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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
26
- 英文名:
Rhodamine 123
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
5mg
1.罗丹明123说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:罗丹明123说明书英文名称:Rhodamine 123
产品规格:5mg
发货周期:1~3天
Rhodamine123(罗丹明123,Rh123)是一种常用的阳离子绿色荧光染料,可以透过细胞膜从而在活细胞线粒体内聚集,并发出黄绿色荧光。广泛用作检测线粒体膜电位的荧光探针,并且对细胞没有任何毒性。
CAS62669-70-9
分子式C21H17ClN2O3
分子量380.82
纯度≥98%(HPLC)
储存条件-20℃避光,有效期一年
使用方法
1.用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104~5×105个/mL。
2.孵育该载玻片,用PBS或Hank’s液洗涤细胞。
3.用培养基稀释Rh123母液以制备1~20μMRh123缓冲液。具体工作浓度取决于细胞类型和细胞浓度。
4.将Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。
5.去除Rh123缓冲液并用培养基洗涤细胞(洗涤细胞后为了固定,加入10%福尔马林缓冲液并孵育15~20分钟,接着用PBS洗涤)。
6.用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品:
2-巯基嘧啶碳化/Boron carbide
咪唑-2-酸漂白土/漂洗泥/Floridin
噻唑-5-酸皂土/膨润土/浆土/胶状黏土/斑脱岩/Bentonite
2,5-二溴-3-啶三基/三基氧/Triphenylphosphine oxide
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2,4,6-三啶/精/片/Iodine
3,5-二基-4-唑草酸二酯/二酸二酯/草酸酯/Diethyl oxalate
2--4-酸N-基吩嗪基盐/N-基二并嗪基盐/吩嗪二酯盐/5-基吩嗪酯/吩嗪酯/PMS
(2,6-二-3-)醇罗丹宁/银试剂/罗丹酸/2-代-4-噻唑/绕丹宁/2-代-2,4-噻唑二/Rhodanine
2-氧基噻唑辛可宁/弱金鸡/4-基(5-烯基-1-杂双环2.2.2辛-2-基)醇/Cinchonine
罗丹明123说明书DNA修复混合(30次) 规格HPLC≥98%;20mgTracheloside
dNTP和引物清除剂 规格HPLC≥98%;20mgRosin
dNTP溶,100mM(0.5 mL) 规格HPLC≥98%;1mlAstilbin
dNTP溶,100mM(5 mL) 规格HPLC≥98%;20mghumulone
dNTP溶,10mM(0.5 mL) 规格HPLC≥98%;20mgChlorogenic acid
dNTP溶,10mM(5 mL) 规格HPLC≥98%;20mgPetunidin Chloride
dNTP溶,2.5mM(0.5 mL) 规格HPLC≥98%;20mgNitidine chloride
dNTP溶,2.5mM(5 mL) 规格HPLC≥98%;20mgMagnoflorine chloride
dTTP溶,100 mM 规格HPLC≥98%;20mgPeonidin chloride
dTTP溶,2.5 mM(见关联产品) 规格HPLC≥98%;20mgCyanidin Chloride
dUTP溶,100 mM 规格HPLC≥98%;20mgDi-tert-octyl Disulfide
MgCl2溶,25 mM,PCR级 规格HPLC≥98%;10mgvalechlorine
MgSO4溶,PCR级 规格HPLC≥98%;10mgAristololactam
MnCl2溶,25 mM,PCR级 规格HPLC≥98%;20mgAristolochic Acid A
PCR Mix染料 规格HPLC≥98%;20mgAristolochic Acid B
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文献和实验liuxing0626 各位学长好: 我买的ProteinTECH公司的 ERK1 抗体 western blot 条带有两条,公司的说明书也是两条,请问这是个怎么情况?而且我要做ERK1/2。但是ERK2也是单买的,混起来用的话会不会出来3条带了。 ERK1产品地址http://www.ptglab.com/Products/ERK1-Antibody-11257-1-AP.htm liuxing0626
滴于样品上,塑料玻片有助于平均分配染料。 2. 黑暗室温孵育30分钟。 3. 去掉盖玻片,PBS和dH2O中小心盥洗。 4. 去掉过量液体,绵纸在样品边缘小心吸取。 5. 盖上盖玻片,蜡或指甲油封片。或按供应商的指导加抗淬灭剂。 荧光显微镜观察。 Rhodamine 123 染色 中文名称:罗丹明 123 目 的:测细胞内线粒体的跨膜电位 EX/EM: 505/534 染液
1.检测仪背面 I O 键接通电源。 2.器自检30秒后,按 ENTER 键。 3.按 ↓→ 键,选择Analy 。 4.按 ENTER 键, 选择D/S Filter, 按 ENTER 。 5.按 123… 键,选择单或双波长。 6. SELECT 键 ,将光标移至检测或参考波长。 7. 123… 键, 选择目的
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