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- 2025年07月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
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21
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详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10ml|50ml
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：细胞核染料PI染色液(即用型)哪家好
英文名称：
产品规格：10ml|50ml
发货周期：1～3天
荧光标记是研究细胞凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化及生化学变化都可以通过荧光标记的的方法而检测出来，从而区别鉴别出正常细胞、坏死细胞或检测细胞周期。
化丙啶（PropidiumIodide,PI）是一种DNA结合性染料，其激发和发射波长分别为536nm和617nm，产生红色荧光，但无膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞。因此，在荧光显微镜下观察，正常细胞不能着色，坏死细胞呈强红色荧光。采用流式细胞仪检测细胞周期时，凋亡细胞因内源性核酸酶被激活，使DNA广泛降解、断裂，DNA结构发生剧变，随着凋亡的进程，DNA断裂产生的小分子量DNA溢出胞外，细胞总DNA量降低，于正常G0/G1细胞群前出现一DNA低染细胞群，即G1峰前出现亚二倍体峰（sub-G1）或称A0细胞群，即凋亡细胞群。用本试剂盒的PI直接对细胞DNA染色后，进行流式细胞仪分析，即可检测到凋亡细胞DNA的变化。
储存2-8℃，避光，有效期6个月。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
细胞核染料PI染色液(即用型)哪家好待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
4--3-酯Methamphetamine strip (min order 500)
2,3,6,7-四喹喔啉Microalbumin
铂水合物Microalbumin Elisa
2--5-三Microglobulin Alpha-1
2-羟-5-嗪Microglobulin, (anti-beta2) Elisa
5-溴-2--1,3-二Microglobulin, (beta-2)
2--6-氧并噻唑Milk stabilisation kit incl. sterile test tubes (bovine)
(R)-3--庚-2-盐盐Minute Virus (mouse) EcoElisa
9-氧-1--蒽MIP-1 beta (human) (Macrophage Inflammatory Protein-1b)
(S)-(+)-alpha-氧MIP-2 (rat) (Macrophage Inflammatory Protein-2)
细胞核染料PI染色液(即用型)哪家好达格列净一水二 ;二达格列嗪水合物英文名(EN)Tetrapropylammonium chloride特价促销 规格(SP)1G
达格列嗪;达格列净英文名(EN)Tetramethylammonium fluoride特价促销 规格(SP)25G
达卡巴嗪英文名(EN)3Aminochloropicoline,特价促销 规格(SP)1G
达卡巴嗪(标准品)英文名(EN)Tetramethylammonium acetate特价促销 规格(SP)5G
达卡巴嗪d6英文名(EN)Ammonium hexafluorophosphate ,特价促销 规格(SP)25G
达卡他韦;BMS790052英文名(EN)Ammonium hexachloroosmate(IV)特价促销 规格(SP)500MG
达拉菲尼,达帕菲尼英文名(EN)Tetramethylammonium bisulfate hydrate ...特价促销 规格(SP)5G
达马莫德英文名(EN)Tetrapropylammonium iodide特价促销 规格(SP)25G
达唑（标准品）英文名(EN)Ammonium Paratungstate特价促销 规格(SP)25G
达沙替尼（无水）英文名(EN)Trimethylphenylammonium chloride,特价促销 规格(SP)25G
达沙替尼（无水）（标准品）英文名(EN)Tricaprylylmethylammonium chloride(R=C...特价促销 规格(SP)25ML
达沙替尼βD葡萄糖苷英文名(EN)Ammonium carbamate特价促销 规格(SP)50G
达沙替尼羧英文名(EN)Ammonium iron(III) oxalate trihydrate,...特价促销 规格(SP)100G
达沙替尼一水合物英文名(EN)Trimethylphenylammonium tribromide,≥9...特价促销 规格(SP)25G
达托素英文名(EN)Tetraoctylammonium bromide特价促销 规格(SP)5G
达托素(标准品)英文名(EN)Tetrabutylammonium fluoride hydrate特价促销 规格(SP)25ML
大波斯菊苷,芹菜素7OβD葡萄糖苷(标准品)英文名(EN)Tetrahexylammonium bromide特价促销 规格(SP)5G
大车前苷(标准品)英文名(EN)Tetrahexylammonium hydrogensulfate特价促销 规格(SP)1G
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：细胞核染料PI染色液(即用型)哪家好
英文名称：
产品规格：10ml|50ml
发货周期：1～3天
荧光标记是研究细胞凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化及生化学变化都可以通过荧光标记的的方法而检测出来，从而区别鉴别出正常细胞、坏死细胞或检测细胞周期。
化丙啶（PropidiumIodide,PI）是一种DNA结合性染料，其激发和发射波长分别为536nm和617nm，产生红色荧光，但无膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞。因此，在荧光显微镜下观察，正常细胞不能着色，坏死细胞呈强红色荧光。采用流式细胞仪检测细胞周期时，凋亡细胞因内源性核酸酶被激活，使DNA广泛降解、断裂，DNA结构发生剧变，随着凋亡的进程，DNA断裂产生的小分子量DNA溢出胞外，细胞总DNA量降低，于正常G0/G1细胞群前出现一DNA低染细胞群，即G1峰前出现亚二倍体峰（sub-G1）或称A0细胞群，即凋亡细胞群。用本试剂盒的PI直接对细胞DNA染色后，进行流式细胞仪分析，即可检测到凋亡细胞DNA的变化。
储存2-8℃，避光，有效期6个月。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
细胞核染料PI染色液(即用型)哪家好待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
4--3-酯Methamphetamine strip (min order 500)
2,3,6,7-四喹喔啉Microalbumin
铂水合物Microalbumin Elisa
2--5-三Microglobulin Alpha-1
2-羟-5-嗪Microglobulin, (anti-beta2) Elisa
5-溴-2--1,3-二Microglobulin, (beta-2)
2--6-氧并噻唑Milk stabilisation kit incl. sterile test tubes (bovine)
(R)-3--庚-2-盐盐Minute Virus (mouse) EcoElisa
9-氧-1--蒽MIP-1 beta (human) (Macrophage Inflammatory Protein-1b)
(S)-(+)-alpha-氧MIP-2 (rat) (Macrophage Inflammatory Protein-2)
细胞核染料PI染色液(即用型)哪家好达格列净一水二 ;二达格列嗪水合物英文名(EN)Tetrapropylammonium chloride特价促销 规格(SP)1G
达格列嗪;达格列净英文名(EN)Tetramethylammonium fluoride特价促销 规格(SP)25G
达卡巴嗪英文名(EN)3Aminochloropicoline,特价促销 规格(SP)1G
达卡巴嗪(标准品)英文名(EN)Tetramethylammonium acetate特价促销 规格(SP)5G
达卡巴嗪d6英文名(EN)Ammonium hexafluorophosphate ,特价促销 规格(SP)25G
达卡他韦;BMS790052英文名(EN)Ammonium hexachloroosmate(IV)特价促销 规格(SP)500MG
达拉菲尼,达帕菲尼英文名(EN)Tetramethylammonium bisulfate hydrate ...特价促销 规格(SP)5G
达马莫德英文名(EN)Tetrapropylammonium iodide特价促销 规格(SP)25G
达唑（标准品）英文名(EN)Ammonium Paratungstate特价促销 规格(SP)25G
达沙替尼（无水）英文名(EN)Trimethylphenylammonium chloride,特价促销 规格(SP)25G
达沙替尼（无水）（标准品）英文名(EN)Tricaprylylmethylammonium chloride(R=C...特价促销 规格(SP)25ML
达沙替尼βD葡萄糖苷英文名(EN)Ammonium carbamate特价促销 规格(SP)50G
达沙替尼羧英文名(EN)Ammonium iron(III) oxalate trihydrate,...特价促销 规格(SP)100G
达沙替尼一水合物英文名(EN)Trimethylphenylammonium tribromide,≥9...特价促销 规格(SP)25G
达托素英文名(EN)Tetraoctylammonium bromide特价促销 规格(SP)5G
达托素(标准品)英文名(EN)Tetrabutylammonium fluoride hydrate特价促销 规格(SP)25ML
大波斯菊苷,芹菜素7OβD葡萄糖苷(标准品)英文名(EN)Tetrahexylammonium bromide特价促销 规格(SP)5G
大车前苷(标准品)英文名(EN)Tetrahexylammonium hydrogensulfate特价促销 规格(SP)1G
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验相关实验
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增（左图）与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增（右图）。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液，您只需添加模板和引物，然后，开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤，使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样（注意：确保染料与下游应用兼容）。直接
(2)Van Gieson苦味酸酸性复红法： 可以显示组织、器官的损伤、修复及硬化情况，特别是用于鉴别肿瘤组织中的胶原纤维与平滑肌纤维，可为诊断提供重要依据。 染色步骤： ①组织切片按常规脱蜡水洗。 ②用Weigert苏木素液染细胞核 5~l0 min。 ③自来水充分洗涤数分钟。 ④用显微镜检查细胞核的着色程度，过深可用0.5%盐酸乙醇分化。 ⑤自来水洗至变蓝;用蒸馏水洗。 ⑥用Van Gieson液染1~5 min
O2 浓度要适中。 如果上述步骤使用链霉亲和素―生物素―碱性磷酸酶复合物，则需选用NBT/BCIP作为显色系统．阳性结果为蓝黑色。显色后蒸馏水或自来水冲洗。采用碱性磷酸酶作为标记物底物时，染色过程中的缓冲液用0.02mol/LTBS(pH 8.2)较好。 11．苏木精复染细胞核 为使组织切片清晰的显示组织结构，便于准确定位，常对切片进行复染。最常使用的细胞核染料为苏木精，也可根据情况使用甲基绿和核快红。染色约10秒，镜下控制着色程度，效果好时自来水冲洗返蓝。 12．封片 如果选用
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