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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
36
- 英文名：
microfilament Tracker Green
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
0.2ml
英文名称：microfilament Tracker Green
产品规格：0.2ml
发货周期：1～3天
本探针为荧光染料FITC标记的毒蕈肽(phalloidin)，即phalloidin-FITC，其分子量约为1251.4，最大激发波长为496nm，最大发射波长为516nm。可以用于培养细胞或组织切片的Actin特异性荧光染色。也可以用于细胞或组织内的微丝的荧光检测。本产品使用时的推荐稀释比例为140～1200。如果每个片子需要使用200μl染色工作液，每个包装的本产品足够用于40-200个片子的染色。
注意事项
1.为避免反复冻融，建议适当分装。
2.对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。
3.荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
4.Phalloidin有一定毒性(LD50为2mg/kg体重)，1mlActin-TrackerGreen中的phalloidin少于0.2mg，使用时请注意适当防护。
储存条件-20℃避光，有效期一年。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：1．微丝绿色荧光探针规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
4,4'-二氧二2′-脱氧腺苷-5′-二二盐/dADP，2Na
N-异-N--对-二2′-脱氧腺苷-5′-二三盐/dADP，3Na
盐布替萘芬鸟苷/鸟嘌呤核苷/鸟嘌呤核甙/9-β-D-核苷鸟嘌呤/Guanosine
N-叔酰-L-叔亮尿苷二葡萄糖/尿苷-5ˊ-二葡糖二盐/葡萄糖-5ˊ-二尿苷二盐/二尿苷葡萄糖二盐/UDP-Glc/UDPG
2--4-啶尿苷二葡糖/尿苷二-α-葡糖/5ˊ-二尿苷葡糖三/尿苷5ˊ二1-α-D-葡糖三盐/UDP-GlcA/UDPGA
4-肉桂5-尿苷三四盐/尿苷-5′-三四盐/5′-UTP,4Na
2--4-氧啶5-尿苷二二盐/尿苷-5′-二二盐/5-尿嘧啶核苷二盐/焦尿苷盐/5′-UDP,2Na
3--4-氧腈5-尿苷二/尿苷-5′-二/5′-UDP
1,1-环二羧二酯5-尿苷一二盐/尿苷-5′-单二盐/一尿苷盐/尿苷二/尿甙二/5′-UMP，2Na
5-啶-2,3-二羧5-尿苷一/尿苷-5′-单/5′-UMP/U 5′-P
微丝绿色荧光探针规格4羟泊英文名(EN)3Chlorothioanisole,特价促销 规格(SP)1G
4羟泊1OβD葡萄糖苷英文名(EN)2Chlorothioanisole,96%特价促销 规格(SP)5G
4羟泊4OβD葡萄糖苷英文名(EN)2Chlorothioanisole,96%特价促销 规格(SP)5G
4羟雌激素英文名(EN)4Fluorothioanisole,特价促销 规格(SP)1G
4'羟达沙替尼英文名(EN)2Fluorothioanisole,特价促销 规格(SP)1G
4羟度洛西汀英文名(EN)4(Methylthio)aniline,98%特价促销 规格(SP)5G
4羟度洛西汀d6英文名(EN)3(Methylthio)aniline,特价促销 规格(SP)5G
4羟度洛西汀βD葡萄糖苷英文名(EN)4Nitrothioanisole,98%特价促销 规格(SP)5G
4'羟比洛芬英文名(EN)Cyclopropyl phenyl sulfide,特价促销 规格(SP)1G
4'羟华法林英文名(EN)Chloromethyl phenyl sulfide,特价促销 规格(SP)5G
4羟卡唑英文名(EN)Benzyl phenyl sulfide,特价促销 规格(SP)5G
4羟可乐定英文名(EN)Bis(4methoxyphenyl) disulfide,特价促销 规格(SP)1G
4羟可乐定d4英文名(EN)3,3′Dihydroxydiphenyl disulfide,特价促销 规格(SP)5G
4羟雷美替英文名(EN)Bis(4chlorophenyl) disulfide,特价促销 规格(SP)5G
4羟邻二腈(>97.0%(GC))英文名(EN)4Aminophenyl disulfide,98%特价促销 规格(SP)5G
4'羟尼美舒利英文名(EN)2Aminophenyl disulfide,特价促销 规格(SP)25G
4羟尼索地平英文名(EN)4Nitrophenyl disulfide,特价促销 规格(SP)25G
4'羟偶羧(>98.0%(HPLC)(T))英文名(EN)3Nitrophenyl disulfide,98%特价促销 规格(SP)25G
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验、双标或三 标)的定位、定量。如：细胞膜受体或抗原的分布， 微丝、微管的分布、 两种或三种蛋白的共存与共定位、蛋白与细胞器的共定位 细胞凋亡: AnnexinV-fitc + PI 末端原位杂交-fitc + PI 荧光原位杂交： 染色体基因定位 单细胞凝胶电泳 GFP的表达 游离Ca2+ 的分布与定量 定位、定量研究中常用荧光探针 1)Amine-Reactive Probes与抗体耦联
过程、定位分布及定量 应用：细胞膜电位的测量 荧光漂白恢复（FRAP）的测量 笼锁解笼锁的测量 荧光能量共振转移（FRET）的测量 其他应用 1、定位、定量 免疫荧光标记（单标、双标或三 标）的定位、定量。如：细胞膜受体或抗原的分布， 微丝、微管的分布、 两种或三种蛋白的共存与共定位、蛋白与细胞器的共定位 细胞凋亡: AnnexinV-fitc + PI 末端原位杂交-fitc + PI 荧
-rabbit serum 羊抗兔血清 GCA gastrin cell antibody 胃泌素细胞抗体 GFAP glial fibrillary acidic protein 胶质纤维酸性蛋白 GFL green fluorescence 绿色荧光 GH growth hormone 生素激素 GLAD gold-labelled antigen detection method 金标抗原检测法 GMA glycol methacrylate
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