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- 英文名:
TRAP/ALP Stain Kit
- 供应商:
上海觅拓生物
- 保存条件:
-20℃
正常的骨代谢是通过成骨细胞生长与破骨细胞建立骨吸收而维持平衡。成骨细胞的标记酶是碱性磷酸酶(ALP)。破骨细胞的标记酶是抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)。这两种标记酶在组织切片或者培养细胞过程中,被作为成骨细胞、破骨细胞存在的标记指标。
本试剂盒可通过骨组织切片以及培养细胞中TRAP/ALP酶活性进行组织染色。通过观察成骨细胞和破骨细胞的染色成像,可检查细胞的分化状态和骨组织的分布情况。
◆特点
● 使用时混合3种溶液,可制备TRAP酶活性染色的显色底物溶液。
● ALP酶活性染色使用的是预混物溶液,操作简便。
● TRAP的活性部位呈红紫色,ALP的活性部位呈蓝色(茶褐色),可双重染色。
● 适用于骨组织切片(脱钙GMA树脂包埋切片)以及培养细胞。
◆试剂盒组成
● 酒石酸溶液(×10)·······3mL
● 酸性磷酸酶底物液A······30 mL
● 酸性磷酸酶底物液B······3 mL
● 核染色试剂··············10 mL
● 碱性磷酸酶预混物溶液····30 mL
<备注>本产品可对应培养细胞包装24孔板-5次,96孔板-6次。
骨组织载玻片(一个载玻片约使用500μL)包装为60个。
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文献和实验的是Lorch的Gomori法。本实验使用的是同时采用偶氮染色法和偶联反应法的TRAP/ALP染色试剂盒(和光纯药,产品编号294-67001)。关于切片的厚度,Lorch建议为8μm,同时也研究过普通的4μm切片是否能染色、双重染色的顺序应该先染TRAP和ALP中的哪一个、封片剂是否必须选水溶性封片剂等问题。染色法的结果是偶氮染色法中,切片过厚就会有酶扩散现象,即骨基质的TRAP染色倾向染成红色。即使是4μm的切片,只要增强了反应条件(反应温度及反应时间),也能充分染色。也就是说,TRAP染色反应
Vybrant® DyeCycle Violet Stain
Stability Vybrant® DyeCycle™ Violet stain 200 μL 5 mM solution in deionized water 2-6?C
to room temperature. 3) Prepare fluorescent reactive dye according to kit instructions included in the LIVE/DEAD® Fixable Dead Cell Stain Kit. For optimal performance of ArC™ reactive beads, always use freshly prepared amine-reactive dye
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