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BCA蛋白浓度测定试剂盒500微孔(50T)

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  • 上海谷研
  • GOY-D6339
  • 进口、国产
  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      BCA Protein Assay Kit

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海谷研

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      500微孔(50T)/500微孔(50T)*10

    实验操作步骤:
    是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤
    方法/步骤
    96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。
    向培养板加入 10μl 不同浓度的待测物质。
    将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,12, 24 或 48 小时)。
    向每孔加入 10μl CCK8 溶液(engreen) (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响 OD 值的读数)。
    5. 将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
    用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
    如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加10μl0.1 M HCl溶液或者1%wSDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化 。
    特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
    产品名称 BCA蛋白浓度测定试剂盒500微孔(50T)
    英文名称 BCA Protein Assay Kit
    规格 500微孔(50T)/500微孔(50T)*10

    英文名称:BCA Protein Assay Kit
    储存条件:BSA附件-20℃,其它试剂RT,有效期:1年
    单位:盒
    产品简介:
    碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA, EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
    操作说明:
    . 微孔酶标仪法
    1. 配制工作液:根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
    2. 稀释标准品:取10μL BSA标准品用PBS稀释至100μL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL。将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足至20μL。
    3. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20μL到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
    4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
    . 分光光度计法 如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。步骤如下:
    1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
    2. 稀释标准品:取100μL BSA标准品用PBS稀释至1mL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL。
    3. 取八支(或者更多)5mL离心管,标上号,4.37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。
    蛋白质与免疫功能:
    蛋白质是机体免疫防御功能的物质基础,当蛋白质营养不良时,其有关组织器官的结构和功能均受到不同程度的影响。
      (一)免疫器官
      蛋白质热能营养不良明显影响胸腺及外周淋巴器官的正常结构。且这种损伤是不可逆的,一旦受损其结构和功能恢复极为缓慢。
      (二)细胞免疫
      蛋白质营养不良时主要影响T淋巴细胞的数量和功能,医学教|育网搜集整理外周血中T淋巴细胞总数显著减少,对抗原诱导的增殖反应降低。
      (三)体液免疫
      蛋白质营养不良时,上皮及粘膜组织分泌液中SIgA显著减少,溶菌酶水平下降,使其组织抵抗力降低,甚至可导致感染扩散。


    产品细节图片1

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