T4多聚核苷酸激酶

描述：T4 Polynucleotide Kinase (T4 PNK)催化ATP γ位的磷酸基团和多聚核苷酸的5'-羟基末端 (ds/ss DNA或RNA)以及3′-单磷酸核苷间进行转移和交换。T4 PNK还具有3′磷酸酶活性，将3′-磷酸基团从寡核苷酸的3′磷酸末端、脱氧3′-单磷酸核苷和脱氧3′-二磷酸核苷上水解掉。产品来源：T4 Polynucleotide Kinase基因在大肠杆菌中表达和分离纯化得到。应用：磷酸化 (激酶)。活性定义：1活性单位(U)指在50 μl含66 μM [γ-32P] ATP (5x 106 cpm/μM)和0.26 mM 5′-末端羟基化的鲑鱼精DNA反应体系中，37°C 30 min，将1 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶性物质所需的酶量。保存条件：10 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, 0.1 uM ATP pH7.4 @ 25°C。反应条件：1X T4 PNK 反应缓冲液, 37°C孵育。反应缓冲液或预混液：1X T4 PNK 反应缓冲液:70 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 5 mM DTT, pH7.6 @ 25°C。热失活：65°C 加热 20 min。