- ￥760 - 1050
- ABclonal
- 中国
- RK20400
- 2025年12月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C
- 供应商：
ABclonal
- 规格：
50 rxn/100 rxn
| 规格： | 50 rxn | 产品价格： | ￥760.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100 rxn | 产品价格： | ￥1050.0 |
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文献和实验利用RACE [Rapid Amplification of cDNA ENDs，cDNA末端的快速扩增]，可以很简单地得到mRNA的5＇末端序列，然而5＇RACE是一个很复杂的技术，它的成功依赖每一步反应的有效完成。cDNA第一链的合成是由一个反义的基因特异性引物（Gene－specific primer，GSP）来起始的，cDNA第一链纯化后，利用末端脱氧核苷酸转移酶（Terminal deoxynucleotidyl transferase，TdT）在cDNA的5＇末端加上一个合成
,42℃放置2分钟; 6. 反应完成,趁热加入1 ul Superscipt II―RT,混匀; 7. 42℃反应50分钟,然后70℃,15分钟灭活反转录酶.二. cDNA 第二链的合成 : 1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega): 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd
稳定。另外，长度大于4kb的转录本对于痕量RNase的降解比小转录本更敏感。 为了增加贮存RNA样品的稳定性，可以将RNA溶解在去离子的甲酰胺中，存于-70℃。用于保存RNA的甲酰胺一定不能含有降解RNA的杂物。来源于胰脏的RNA至少可以在甲酰胺中保存一年。当准备使用RNA时，可以使用下列方法沉淀RNA：加入NaCl至0.2M及4倍体积的乙醇，室温放置3-5分钟，10,000×g离心5分钟。 在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链合成反应中
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