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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100T
一、线粒体细胞核转位分析试剂盒(HCS法)规格分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:线粒体细胞核转位分析试剂盒(HCS法)规格英文名称:
产品规格:100T
发货周期:1~3天
小牛胸腺提取的组蛋白H1,以AlexaFluor488标记富含赖氨酸的组蛋白H1。在体外细胞实验中可以通过搭配相应的蛋白转染步骤,将AlexaFluor488标记的组蛋白H1结合物导入细胞中,从而跟踪研究组蛋白H1在细胞内的运输与定位。
具有细胞膜渗透性的MitoRed探针包含一个温和的巯基反应性氯甲基基团,可用于标记线粒体,并在固定之后保留在线粒体内。标记线粒体,细胞可以与MitoRed探针简单孵育,探针通过被动扩散传过质膜,并在有活性的线粒体内富集。
细胞核荧光染料Hoechst33258是一种无毒、水溶性双苯咪唑类化合物,具有很好的膜透性,可作为荧光探针与DNA分子结合。
储存4℃避光,有效期12个月。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品:
羟-B-环糊精ATP酶测试盒(测组织及细胞膜的可测Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶,样本处理前不需高速离心)
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线粒体细胞核转位分析试剂盒(HCS法)规格9溴蒽(>95.0%(GC))英文名(EN)2,2Difluoro,3benzodioxolecarbox...特价促销 规格(SP)1G
9溴蒽(>99.0%(GC)(HPLC))英文名(EN)2,3Difluorobenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)1G
9溴菲(>98.0%(GC))英文名(EN)5Fluoronitrobenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)1G
9溴芴(>98.0%(T))英文名(EN)5Fluoromethylbenzaldehyde,96%特价促销 规格(SP)1G
9络依匹斯汀盐盐英文名(EN)4Fluoromethylbenzaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
A 8301;A8301英文名(EN)4Fluoromethylbenzaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
A66,p110α抑制剂英文名(EN)3Fluoromethoxybenzaldehyde,96%特价促销 规格(SP)1G
A779英文名(EN)3Fluoromethylbenzaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
AABDSH (=47巯,1,3并恶二唑](>94.0%(HPLC))英文名(EN)3Fluoromethylbenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)1G
ABDF[=4()7,1,3并恶二唑](>98.0%(N)(T))英文名(EN)2?Fluoro?5?methylbenzaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
ABEI;N(4)N异鲁米诺英文名(EN)2Fluoromethylbenzaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
ACDC亚单体英文名(EN)4Chlorofluorobenzaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
AcrC亚单体英文名(EN)4Chlorofluorobenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)1G
AcYVAD肽核英文名(EN)3Chlorofluorobenzaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
Ac垂体苷环化激活肽8,,小鼠,绵羊,猪,大鼠英文名(EN)3Chlorofluorobenzaldehyde,96%特价促销 规格(SP)1G
ADA;N(2)亚二英文名(EN)2Chlorofluorobenzaldehyde,98%特价促销 规格(SP)5G
ADA单盐英文名(EN)2Chlorofluorobenzaldehyde,特价促销 规格(SP)1G
ADA缓冲二盐(>,BR)英文名(EN)5Bromofluorobenzaldehyde,特价促销 规格(SP)5G
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验, 收集裂解液至离心管中,在振荡器上混匀4~15min,14000g离心15min(4℃),弃沉淀,用Bradford法或其它蛋白质测定方法测定上清中蛋白浓度以调整上样体积和上样量,进行 Western杂交时还需设置内或外参照,通常用beta-actin。 注意:一般上样20~30 μg已足够,如待检蛋白为低丰度蛋白,可加大上样量 至100μg,但电泳条带易拖尾,可制备亚细胞组份或采用更敏感的检测方法。 电泳分离(参照SDS-PAGE电泳方法) 转膜
去污剂裂解液、0.01mol/L PBS (pH7.3)、10%分离胶、4%浓缩校、G250考马斯亮蓝溶液、0.15mol/L NaCl 溶液、2X(5X)SDS上样缓冲液、电泳缓冲液、转移缓冲液、10X丽春红染液、封闭液、TBST、TBS、洗脱抗体缓冲液、显影液、定影液、抗体、化学发光试剂。 杂品与耗材 :各种规格的吸头、离心管和加样器;各种规格的烧杯、量筒和平皿等玻璃器材;硝酸纤维素膜,乳胶手套,保鲜膜,搪瓷盘(>20×20cm),X-光片夹,X-光片,玻棒长短各一根,计时
薄层色谱法简介 薄层色谱法,系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。 1.仪器与材料 (1) 玻板 除另有规定外,用5cm×20cm,10cm×20cm或20cm×20cm的规格,要求光滑、平整,洗净后不附水珠,晾干。 (2) 固定相或载体 最常用的有硅胶G、硅胶GF 、硅胶H、 硅胶HF,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶
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