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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C
- 英文名:
Antarctic Phosphatase
- 库存:
100
- 供应商:
ABclonal
- 规格:
500 U/1000 U/5000 U
| 规格: | 500 U | 产品价格: | ¥299.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1000 U | 产品价格: | ¥599.0 |
| 规格: | 5000 U | 产品价格: | ¥2549.0 |
产品描述
Antarctic Phosphatase (AnP)是一种热不稳定的重组碱性磷酸酶。AnP非特异性催化DNA、RNA 的5'和3'端去磷酸化。此外,AnP也能水解核糖核苷三磷酸和脱氧核糖核苷三磷酸(NTPs和dNTPs)。AnP在许多分子生物学实验中都有应用,如DNA和RNA末端去磷酸化,用于后续重组克隆或探针的末端标记。在重组克隆实验中,末端去磷酸化防止线性化质粒DNA的自连。AnP酶的去磷酸化底物可以是5'突出、5'凹陷和5'平末端的DNA和RNA。AnP也可降解PCR反应中未掺入的dNTPs,用于制备测序模板和 SNP 分析。AnP在80°C加热2 min可以被不可逆完全失活,因此,在连接或末端标记之前,可以不用去除AnP。
产品组分
| Antarctic Phosphatase (5,000 U/ml) | RM21308 |
| 10X Antarctic Phosphatase 反应缓冲液 | RM20152 |
产品信息
| 产品来源 | TAB5 AP基因在大肠杆菌中表达和分离纯化得到。 |
|---|---|
| 应用 | 去磷酸化, RNA 修饰, 体外合成 (IVT) |
| 活性定义 | 1活性单位(U)是指37°C 30 min将1 μg 经限制性内切酶消化产生 5' 凹陷末端pUC19 DNA去磷酸化*所需的酶量。 *去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制>95% 的DNA再环化(通过转化E.coli细胞来检测)。 |
| 保存条件 | 10 mM Tris-HCl, 1 mM MgCl2, 50% Glycerol, 0.01 mM ZnCl2, pH 7.4 @ 25°C |
| 保存温度 | -20°C |
| 反应条件 | 1X Antarctic Phosphatase 反应缓冲液, 37°C孵育 |
| 反应缓冲液或预混液 | 1X Antarctic Phosphatase 反应缓冲液: 50 mM Bis-Tris-Propane-HCl, 1 mM MgCl2, 0.1 mM ZnCl2, pH 6 @ 25°C |
| 热失活 | 80°C 加热 2 min |
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文献和实验一、实验目的 1.掌握酶分离纯化的一般步骤及相关原理; 2.悉碱性磷酸酶的分离纯化的方法步骤。 二、实验原理 有机溶剂分级沉淀是分离蛋白质的常用方法之一。有机溶剂能使许多溶于水的酌生物大分子发生沉淀,其主要作用是降低水溶液的介电常数。例如20℃时水的介电常数为80,82%的乙醇溶液的介电常数为40。溶液的介电常数降低意味着溶质分子间异性电荷库仑引力增加,从而使溶质的溶解度降低
水解酶的一种。是磷酸酯及磷酸无水化合物(多聚磷酸)水解的酶之总称。有时也分别称为磷酸酯酶和多磷酸酶。另外前者有磷酸单酯酶(phosphomo- noesterase)和磷酸二酯酶 ( phosphodiesterase),后者有三磷酸腺苷酶( ATPase)、偏磷酸酶( meta- phosphatase)和焦磷酸酶等。
磷酸酶的一种。是催化焦磷酸水解为正磷酸的酶之总称。EC 3. 6. 1. 1.仿照磷酸单酯酶,根据最适 pH可分为三种情况:( 1)在最适 pH为 7.2-7.8,可通过 Mg2 而被活化,含于动物组织和酵母中;( 2)最适 pH5.0-5.5,含于肝脏、肾脏、霉菌和植物的种子中不为金属盐所活化,可因氟化物而受阻抑;( 3)最适 pH3.2-4.0,含于肝脏、曲霉和酵母中。
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