- 询价
- 上海研生
- YSRIBIO-C5438
- 进口、国产
- 2025年07月16日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
39
- 英文名：
Prestained Protein Marker(20～110kDa) For Western Blot
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100μl(20～50T)
一、Westernblot预染蛋白Marker(19～110kDa)价格分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：Westernblot预染蛋白Marker(19～110kDa)价格英文名称：Prestained Protein Marker(20～110kDa) For Western Blot
产品规格：100μl(20～50T)
发货周期：1～3天
本制品是专门为WesternBlot试验设计的分子量标准。传统的WesternBlot试验需要使用预染蛋白Marker来跟踪检测阳性抗原信号和转膜效率。但预染蛋白Marker无法在胶片上曝光，曝光信号需要根据膜上的预染蛋白Marker来判断，另外预染蛋白Marker都经过化学修饰，经过化学修饰的蛋白在SDS-PAGE电泳过程中迁移率发生改变，分子量信息不再准确，往往导致WesternBlot结果判断出现较大偏差。
我司WesternBlotMarker由7种不同分子量的蛋白组成(19、20、35、45、60、65、110KDa)，其中19、45、65KDa三条带为蓝色预染蛋白，用于SDS-PAGE胶电泳时控制蛋白的电泳分离率和监测蛋白转膜效率，其他4种蛋白都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合,因此预染发光WesternBlotMarker就能与抗原在同一张胶片上曝出信号，阳性信号可以直接通过WesternBlotMarker的位置来判断。另外，预染发光WesternBlotMarker还可作为WesternBlot试验的阳性对照。
保存条件-20℃保存，有效期2年。避免反复冻融，建议分装后于-20℃保存。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
dADP，2Na2′-脱腺苷-5′-二二盐1000uBR
DAB substrate tabletsDAB片剂1公斤AR
DAB试剂25克BR，90%
DAB3,3',4,4'-联四100克BR，85%
D-AAOD-酶5克BR，4000u/mg
D-2-Aminobutyric acidD(-)-2-25克BR，99%
D-(−)-TagatoseD-塔格糖250毫克BR，牡蛎提取
D-(−)-LyxoseD-异木糖25毫克BR，
D-(−)-ArabinoseD-树胶糖25毫克BR，100mM
D-(+)-TuranoseD（+）松二糖10克BR
D-(+)-Trehalose dihydrate漏芦糖25U高，
D-(+)-Tartaric acid disodium salt20毫克BR，
D-(+)-SorboseD(+)-山梨糖30次/100ul/支AR
D-(+)-Raffinose pentahydrate棉子糖1克BR，90%
D-(+)-Melezitose monohydrateD(+)松三糖一水合物5毫克BR，97%，β型
Westernblot预染蛋白Marker(19～110kDa)价格D-酯盐盐SwertiamarinCancer/testis antigen 1B/1A 肿瘤/抗原1B/1A(IL-2sR)ELISA Kit 大鼠白介2可溶性受体白介15(IL-15)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产L-酪酯盐盐epimedin A特价供应ADAMTS7(NT) 整合样蛋白酶与凝血酶1型-7抗体 (N端抗体)c (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 兔心肌特异性肌钙蛋白T小鼠白介15(IL-15)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产D-亮酯盐盐epimedin B现货促销CTAG1B/Cancer/testis antigen 1 肿瘤/抗原1BCherax quadricarinatus lipovitellin/vitellin,Lv/Vn ELISA Kit 红螯光壳螯虾卵黄脂蛋白/卵黄蛋白大鼠白介15(IL-15)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产D-丝酯盐盐epimedin C特价促销ADAMTS8 整合样蛋白酶与凝血酶8型抗体Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV ELISA Kit 罗氏沼虾诺达病白介16(IL-16)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验整理蛋白版06年2月无人应助贴如下: [求助]蛋白质连接的问题 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5458496&sty=1&tpg=19&age=0 [求助]dystrophin和dystrophin gene http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5458022&sty=1&tpg=19&age=0 [求助]等电聚焦的临床应用（主要在检验医学中的） http://www
含量 请问各位战友：低温冻存的组织块欲用WesternBlot技术检测其微管蛋白含量，如何进行组织前处理？ http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5022186&sty=1&tpg=20&age=0 [求助]凝胶阻滞 请问有做过凝胶阻滞实验的吗？一般跑变性胶还是非变性胶啊？ http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5022974&sty=1&tpg=20&age=0 [求助] 做一个1.8k的基因
，或400mA，4h。注意不同蛋白的要求不同。 干转：用电转液淋洗石墨电极，滤纸吸干，铺上胶，再滴少许电转液，以1.5mA/cm2凝胶面积转移1-2小时。负载电压不宜超过1V/cm2胶面积。 五．封闭及杂交 1．封闭： 将膜从电转槽中取出，去离子水与PBST或TTBS稍加漂洗，浸没于封闭液中缓慢摇荡一小时。必要时可先用丽春红染色（2%乙酸，0.5%丽春红的水溶液）观察蛋白条带，再用去离子水和TTBS将丽春红洗脱后封闭，如用蛋白marker则可省略此步。 2．结合一抗： 一抗的准备：使用
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
