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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 英文名:
Penicillin-StreptomycinLiquid
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
产品名称 青链霉素混合液(100×)细胞培养专用多少钱
规格: 100ml
别名 双抗
英文名称 Penicillin-StreptomycinLiquid
储存条件 -20℃保存,一年有效。建议分装冻存,避免反复冻融。
单位100ml/瓶20瓶/箱
培养液中推荐的青霉素的工作浓度为100U/ml,链霉素的工作浓度为0.1mg/ml。即按照100倍稀释使用即可。
操作说明:
1、从-20℃冰箱里取出青链霉素混合液(100×)。
2、室温放置使其融化。
3、超净台内操作,每500毫升培养液里加入5毫升青链霉素混合液(100倍稀释)。
4、混匀后,即可使用。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
100mL POPSO Buffer,0.2M,pH7.0 POPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常温保存
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牛磺鹅去氧胆酸钠 Sodium taurochenodeoxycholate 69-98-9 质量规格:≥97.0%,BR
二四氯(标准品) MCPA 94-74-6 质量规格:分析标准品
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(2S)-2-N-芴氧羰基氨基-2-基-6-庚烯酸 (S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine 288617-73-2 质量规格:>97%
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EDTA Na2 乙四乙酸二钠 1kg 瓶
乙基化铜蛋白,奥普托欣 Ethylhydrocupreine HCl,Optochin HCl 3413--9 质量规格:>97%,美国进口
PVPP 聚乙烯聚烷酮 1g 瓶
神经氨酸酶(≥10 units/ mg ) Neuraminidase from Clostridium perfringens 91-67-6 质量规格:≥10 units/ mg
奥当卡替(MK-0822) Odanacatib;MK0822 603139-19-1 质量规格:>98%,cathepsin K抑制剂
羧肽酶 B >170 U/mg Carboxypeptidase B 9025-24-5 质量规格:BC
Ethidium Brmide 化乙锭 (EB) 1g 瓶
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文献和实验(0.6μg/μl 12μl),1 0×PCR缓冲液120μl,Taq DNA聚合酶(5 U/μl)1.2μl,双蒸水756μl; (3) 向竞争模板GM-cSF 1#~11#管中加入90μl上述混合液; (4) PCR进行40个循环,参数为94℃ 1min,62℃ 1min,72℃ 2min; (5) 取反应液各20μl,一式三份,在2.5%琼脂糖凝胶中电泳分析; (6) 测定每管中(gGM)和cGM的含量,以密度计对电泳胶片进行分析测定; (7) GM
。 4、培养细胞时,如何去除血清来源的外泌体? 多数情况下,细胞在体外培养时需要血清,而血清中一般都含有外泌体,为避免血清对细胞外泌体的污染,可采用以下两种方法: 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体; 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清(或者外泌体专用培养基)在什么时候使用? 使用无外泌体血清培养基:细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后,细胞汇合度在60% - 70% 时,移去原有含血清的培养基,换成新鲜的无外泌体血清培养基,继续
menghuitb:动物实验,大鼠脑核团给药的时候,因为很多核团很小,给药量也小( 100 ~ 300nl),所以一般采用在微量进样器尖端(直径 0.4 mm)套一个玻璃针(针管 0.5 mm, 针尖 0.05 mm)后给药。有条件的实验室都自己用「拉管机」拉玻璃针,一些有钱的直接到厂家定做。 我关于做玻璃针的方法是:找一根直径 0.5 mm 的玻璃管,把细线系在玻璃管两头,一头用镊子夹住后把镊子放在桌沿,一头用动脉夹之类(有一定重量即可)的夹住,让玻璃管在空中静止的垂直。 用火机或者火柴烧
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