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56
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详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
瓶
产品名称 293T,人胎肾细胞多少钱
规格: 瓶
生长特性:贴壁生长
培养条件:DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法:1:3~1:4传代,一周1~2次
冻存条件:细胞冻存液
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
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CD80 / B7-1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB IHC-P 50 µg
人白介素22(IL-22)ELISA试剂盒 62.5-4000 pg/mL
VLDLR 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
ELISA Kit for Human Relaxin-3 0.156-10 ng/mL
Coagulation Factor XIII B chain / F13B 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
人谷氨酸脱羧酶2(GAD2)ELISA试剂盒 0.78-50 ng/mL
PIGR / Poly-Ig receptor 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
人泛素关联蛋白2(UBAP2)ELISA试剂盒 0.156-10 ng/mL
ELISA Kit for Human High mobility group protein HMG-I/HMG-Y 0.156-10 ng/mL
CCL23 / MIP 3 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
人血小板糖蛋白IX(GPIX)ELISA试剂盒 0.312-20 ng/mL
双睾(Dihydrotestosterone)ELISA试剂盒 78-5000 pg/mL
293T,人胎肾细胞多少钱Tylosin 泰乐菌素 5g 瓶
米龙 Fluorometholone 426-13-1 质量规格:>98%
兔抗马IgG-HRP 0.1ml 支
杆菌肽 Bacitracin 1405-87-4 质量规格:>65IU/MG,BR
6-羧基四基罗丹明;6-TAMRA 6-Carboxytetramethylrhodamine 91809-67-5 质量规格:≥90%;for fluorescence
西汀(标准品) Fluoxetine Hydrochloride 56296-78-7 质量规格:HPLC>98%,标准品
Atropine 阿-颠茄碱 51-55-8 5mg
可溶性淀粉 Starch soluble 95-84-9 质量规格:BR
α-环糊精 α-Cyclodextrin 116-20-3 质量规格:>98%,BR
SABC-POD Kit(不含二抗) 12T 盒
雌激素酮 β-D-葡萄糖苷酸钠盐 Estrone β-D-Glucuronide Sodium Salt 15087-01-1 质量规格:进口
Spectinomycin 壮观霉素 1g 瓶
4,7,13,,24-六氧杂-1,10-二氮杂双环[8,8,8]-二十六烷(>98.0%(GC)(T)) 4,7,13,16,,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane 23978-09-8 质量规格:>98.0%(GC)(T)
兔抗鸡IgG(免疫血清) 0.5ml 支
Kanamycin 卡那霉素 1g 瓶
卡维地洛β-D-葡萄糖苷酸(mixture of diasteromers) Carvedilol β-D-Glucuronide (mixture of diasteromers) 114869--9 质量规格:进口
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文献和实验腺病毒可以在293A细胞中进行转录,表达并可进行包装复制出大量高滴度病毒。293T是一种逆转录包装表达细胞,我做过也可进行表达,但还没有具体鉴定表达后的病毒是否可用。293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5)DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。细胞来源都是人肧肾上皮细胞,293T细胞表达E1A蛋白,SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达E1A 和E1B 蛋白
HEK-293 293A 293S 293T 293FT区别比较
(suspension). 293细胞系是原代人胚肾细胞转染 5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。 293T细胞表达 E1A蛋白,S40大T抗原 ,含有S40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。 293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达 E1A 和 E1B 蛋白。 293细胞分为几种,文献上所提总是笼统的讲293细胞,可293有293A,还有293T,请问二者有什么区别,是否293A是用来包
,他肯定也在乳腺癌细胞做了,但是你不能直接将结果就锁定在ER上,即使ER通路的活性和总量有改变,因为你的阴性对照组也是有ER的。而将该实验换到293T中,由于293是胚胎肾细胞,功能性与乳腺癌细胞是差很多的,拿它做同样的实验也就是为了将实验的背景环境条件尽可能的改变,就加入ER一个同样的条件,这时出了与乳腺癌相似的结果,不久使“某个蛋白通过抑制ER信号通路,抑制乳腺癌细胞增殖”的结论更有说服力了么? gaolei 楼上这位兄弟说的有道理。但是他的文章里没有提到做乳
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