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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
31
- 英文名:
MitochondrialMembranePotentialAssayKitwithJC-1
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100T
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)哪里有买
规格: 100T
别名 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)
英文名称 MitochondrialMembranePotentialAssayKitwithJC-1
储存条件 -20℃,避光,有效期1年
单位盒
产品简介:
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)是一种以JC-1为荧光探针,快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线
粒体膜电位变化的试剂盒,可以用于早期的细胞凋亡检测。
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针。
1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)哪里有买尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
25 T 超微量ATP酶测试盒(测Ca2+ATPase) Oxidative Stress Detection Kit 常温保存
50T 气单胞菌PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
增菌肉汤培养基E Enrichmentbroth medium E 250g
50次 DNA电泳分子量标准(φX174 DNA/Hinc Ⅱ) DNAMETER(3) 4℃保存
2 ug pX260-U6-DR-BB-DR-Cbh-NLS-hSp-Cas9-NSL-H1-shortract-PGK-puro pX260-U6-DR-BB-DR-Cbh-NLS-hSp-Cas9-NSL-H1-shortract-PGK-puro 低温运输,-20℃保存
96支 10 μL RNase-free 白吸头(盒装已灭菌带芯长尖) 常温
250mL 动物RNAout (TRIzol) Animal RNAOUT(TRIzol) 4℃保存
10 mg Dihydrorhodamine 123 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1瓶 Hela-GFP细胞株 Hela-GFP 低温运输和保存
BCYE琼脂基础 BCYE Agar Base 100g
无菌试验用真菌培养基 用于真菌杀灭试验。(WS) 250g
2 ug pSecTag2/Hygro A pSecTag2/Hygro A 低温运输,-20℃保存
50T 人Cosmc基因PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
2mL Protein A+G琼脂糖 Protein A+G Agarose 4℃保存
1mL Tricine-SDS-PAGE上样液 Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存
1瓶 4647细胞株 4647 低温运输和保存
Campy-Cefex琼脂基础 Campy-Cefex Agar Base 250g
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)哪里有买人IgG干粉 1g 支
阿扎那韦(标准品) Atazanavir 198904-31-3 质量规格:HPLC>98%,标准品
α-乳香酸(标准品) alpha-Boswellic acid 471--9 质量规格:HPLC≥98%,标准品
生物素化羊抗人IgM 0.1ml 支
Yeast powder 酵母粉 5g 瓶
β-烟酰腺嘌呤二核苷磷酸, 缩减环已基铵盐 β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced tetra(cyclohexyl ammonium) salt 1929-71-3 质量规格:美国进口
异茴芹内酯 Isopimpinellin 482--9 质量规格:HPLC≥98%,标准品
胡萝卜苷(标准品) Daucosterol 474--8 质量规格:HPLC≥98%,标准品
ent-那格列奈酰基-β-D-葡萄糖苷酸 ent-Nateglinide Acyl-β-D-glucuronide 1996-85-2 (D-异构体) 质量规格:美国进口
基嘧啶磷(10μg/ml,u=3%) Pirimiphos-methyl solution 29232-93-7 质量规格:10μg/ml,u=3%
UDPG Na2 尿苷5-二磷酸葡萄糖二钠 1mg 瓶
Linderane 乌药内酯 13476-25-0 20mg
K-Carrageenan Karra Type k-卡拉胶 25g 瓶
邻氧基肉桂(>98%,BR) o-Methoxycinnamaldehyde 1504-74-1 质量规格:>98%,BR
替米考星(标准品) Tilmicosin 108050-54-0 质量规格:含量测定
酸性黄17 Acid Yellow 17 6359-98-4 质量规格:AR
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文献和实验一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件,发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体膜电位崩溃,细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,两者发射光谱不同。在正常细胞内,线粒体膜电位较高,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可产生红色荧光;凋亡早期,线粒体膜电位降低,JC-1不能聚集在线粒体基质中,此时JC-1为单体
染料的浓度,引起假去极化。荧光探针JC-1是一种阳离子型的亲脂性染料,能够自由穿过细胞膜,随细胞膜电位的变化而在膜两侧保持动态平衡。其特点是线粒体膜电位低时浓度低,主要以单体形式存在,488nm激发时最大发射波长为527nm,呈绿色荧光,胞浆相对线粒体为低电位,形成流式图中所有细胞FL1均为阳性;膜电位高时浓度高形成聚集体,488nm激发时的最大发射波长为590nm,红色荧光。活细胞线粒体膜电位高,线粒体内JC-1聚集体的浓度高,红色荧光很强,在流式图上表现为FL1和FL2双阳性,而凋亡细胞则大多
yy59410 请问,我现在要测线粒体膜通透性改变即JC-1的检测,想问下国产的试剂盒里凯基的好还是碧云天的好。希望高手指路啊。 freecell 效果差不多。 yy59410 谢谢! 还有一个就是我用JC-1测MMP,是不是没必要再用罗丹明测ROS了! 我做的是凋亡检测! wudonghui3516010 我现在也是在用JC-1,效果
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