DNA聚合酶I大片段（Klenow片段）

描述：DNA聚合酶I，Klenow片段是大肠杆菌DNA聚合酶 I 的水解产物，具有DNA聚合酶和3'-5'外切酶活性，但缺失5'-3' 外切酶活性。Klenow片段保留了全酶的保真性而不降解扩增产物的5'末端。 Klenow片段适用于Sanger法DNA测序，补平5'粘性末端和/或外切3'粘性末端成为平末端，cDNA的二链合成，突变实验的二链合成。产品来源：缺失5'-3' 核酸外切酶活性结构域序列的E.coli polA基因在大肠杆菌中诱导表达和分离纯化得到。应用：Blunting，DNA聚合酶扩增反应，DNA测序，RT-PCR和cDNA合成，RT-qPCR，PCR。活性定义：1活性单位(U)指在37°C 30 min内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶性物质所需的酶量。保存条件：25 mM Tris-HCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.4 @25℃。反应条件：1X ABuffer B, 25°C孵育。反应缓冲液或预混液：1X ABuffer B: 10 mM Tris-HC, 50 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, pH7.9 @ 25°C。热失活：75°C 加热 20 min。5' - 3' 核酸外切酶：无。3' - 5' 核酸外切酶：有