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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 库存:
45
- 英文名:
小鼠肺动脉平滑肌细胞
- 生长状态:
贴壁
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
肺动脉平滑肌
- 规格:
详见说明书
小鼠肺动脉平滑肌细胞对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
以下是产品信息的认购信息:
产品名称: 小鼠肺动脉平滑肌细胞
商品货号: EY-Z7044
中文名称: 小鼠肺动脉平滑肌细胞
细胞数量:1*10^6
组织来源:肺动脉平滑肌
细胞种属:小鼠
生长特性:贴壁
培养基:H-DMEM,90%;FBS,10%;双抗。
传代方法:1:2-1:4
培养条件:Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃
细胞冻存:Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%(for reference)Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
细胞运输:干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶)
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
PCR 优化试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human Smad3 (31-80aa)WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500Anti-Smad3
合成序列 31178KLH conjugated synthetic peptide derived from human S100B (20-65aa)WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-S100B
合成序列 31177KLH conjugated synthetic peptide derived from human Sema6AWB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500Anti-Sema6A
合成序列 31176KLH conjugated synthetic peptide derived from human S100-A9 (61-114aa)ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-S100-A9/MRP14/CFAG/CalgranulinB
合成序列 31180KLH conjugated synthetic peptide derived from human SPANXWB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SPANX
合成序列 31179KLH conjugated synthetic peptide derived from human SREBP-2 C-terminusWB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SREBP-2
ADCC报告基因生物活性检测效应细胞系,可扩增型KLH conjugated synthetic peptide derived from human SLAMF7 C-terminusWB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SLAMF7/CD319/CS1
肿瘤坏死因子受体GITR测定试剂盒KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human NFATC4 around the phosphorylation site of Ser168 + Ser170 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-phospho-NFATC4(Ser168+Ser170)
非放射性细胞毒性检测试剂盒 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from mouse eNOS around the phosphorylation site of Ser632 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-Phospho-eNOS(Ser1176)
热启动DNA聚合酶,定制 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human NFKBIB around the phosphorylation site of Ser23 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-Phospho-IKBbeta(Ser23)
小鼠肺动脉平滑肌细胞Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的驴抗豚鼠IgG规格 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的驴抗豚鼠IgG规格 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的驴抗豚鼠IgG规格 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE PE标记的驴抗豚鼠IgG规格 0.1ml
Donkey Anti-Guinea
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文献和实验动脉平滑肌细胞 (Arterial smooth muscle cells)
除了对器官的结果有作用外,还具有重要的新陈代谢影响,尤其是在各种炎性反应中。 在细胞培养中发现:这些细胞具有新陈代谢的动态 变化-合成、分泌细胞外的基质蛋白、粘多糖以及各种细胞和细胞间信号传导的蛋白,例如白介素、趋化因子、肽生长因子等。分泌的细胞信号蛋白主要存在于有炎性反应的平滑肌器官中,一些因子还刺激平滑肌的移动 、增殖和收缩。控制信号蛋白合成的细胞信号途径与调节先天性免疫反应中的一样,因此,可能参与了多种疾病的发病,包括动脉粥样硬化手足多汗症、肠炎以及早产。平滑肌细胞
1、传代前24h先将组织块去除:等到细胞覆盖瓶底80%以上后进行组织块去除操作。可用弯头玻璃吸管将组织块轻轻挑起吸出,确保无组织块留下,以防坏死污染。2、胰酶消化:倒掉旧培养液,用D-HANKs液清洗两边,加入已预热(37度)10min的0.25%胰酶消化液2ml,2-3min后镜下观察,发现胞质收缩,细胞间隙增大,立即用含胎牛血清的培养液终止消化。3、弯头吸管吹打细胞:吹打一定时间后到镜下观察,在没吹打起细胞区域继续吹打,动作要柔和。4、离心:2000转5min。倒掉上清液,加入培养液,吹
培养液:MEM(GIBCO),20%FBS,双抗100IU/ml; 原代细胞培养:取5kg左右兔空气栓塞法处死后断头,于无菌条件下从枕大孔处用大止血箝扳开颅骨暴露并小心取出脑组织放入装有DMEM的培养皿中,用眼科镊分离基底动脉后按常规平滑肌方法贴块培养。 传代: (1)吸除培养瓶内旧培养液。 (2)D-Hanks液冲洗2遍。 (3)加入消化液少许,以能覆盖瓶底为限。 (4)倒置显微镜观察发现细胞胞质回缩、细胞间隙增大时,立即终止消化。 (5)吸除消化液,向瓶底注入D-Hanks液
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