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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
Actin-Tracker Green
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
200μL
一、微丝绿色荧光探针价格分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:微丝绿色荧光探针价格英文名称:Actin-Tracker Green
产品规格:200μL
发货周期:1~3天
ActinGreen(荧光素鬼笔环肽)是F-肌动蛋白的高亲和力探针,由蘑菇毒素制成,与绿色荧光素(FITC)偶联。以纳米摩尔浓度使用时,鬼笔毒素是方便的探针,可用于对甲醛固定和打孔的组织切片、细胞培养物或无细胞实验体系中的F-肌动蛋白的标记、鉴别和定量。
ActinGreen与肌动蛋白对于不同的物种,包括植物和动物具有几乎相同的高结合属性。鬼笔环肽结合具有高选择性,而F-肌动蛋白荧光绿色荧光。呈现出很少的非特异性染色。本产品可以用于荧光显微镜、微孔板、比色皿和流式细胞仪。
浓度200U/mL
储存-20℃,避光,有效期6个月。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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2--3--5-溴啶Rubella IgM
微丝绿色荧光探针价格L谷(标准品)英文名(EN)2,4Dimethylnitrobenzene,98%特价促销 规格(SP)25G
L谷叔盐盐英文名(EN)Dicumyl peroxyide,98%特价促销 规格(SP)250G
L谷胱甘肽(标准品)英文名(EN)2Aminobiphenyl,特价促销 规格(SP)25G
L瓜英文名(EN)pAminoazobenzene,98%特价促销 规格(SP)5G
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L胱二二盐英文名(EN)4,4′Dimethylbiphenyl,特价促销 规格(SP)1G
L胱盐盐英文名(EN)mDinitrobenzene,特价促销 规格(SP)25G
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L英文名(EN)Azobenzene,98%特价促销 规格(SP)5G
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L精英文名(EN)Nitrobenzene,特价促销 规格(SP)500ML
L精(标准品)英文名(EN)Ethylbenzene,特价促销 规格(SP)500ML
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验、双标或三 标)的定位、定量。如:细胞膜受体或抗原的分布, 微丝、微管的分布、 两种或三种蛋白的共存与共定位、蛋白与细胞器的共定位 细胞凋亡: AnnexinV-fitc + PI 末端原位杂交-fitc + PI 荧光原位杂交: 染色体基因定位 单细胞凝胶电泳 GFP的表达 游离Ca2+ 的分布与定量 定位、定量研究中常用荧光探针 1)Amine-Reactive Probes与抗体耦联
笼锁的测量 荧光能量共振转移(FRET)的测量 其他应用 1、定位、定量 免疫荧光标记(单标、双标或三 标)的定位、定量。如:细胞膜受体或抗原的分布, 微丝、微管的分布、 两种或三种蛋白的共存与共定位、蛋白与细胞器的共定位 细胞凋亡: AnnexinV-fitc + PI 末端原位杂交-fitc + PI 荧光原位杂交: 染色体基因定位 单细胞凝胶电泳 GFP的表达 游离Ca2+ 的分布与定量 定位、定量研究中常用荧
)的定位、定量。如:细胞膜受体或抗原的分布, 微丝、微管的分布、 两种或三种蛋白的共存与共定位、蛋白与细胞器的共定位 细胞凋亡: AnnexinV-fitc + PI 末端原位杂交-fitc + PI 荧光原位杂交: 染色体基因定位 单细胞凝胶电泳 GFP的表达 游离Ca2+ 的分布与定量 定位、定量研究中常用荧光探针 1)Amine-Reactive Probes与抗体耦联、与配体耦联、与肽
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