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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 库存:
50
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
Rabbit
- 保质期:
一年
- 抗体英文名:
Sirt1/Sir2抗体(兔多抗)
- 抗体名:
Sirt1/Sir2抗体(兔多抗)
- 保存条件:
Sirt1/Sir2抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
- 规格:
>20次
WB,Western blot;IP,Immunoprecipitation;IC,Immunocytochemistry;IF, Immunofluorescence.
H, human; M, mouse.
本Sirt1/Sir2抗体(Sirt1/Sir2 antibody)为进口分装,以小鼠Sirt1氨基端722-737位氨基酸残基构成的肽段为抗原免疫
rabbit,然后用protein A和抗原亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
本Sirt1/Sir2抗体可以识别人和小鼠的Sirt1,其他种属未经测试。未发现和其它Sirt家族蛋白有交叉反应。
Sirt1也写作SIRT1,小鼠Sirt1曾被称作Sir2或Sir2α,低等生物中Sirt1的类似物称作Sir2。Sirt1是NAD依赖的去乙酰化酶,可以去乙酰化组蛋白、p53、Foxo3a、PGC1-α等蛋白。提高Sirt1表达量或激活Sirt1可以延长酵母、线虫和果蝇的寿命。在高等生物中Sirt1可以调节糖脂代谢,例如抑制脂肪细胞分化或促进脂肪细胞去分化,改善胰岛素敏感性等;在能量摄入限制(Caloric restriction)导致的长寿过程中Sirt1被上调。白藜芦醇(resveratrol)是Sirt1的一种常用激活剂。
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议抗体使用时的起始稀释比例为(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):
| WB | IP | IC | IF |
| 1:1000 | 1:100 | 1:200 | 1:200 |
本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| XY-S391-1 | Sirt1/Sir2抗体(兔多抗) | 20μl |
| XY-S391-2 | Western一抗稀释液 | 20ml |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件:
Sirt1/Sir2抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1.Western检测:
A.按照1:1000用信裕生物提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B.把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C.回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D.按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。
2.免疫染色:
可以使用信裕生物生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,
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文献和实验:分别是竞争性蛋白质结合分析法[3]、放射性免疫分析法[4]和薄层色谱法[5]。在80年代,放射性免疫分析法得到了广泛的应用和改进,由于这种方法采用放射性核素标记,应用范围受到一定限制,为了进一步提高检测的灵敏度和操作的安全性,进入90年代又陆续发明了各种酶标记法和化学发光法的竞争性ELISA检测试剂盒,这一类检测方法的根本原理都是基于抗体抗原的免疫反应,所有这些试剂盒中采用的抗体全部是兔抗血清或者是经过特异亲和提纯之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗,毫无疑问,兔多抗在约四十年的cAMP,cGMP定量
(3)同上。两个磷酸化位点都要做,但是可能在不同的病理条件下,侧重点有所不同,这主要体现在你的论文的讨论中。因此建议实验前多做论文研究,查阅一下别人的发表文章,看看与你的病理模型更相关的是哪个位点。 真爱满行囊 非常感谢你 的回复,现在我遇到的问题是我做出来蛋白总量还有216位点是有变化的,9位因为买的是santa curz的抗体,现在死活做不出来,很头痛,我要说明的问题是他的活性降低,我也看到216位点磷酸化水平降低了,可是现在没有第九位的结果(就是没有办法得到第九
signaling, #9272, 不能识别磷酸化AKT,只能识别非磷酸化AKT。 所以,最好用磷酸化抗体来做。 liubingood 非磷酸化的多克隆抗体(比如兔多抗)一般是可以识别磷酸化蛋白的,但是通常磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白的分子量没有什么区别,所以做出的带子通常是非磷酸化和磷酸化蛋白叠加的带子,而且磷酸化蛋白只占非磷酸化蛋白的很小很小一部分,我们就认为那是由非磷酸化蛋白组成的。要想检测磷酸化蛋白,两种方法:特异的磷酸化抗体检测;采用免疫沉淀的方法先用非磷酸化抗体
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