TRAP染色试剂盒北京厂家

特别提示：包括TRAP染色试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：TRAP染色试剂盒
产品货号：HR0561
产品规格：30T

抗酒石酸酸性磷酸酶主要存在于正常人肺泡巨噬细胞等部位的TRAP和存在于细胞白血病人脾脏TRAP 均在细胞滤泡中，并不释放入血液，血液中TRAP 绝大部分来源于破骨细胞。因而测量血液中TRAP可以了解破骨细胞的功能状态。
在碱性的缓冲液中，细胞内酸酸性磷酸酶催化底物水解，其生成物进而与一种稳定的重氮盐偶联，生成不溶性的偶氮染料沉淀，当底物中存在酒石酸时，该反应只出现在特异性细胞中。
本试剂盒适用于细胞涂片、细胞爬片、血涂片、骨髓涂片、冰冻切片及石蜡切片等的染色。阳性反应为鲜红色或深红色颗粒，定位于胞浆当中。
储存条件及有效期：2-8℃保存；三个月。

注意事项：
1．使用前请仔细阅读说明书。
2．所有的工作液请使用前新鲜配制，配制后立即使用，一次使用完。
3．石蜡切片不需要固定。
4．水洗后不要太干即放入孵育液中孵育，太干后染色效果会变差。
5．用底物孵育液孵育时要注意避光。
6．如果样本为骨片的石蜡切片，不可用酸脱钙法脱钙，酸脱钙对蛋白质的影响较大，使细胞中的特异性酶失活，从而影响特异性的酶染色，导致酶不能跟底物结合，会使染色失败。请使用其他对蛋白质的影响小的脱钙方法。

使用方法：
工作液的配制：
1．底物反应液一配制：使用前用移液器将试剂B 吸入试剂A中，溶解混匀，配成甲液；将试剂D 吸入试剂C中，溶解混匀，配成乙液。将甲液和乙液混匀即成底物反应液一。
2．底物反应液二配制：使用前用移液器将试剂F 吸入试剂E中，溶解混匀，即成底物反应液二。
3．底物反应液四配制：使用前用移液器将试剂I 吸入试剂H中，溶解混匀，即成底物反应液四。
4．底物孵育液的配制：在染色缸中加入 30ml 蒸馏水，37℃水浴10分钟。将底物反应液一、二、三、四依次加入已预温的蒸馏水中混合并充分混匀。
注意：所有的工作液请使用前新鲜配制，配制后立即使用，一次使用完，不可放置。
样本的染色处理：
一、血涂片及骨髓涂片
1．推片：取全血或骨髓3μl左右置载玻片上，将推玻片保持与载玻片30°角，置于血滴正前方，稍微往后移与血滴接触，血滴沿推片下缘散开，再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动，至血滴铺完血膜为止。不要太薄，以免细胞太少，也不要太厚，以免太重叠。
2．固定：让涂片在空气中自然晾干，再放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟，水洗30-60秒。
3．孵育：水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
4．复染：孵育完后，取出水洗1分钟，在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟，或者用甲基绿复染2-3分钟，两者任选其一即可。
二、细胞涂片及细胞爬片
1．固定：将细胞涂片或细胞爬片放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟，水洗30-60秒。
2．孵育：水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
3．复染：孵育完后，取出水洗1分钟，在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟，或者用甲基绿复染2-3分钟，两者任选其一即可。
三、冰冻切片
1．回温：将保存在-20℃冰箱中的冰冻切片放置到切片架上回温5-10分钟。可以放在37℃孵箱中进行回温，或者将切片架放置在一个小盒子中，将盒子置于37℃水浴锅中进行回温。
2．水合：将回温好的切片，水中浸泡1-2分钟。
3．固定：让切片在空气中自然晾干，再放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟，水洗30-60秒。
4．孵育：水洗后还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
5．复染：孵育完后，取出水洗1分钟，在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟，或者用甲基绿复染2-3分钟，两者任选其一即可。
四、石蜡切片
1．脱蜡：二jiǎ苯中脱蜡5-10分钟。再换用新鲜的二jiǎ苯脱蜡5-10分钟。
2．无水乙醇浸泡5分钟。再分别用90%、70%乙醇各2分钟。
3．水合：蒸馏水中浸泡2分钟。
4．孵育：还未完全干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
5．复染：孵育完后，取出水洗1分钟，在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟，或者用甲基绿复染2-3分钟，两者任选其一即可。

结果分析：
阳性反应为鲜红色或深红色颗粒，定位于胞浆中。

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