- ¥319 - 5219
- ABclonal
- 中国
- RK20660
- 2025年10月28日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C
- 英文名：
Deep Ocean DNA Polymerase (Mg2+ Plus Buffer)
- 库存：
100
- 供应商：
ABclonal
- 规格：
200 U/1000 U/5000 U
| 规格： | 200 U | 产品价格： | ¥319.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 1000 U | 产品价格： | ¥1289.0 |
| 规格： | 5000 U | 产品价格： | ¥5219.0 |
产品描述
Deep Ocean DNA 聚合酶是一种高保真的嗜热DNA聚合酶。Deep Ocean DNA聚合酶的保真性来自于3'-5'核酸外切酶(校对)活性，保真度是TaqDNA聚合酶的5倍。Deep Ocean DNA聚合酶具有中等保真度，高聚合活性以及极高的热稳定性，在95~100°C非常稳定(95°C的半衰期：23 hr)。该聚合酶是高GC或环状序列扩增的理想选择。产品组分
| Deep Ocean DNA Polymerase (2,000 U/ml) | RM20303 |
| 10X PCR Reaction Buffer, Mg2+ plus | RM20101 |
| MgSO4 Solution (100 mM) | RM20143 |
产品信息
| 产品来源 | 从Pyrococcus species GB-D中分离的Deep Ocean DNA聚合酶基因在大肠杆菌中表达和分步纯化精制而成。Pyrococcus species GB-D是从生长在2100米海底和104°C高温的火球菌属微生物中分离的。 |
|---|---|
| 应用 | 高保真PCR, PCR , 常规PCR |
| 活性定义 | 1活性单位(U)是指75°C 30 min将10 nmol dNTPs掺入到酸不溶性物质所需的酶量。 |
| 保存条件 | 10 mM Tris-HCl, 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.1% Triton X-100, 50% Glycerol, pH7.4 @ 25°C |
| 保存温度 | -20°C |
| 反应条件 | 1X PCR Reaction Buffer, Mg2+ plus |
| 反应缓冲液或预混液 | 1X PCR Reaction Buffer, Mg2+ plus: 20 mM Tris-HCl, 10 mM (NH4)2SO4, 10 mM KCl, 2 mM MgSO4, 0.1% Triton X-100, pH 8.8 @ 25°C |
| 热失活 | 否 |
| 5' - 3' 核酸外切酶 | 无 |
| 3' - 5' 核酸外切酶 | 有 |
| 链置换活性 | ++ |
| 产物末端 | 平末端 |
| 蛋白分子量 | Theoretical 89000 daltons |
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文献和实验时间的20%。使用VentR或Deep VentR DNA聚合酶时，请分别尝试2、4和6 mM的MgSO4浓度。 为什么PCR反应后，没有产物或条带模糊? 检查Mg2+浓度、聚合酶用量及延伸反应时间。尝试不同退火温度及Mg2+的浓度。用酚/氯仿抽提及酒精沉淀法纯化DNA。避免高盐带入PCR反应体系中。确保dNTP没有被水解。某些助溶剂如：100 μg/ml BSA，1-10%甲酰胺(formamide)或1-10%DMSO 有助于一些引物和模板的结合。
超过计算时间的20%。使用VentR或Deep VentR DNA聚合酶时，请分别尝试2、4和6 mM的MgSO4浓度。 为什么PCR反应后，没有产物或条带模糊? 检查Mg2+浓度、聚合酶用量及延伸反应时间。尝试不同退火温度及Mg2+的浓度。用酚/氯仿抽提及酒精沉淀法纯化DNA。避免高盐带入PCR反应体系中。确保dNTP没有被水解。某些助溶剂如：100 μg/ml BSA，1-10%甲酰胺(formamide)或1-10%DMSO有助于一些引物和模板的结合
耐热DNA聚合酶常见问题(Thermpholic Polymerases FAQ)
4多聚核苷酸激酶，37°C温育30分钟。 怎样才能提高PCR产物平滑末端的连接效率? 载体应该去磷酸化以降低自身环化，插入片段的5'末端应具有磷酸基。其它提高连接效率的方法还有：降低ATP在连接反应缓冲液中的浓度，增加插入片段与载体的比例或使用快速连接试剂盒(NEB #M2200)。另外，可使用平端克隆试剂盒(NEB #E0103)。 VentR或Deep VentR DNA聚合酶产生平滑末端，可是我要用的克隆试剂盒是针对3'末端单个腺嘌呤碱基突出
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