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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
34
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
250次/500次/2500次
英文名称：
产品规格：250次/500次/2500次
发货周期：1～3天
主要成份
A液50ml
B液2.5ml
蛋白标准品10ml(2mg/ml)
产品描述应用试管法可以测量25管，微孔板法可以测量250孔。
产品保存室温保存，一年内有效。
产品说明碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+,Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，吸光度强度与蛋白浓度成正比。测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
1.准确灵敏，线性范围广，BCA试剂的蛋白质测定范围是20－2000μg/ml。
2.快速45分钟内完成测定。
3.经济实用在微孔板中进行测定，可大大节约样品和试剂用量。
4.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
注意事项
1.低温或长期保存，若发现BCA试剂A或者试剂B有沉淀发生。请37ºC温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如发现细菌污染，则应丢弃，避免对实验结果造成影响。
2．不受大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中5%的SDS，5%的TritonX-100，5%的Tween20，60，80等。(详情见附录)
3每次测量蛋白浓度均应做标准曲线。
4.当试剂A和B混合时会有浑浊，混匀后就会消失。
5.需准备37℃水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。酶标仪需与96孔酶标板配套使用。使用分光光度计测定蛋白浓度时，试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
6.使用BCA蛋白测定法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，因此需注意保持定时和定温，以确保精确定量。
7.实验操作规范，提高上样量的精确度。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：1．BCA蛋白浓度测定试剂盒哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
2Amino5bromopyrazine25溴嗪59489713
1Adamantanecarbonyl chloride1金刚酰2094726
Nefazodone hydrochloride法唑82752996
5Chloro2(methylamino)benzophenone25二1022135
HGLNOTBU HCLL谷酰叔39741623
2,6,8TRIMETHYL4NONANOL2,6,8三4壬123171
Anthraquinone蒽醌84651
Propyl 4hydroxy3iodobenzoate4羟315126086
1Indanone1茚83330
NalphaFmocLtyrosineFmocL酪92954900
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5METHOXY2METHYLINDOLE52吲哚1076740
Tetracaine卡94246
3Cyanobenzoic acid31877721
DLArginine hydrochloride monohydrateDL精(一水)32042436
Taq DNA Polymerase 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
1.5M TrisHCl,pH8.8 含量：>99% 规格：20mg/支
10% SDS Solution 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
1M TrisHCl,pH6.8 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
1M TrisHCl,pH8.8 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
30%酰/叉双酰(19:1) 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
30%Acrylamide/Bisacrylamide(19:1) 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
30%酰/叉双酰(29:1) 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
BCA蛋白浓度测定试剂盒哪家好BehenoylPolyoxylglycerides48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
Bemotrizinol48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
BemotrizinolImpurityMixture48T/96T进口、国产1620AzithromycinHPLC≥98%
BenazeprilHydrochloride48T/96T进口、国产1620AzithromycinIdentityHPLC=100%
48T/96T进口、国产1620DesosaminylazithromycinHPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620N-DemethylazithromycinHPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620AzithromycinN-OxideHPLC≥98%
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验法是十分常用的蛋白质比色定量方法，很多试剂供应商都提供基于比色皿和微孔板的BCA蛋白定量试剂盒。BCA蛋白定量法相对于其它比色定量法具有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的固有的280nm吸收峰检测，BCA检测法提高了蛋白检测灵敏度和特异性，消除了核酸的干扰，核酸干扰在对细胞裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避免的干扰。在碱性条件下，蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ，Cu+ 与BCA 试剂形成紫色络合物，如图1，其吸光值与蛋白浓度成正比。测定在562nm 处的吸收值，并与标准
公司名字暂略（其实主要的还是那几家），但是给出了参考价格，方便大家事先做好预算，好跟老板汇报。 好，下面是常用的试剂 我尽量按照做western的顺序来讲 一、 样品制备 货号 名称 规格 单价 P0013 Western及IP细胞裂解液 100ml 158.00元 ST506 PMSF(100mM) 10ml 92.00元 P0012S BCA蛋白浓度测定试剂盒 200次 139.00元 二、蛋白电泳 P0012A SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 1盒 139.00元
的Western及IP细胞裂解液，可以使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。 2. 电泳(Electrophoresis) (1) SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制，也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒提供了除水和配 胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。 (2) 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS
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