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1.
    细胞复苏步骤:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    细胞冻存步骤:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

    产品细节图片1 
    操作流程:
    1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
    1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
    1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
    1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
    1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
    1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
    1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。 
    1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线。
    细胞的种类:
    第一种:
    是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
    第二种:
    是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
    质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
    热启动聚合酶 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PPAP2AWB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  Flow-Cyt=1:100-500  IF=1:100-500Anti-PPAP2A

    热启动聚合酶预混液 KLH conjugated synthetic peptide derived from human P16/CDKN2AELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:50-200Anti-P14ARF/CDKN2A
    GoTaq® G2绿色预混液 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Peroxiredoxin 6 (55-100aa)WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500Anti-PRDX5/PRDX6
    5X 绿色GoTaq® 反应缓冲液 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PRDX1 (51-95aa)WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500Anti-PRDX1
    快速连接系统 KLH conjugated synthetic peptide derived from human P53(wt-p53)WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500Anti-P53(wt-p53)(D2F7)
    ISOQUANT® 异天冬氨酸检测试剂盒 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PAR3WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  Flow-Cyt=1:20-100  ICC=1:100-500  IF=1:50-200Anti-PAR3
    MagaZorb® DNA试剂盒 KLH conjugated synthetic peptide derived from human P2X3 (241-270aa)WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500Anti-P2RX3/ATPreceptor
    蛋白酶 K KLH conjugated synthetic peptide derived from human PAK1WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500Anti-PAK1
    Y染色体缺失检测系统 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PLRP1/PNLIPRP1 (385-430aa)WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500Anti-PLRP1/PNLIPRP1
    MSI 分析系统 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PAPPA (1366-1399aa)WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500Anti-PAPPA
    人类甲状腺未分化癌培养CRTAM  CRTAM抗体规格 0.2ml

    CRP(C11F2)  C-反应蛋白单克隆抗体规格 0.1ml
    CRP  C-反应蛋白抗体规格 0.1ml
    CROT/COT  过氧化物酶体肉碱酰基转移酶抗体规格 0.2ml
    CROT  肉碱氧位甲基转移酶抗体规格 0.2ml
    CRMP5  二氢嘧啶酶相关蛋白5抗体规格 0.2ml
    CRMP4/DRP3  脑衰蛋白反应调节蛋白4抗体规格 0.2ml
     

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