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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
RecombinantHumanCXCL8/IL-8
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
10ug
规格: 10ug
KnownasInterleukin-8;IL-8;C-X-CMotifChemokine8;CXCL8;Emoctakin;GranulocyteChemotacticProtein1;GCP-1;Monocyte-DerivedNeutrophilChemotacticFactor;MDNCF;Monocyte-DerivedNeutrophil-ActivatingPeptide;MONAP;Neutrophil-ActivatingProtein1;NAP-1
1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
RecombinantHumanCXCL8/IL-8哪里有买尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
ELISA Kit for Human Pantetheinase 0.156-10 ng/mL
人胱天蛋白酶14(CASP14)ELISA试剂盒 1.56-100 mIU/L
ELISA Kit for Human Metallothionein-1A 1.56-100 ng/mL
FBXL7 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P 50 µg
人细胞凋亡调整器BAX(Apoptosis regulator BAX)ELISA试剂盒 0.312-20 ng/mL
人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 15.6-1000 pg/mL
ELISA Kit for Human Interleukin-28B 15.6-1000 pg/mL
Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
CD155 / PVR / NECL5 抗體, 兔多抗 ELISA WB 400 µg
人基底细胞粘附分子(Basal cell adhesion molecule)ELISA试剂盒 0.156-10 ng/mL
ELISA Kit for Human Leukocyte cell-derived chemotaxin-2 0.156-10 ng/mL
CD3e / CD3 epsilon 抗體 (PerCP), 鼠單抗 FCM 25 Test
RecombinantHumanCXCL8/IL-8哪里有买西维因(分析标准品,98%) Carbaryl 25-2 质量规格:分析标准品,98%
Choline bitartrate 酒石酸胆碱 25g 瓶
槲皮素 Quercetin dihydrate 6151-25-3 质量规格:HPLC>85%,二水BR
克林霉素 Clindamycin HCl 462-39-5 质量规格:>8μg/mg,USP,BR
奈拉滨 Nelarabine 1032-29-9 质量规格:>99.0%,细胞培养级
利巴韦林(标准品) Ribavirin 36791-04-5 质量规格:HPLC>98%,标准品
IKK-16,选择性IKK抑制剂 IKK16 873225-46-8 质量规格:>98%,BR
Peonidin Chloride 化芍药素 134-01-0 1mg
茴三硫(标准品) Anethole trithione 532-11-6 质量规格:含量测定
运动升压素 Kinetensin 103131-69-7 质量规格:>95%,BR
3,6-二基菲(>95.0%(GC)) 3,6-Dimethylphenanthrene 1576-67-6 质量规格:>95.0%(GC)
瑞氏-姬姆萨复合染液 5ml 瓶
贝凡洛尔(标准品) Bevantolol hydrochloride 42864-78-8 质量规格:含量测定
(R)-(+)-O-去卡维地洛 (R)-(+)-O-Desmethyl Carvedilol 123372-14-5 质量规格:进口
十七碳酸(98%) Heptadecanoic acid 506-12-7 质量规格:0.98
阿尼西坦(标准品) Aniracetam 72432-10-1 质量规格:>98%,标准品
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文献和实验(3)同上。两个磷酸化位点都要做,但是可能在不同的病理条件下,侧重点有所不同,这主要体现在你的论文的讨论中。因此建议实验前多做论文研究,查阅一下别人的发表文章,看看与你的病理模型更相关的是哪个位点。 真爱满行囊 非常感谢你 的回复,现在我遇到的问题是我做出来蛋白总量还有216位点是有变化的,9位因为买的是santa curz的抗体,现在死活做不出来,很头痛,我要说明的问题是他的活性降低,我也看到216位点磷酸化水平降低了,可是现在没有第九位的结果(就是没有办法得到第九
zcy20002001 请问上海哪里有可以做细胞低氧培养的地方,本人想做低氧条件下细胞的信号转导,谢谢! j19s87x 有意可以联系我QQ:59405497 以前做过,也在上海 zcy20002001 没有QQ号,请问你在上海哪个大学或研究所,或者留一个msn 细胞超人 现在很多人都在作信号转导 ,我女朋友博士课题也是在做,挺麻烦的,要做很长时间常
生长。 ING4表达受抑制的细胞植入后,生长速度远远快于正常的对照肿瘤,并发展出更复杂的血管网络。而过量表达ING4的细胞植入后,肿瘤生长速度和血管生长速度都放慢。进一步用高级成像技术检查证实ING4的抑制与更成熟、更复杂的血管网络伴随出现,而过量表达则显著抑制血管发育。 另一组实验表明,ING4 抑制一种称为NF-kappa B的蛋白活动,NF-kappa B已知能刺激在多种癌症中过量表达的基因。ING4抑制因子的丧失引起对NF-kappa-B敏感的基因--干扰素8(Il-8)基因的过量
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