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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
52
- 英文名:
52
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100次|300次
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称:Cy3免疫荧光检测试剂盒(兔)规格
英文名称:Cy3 Immunofluorescence Detection Kit (Rabbit)
产品规格:100次|300次
发货周期:1~3天
储存条件冷藏(2-8℃)
概述
免疫荧光检测试剂盒系列用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时,就可以使用免疫荧光检测试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。
本试剂盒含有Cy3标记的山羊抗兔IgG(H+L)抗体,可以用于检测兔来源的相应一抗,在荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下可以观察到鲜艳的红色。
特点
本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。操作简便,灵敏度高。
组份
封闭液;山羊抗兔Cy3标记二抗;免疫荧光染色二抗稀释液;抗荧光淬灭封片液
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
Cy3免疫荧光检测试剂盒(兔)规格待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
CHONDROITIN DISACCHARIDE MIX C-Di-0, Di-, Di-6(RG0 611-0C2 规格:;20mg
CHONDROITIN DISACCHARIDE MIX B-Di-0, Di-, Di-6(RG0 611-0B2 规格:;20mg
B-1180-100 规格:;20mg
B-11801 规格:;20mg
APIGENIN-7-GLUCOSIDE (COSMOSIIN(SH0 8 1-100 规格:;20mg
APIGENIN-7-GLUCOSIDE (COSMOSIIN(SH0 8 1-025 规格:;20mg
APIGENIN-7-GLUCOSIDE (COSMOSIIN(SH0 8 1 规格:;20mg
9-噻吨(T1 05000 规格:;20mg
9,21-脱-兰尼定18625 规格:;20mg
6-姜,6-姜19211-02 规格:;20mg
6-姜,6-姜19211 规格:;20mg
5-羟色盐盐19180-100 规格:;20mg
足叶青毒素,鬼臼毒素169405 规格:;20mg
足叶青毒素,鬼臼毒素16940-025 规格:;20mg
紫檀芪16996-100 规格:;20mg
Cy3免疫荧光检测试剂盒(兔)规格 皮肤T细胞淋巴瘤相关抗原抗体5抗体 LRP-6 ELISA Kit 低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)ELISA试剂盒
异甘草苷 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
肿瘤/睾抗原抗体3抗体 LRP-5 ELISA Kit 低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)ELISA试剂盒
D(+)-葡萄糖盐 订购|咨询 规格 20mg
钙依赖分泌激活蛋白2/自闭症的相关蛋白抗体 LRP-1 ELISA Kit 低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)ELISA试剂盒
儿茶素没食子酯 订购|咨询 规格 10mg
脑多巴神经营养子抗体 LRP-4 ELISA Kit 低密度脂蛋白受体相关蛋白4(LRP-4)ELISA试剂盒
尿素 订购|咨询 规格 200mg
胆囊收缩素A受体抗体 LDLR ELISA Kit 低密度脂蛋白受体(LDLR)ELISA试剂盒
竹节参皂苷IVa 订购|咨询 规格 20mg
小脑肽3抗体 LDL-IC ELISA Kit 低密度脂蛋白免复合物(LDL-IC)ELISA试剂盒
脱紫堇 订购|咨询 规格 20mg
周期素依赖性激酶样5抗体 LDL ELISA Kit 低密度脂蛋白(LDL)ELISA试剂盒
香紫苏醇 订购|咨询 规格 20mg
α1-chimaerin蛋白抗体 LMP7/PSMB9 ELISA Kit 低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9(LMP7/PSMB9)ELISA试剂盒
五脂素 订购|咨询 规格 20mg
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验在免疫荧光染色过程中单染和共染是常用的两种方式,除此之外我们还可能会用到远红外进行染色标记。这相对于前两者实验操作上处理方法是一致的,唯独在样品处理上有所不同,而导致荧光定位标记的颜色增多,相对而言变得复杂。免疫荧光技术主要是通过抗体与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。那么接下来,我们重点来介绍免疫荧光操作方法以及注意事项。操作步骤:1. 首先,在常温下将组织切片用免疫组化笔进行画圈,接着加入 0.1M PB 约 50 微升左右,进行每次 20 分钟的漂洗,漂洗
在免疫荧光染色过程中单染和共染是常用的两种方式,除此之外我们还可能会用到远红外进行染色标记。这相对于前两者实验操作上处理方法是一致的,唯独在样品处理上有所不同,而导致荧光定位标记的颜色增多,相对而言变得复杂。免疫荧光技术主要是通过抗体与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。那么接下来,我们重点来介绍免疫荧光操作方法以及注意事项。操作步骤:1. 首先,在常温下将组织切片用免疫组化笔进行画圈,接着加入 0.1M PB 约 50 微升左右,进行每次 20 分钟的漂洗,漂洗
兔舍常用设备可大致分为六个部分。 兔笼设计 兔笼是长毛兔生产中不可缺少的重要设备,设计合理与否,直接影响着长毛兔的健康、兔毛品质和生产效益。 设计要求 兔笼设计一般应符合长毛兔的生物学特性,造价低廉,经久耐用,便于操作管理。兔笼规格,兔笼大小,应按长毛兔的品系类型和性别、年龄等的不同而定。一般以种兔体长为尺度,笼长为体长的1.5~2.0倍,笼宽为体长的1.3~1.5倍,笼高为体长的0.8~1.2倍。大小应以保证长毛兔能在笼内自由活动,便于操作管理为原则。
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