- ¥4580
- 天根
- 中国
- NG206-02
- 2025年11月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 供应商：
天根生化科技（北京）
- 规格：
10000 U
T4 多聚合核苷酸激酶（T4 PNK）可催化ATP分子上γ位磷酸基团向单链、双链RNA分子和DNA分子的5'-羟基末端上转移以及向3'-单磷酸盐分子上转移。T4 PNK同时具有3'磷酸酶和2',3'-环磷酸二酯酶活性。本产品来源于含有T4多聚核苷酸激酶基因表达质粒的大肠杆菌菌株。分子量大小约为34.6 kDa。
产品特点
1. 特异性催化ATP分子上γ位磷酸基团转移；
2. 蛋白比活性高，稳定性好。
适用范围
1. 在二代测序（NGS）应用中，主要用于文库构建过程中末端修饰中的5'磷酸化修饰。
2. DNA 及RNA 5'末端的标记。
单位定义
1 单位酶是指在37℃条件下，以10 X T4 PNK Buffer为反应环境，30 min内催化1 nmol 的[γ-32P] ATP 发生重组反应所需要的酶量。
酶蛋白性质描述
| 性质 | 蛋白描述 |
| 蛋白纯度 | >99% |
| 酶活性 | 133,333 U/mg |
| 核酸单链外切酶 | 2000 U酶中，＜ 5.0% |
| 核酸双链外切酶 | 2000 U酶中，＜ 1.0% |
| 核酸双链内切酶 | 2000 U酶中，未检出 |
| 宿主基因组污染 | 2000 U酶中，＜ 10拷贝 |
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文献和实验用 T4 标记的 5’ 末端 1． 无菌的 1.5ml 为了离心管置冰浴上顺序混合下列组分： 50 pmol 合成的寡核苷酸 2.5 μ l 10 ×反应缓冲液 10 μ l γ -[32 P]ATP （ 33pmol ） 1.5 μ l T4 多核苷酸激酶（ 15U ） 灭菌双蒸水加至 25 μ l 2． 37 ℃温育 30min 。 3． 当反应物正温育时，以 2000 × g 离心 2min 制备
。在这些情况下，仅有约10％的放射性标记物被转移，但实际上每个寡核苷酸分子都被标记。 2） 在反应混合液中加入8单位（约1 μl）T4噬菌体多核苷酸激酶。 充分混匀，于37 ℃温育45分钟。人该反应液中另取0.5 μl 加至另一装有10 10mmol/LTris.Cl(pH8.0)的反应管中，搁置一旁留备步骤3）使用。于68 ℃将其余的反应液加热10分钟，以灭活T4噬菌体多核苷酸激酶。 3） 按下列方法（Stawinski等，1977;Narang等，1980
由 T偶数噬菌体所感染的大肠杆菌分离出来的酶，能催化 ATP的γ -磷酸转移到 DNA或 RNA的 5′ -OH末端生成 ADP的反应。 EC2． 7． 1． 78。因为此酶的催化反应特异性很高，可用 32 P标记的 ATP特异地标记多核苷酸的 5′末端。广泛应用于多核苷酸的链长的测定和 5′末端核苷酸排列的确定等核酸结构的研究。
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