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- 2025年07月16日
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49
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详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ml
操作步骤(仅供参考)：
1、Percoll规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Percoll规格
英文名称：
产品规格：100ml
发货周期：1～3天
Percoll是一种适用性广且操作灵活简单的低密度梯度分离液，可用来分离细胞，亚细胞颗粒，细菌，病毒，甚至实现受损细胞及其碎片与完整活细胞的分离。Percoll主要由表面包被单层乙烯吡烷酮（PVP）的硅胶颗粒组成，直径15-30nm，游离PVP的含量仅占1-2%。由于颗粒大小的异质化，离心过程以不同的速率沉淀，自发产生一个匀质化且等渗的梯度，密度在1.0-1.3g/ml之间。大部分沉淀系数＞60S的生物颗粒都可以用Percoll实现分离。
本品是无菌的溶液，呈无色至浅黄色，具有以下几大特点，
1）Percoll形成的梯度密度范围在1.0-1.3g/ml之间，整个梯度体系都是等渗的；
2）无细胞毒性，化学惰性，不会粘附到细胞膜上；
3）可调节至生理离子强度和pH；
4）温和条件分离细胞，亚细胞颗粒和较大病毒（低至~70S），可保持其活力和形态完整性；
5）只需角转头中速离心即可实现预成梯度或者自发形成梯度分离；
6）Percoll粘度低（10±5cPat20℃），能够快速形成梯度和颗粒分离；采用预制梯度分离低速离心力（200-1000×g）仅需数分至数十分钟即可达到满意的分离结果；
7）Percoll稳定性高，未开封的产品室温保存5年有效；开封的产品室温无菌保存至少2年有效；
8）Percoll（未稀释）可重新高压灭菌，120℃，30min；
储存条件4-30℃，有效期5年
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2-三D-精/D-2--5-胍/D-Arginine
3-羟-5-三噻吩N-叔氧羰酰-L-白酰甘酰-L-精对酰盐盐/鲎试剂三肽/BOC-Leu-Gly-Arg•Pna•HC1
2--4-氧腈Na-对酰-L-/L-1,4-酰-2-/TPCK
2-羟-3--4-啶Na-对酰-L-赖盐盐/（3S）-1--3-酰-7--2-庚盐盐/TLCK
2-羟-5-3-啶Na-对酰-L-精酯盐盐/Na-P-酰-L-精酯盐盐/TAME
2-溴N-酰-L-酪酰酯/BTEE
N--N-甘盐盐Na-酰-DL-精-对酰盐盐/Na-酰-DL-精酰-4-盐盐/盐-Na-酰-DL-精-4-酰/BAPNA/BANI
2--5-啶Na-酰-L-精酰盐盐/Na-酰-L-精/BAA
2-嗪牛/2-/牛胆//牛胆素/Taurine
Boc-胍L-甘-甘-缬三肽/甘酰-甘酰-L-缬/Gly-Gly-Val
Percoll规格1溴十二(>95.0%(GC))英文名(EN)Chlorsulfuron特价促销 规格(SP)100MG
1溴(>90.0%(GC))英文名(EN)2iP Riboside特价促销 规格(SP)500MG
1溴正(>90.0%(GC))英文名(EN)5Fluoro′deoxyuridine特价促销 规格(SP)25MG
1溴正(>98.0%(GC))英文名(EN)Carbendazim,特价促销 规格(SP)5G
1溴正(>99.0%(GC)(T))英文名(EN)Uniconazole特价促销 规格(SP)10MG
1溴代(>98%,BR)英文名(EN)Nile Blue A特价促销 规格(SP)5G
1溴蒽(>97.0%(GC))英文名(EN)Hydroxynaphthol blue特价促销 规格(SP)1G
1溴英文名(EN)Thioflavine S特价促销 规格(SP)5G
1溴金刚(>,BR)英文名(EN)Maleic acid sodium salt,≥特价促销 规格(SP)5G
1溴芘(>94.0%(GC))英文名(EN)4Aminobenzoic acid sodium salt,≥特价促销 规格(SP)25G
1米平(米平质C)英文名(EN)Ethylenediaminetetraacetic acid disodi...特价促销 规格(SP)100G
1咪唑(>98%,BR)英文名(EN)αKetoglutaric acid,特价促销 规格(SP)25G
1月桂二英文名(EN)Putrescine dihydrochloride,≥98%特价促销 规格(SP)10G
2(2羟)并恶唑(>98.0%(GC)(T))英文名(EN)Acetamide,特价促销 规格(SP)100G
2(2羟)并噻唑(>98.0%(HPLC)(T))英文名(EN)NBenzoylNphenylhydroxylamine,98%特价促销 规格(SP)1G
2(4tert)嘧(>97.0%(GC))英文名(EN)4Nitroacetanilide,98%特价促销 规格(SP)5G
2(4偶）,8二羟,6二三盐水合物(>95.0%(HPLC))英文名(EN)Thisosalicyilic acid,特价促销 规格(SP)25G
2(4),6双(三) ,3,5三嗪(>98.0%(GC))英文名(EN)2,4Dihydroxybenzoic acid,特价促销 规格(SP)25G
1、Percoll规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Percoll规格
英文名称：
产品规格：100ml
发货周期：1～3天
Percoll是一种适用性广且操作灵活简单的低密度梯度分离液，可用来分离细胞，亚细胞颗粒，细菌，病毒，甚至实现受损细胞及其碎片与完整活细胞的分离。Percoll主要由表面包被单层乙烯吡烷酮（PVP）的硅胶颗粒组成，直径15-30nm，游离PVP的含量仅占1-2%。由于颗粒大小的异质化，离心过程以不同的速率沉淀，自发产生一个匀质化且等渗的梯度，密度在1.0-1.3g/ml之间。大部分沉淀系数＞60S的生物颗粒都可以用Percoll实现分离。
本品是无菌的溶液，呈无色至浅黄色，具有以下几大特点，
1）Percoll形成的梯度密度范围在1.0-1.3g/ml之间，整个梯度体系都是等渗的；
2）无细胞毒性，化学惰性，不会粘附到细胞膜上；
3）可调节至生理离子强度和pH；
4）温和条件分离细胞，亚细胞颗粒和较大病毒（低至~70S），可保持其活力和形态完整性；
5）只需角转头中速离心即可实现预成梯度或者自发形成梯度分离；
6）Percoll粘度低（10±5cPat20℃），能够快速形成梯度和颗粒分离；采用预制梯度分离低速离心力（200-1000×g）仅需数分至数十分钟即可达到满意的分离结果；
7）Percoll稳定性高，未开封的产品室温保存5年有效；开封的产品室温无菌保存至少2年有效；
8）Percoll（未稀释）可重新高压灭菌，120℃，30min；
储存条件4-30℃，有效期5年
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2-三D-精/D-2--5-胍/D-Arginine
3-羟-5-三噻吩N-叔氧羰酰-L-白酰甘酰-L-精对酰盐盐/鲎试剂三肽/BOC-Leu-Gly-Arg•Pna•HC1
2--4-氧腈Na-对酰-L-/L-1,4-酰-2-/TPCK
2-羟-3--4-啶Na-对酰-L-赖盐盐/（3S）-1--3-酰-7--2-庚盐盐/TLCK
2-羟-5-3-啶Na-对酰-L-精酯盐盐/Na-P-酰-L-精酯盐盐/TAME
2-溴N-酰-L-酪酰酯/BTEE
N--N-甘盐盐Na-酰-DL-精-对酰盐盐/Na-酰-DL-精酰-4-盐盐/盐-Na-酰-DL-精-4-酰/BAPNA/BANI
2--5-啶Na-酰-L-精酰盐盐/Na-酰-L-精/BAA
2-嗪牛/2-/牛胆//牛胆素/Taurine
Boc-胍L-甘-甘-缬三肽/甘酰-甘酰-L-缬/Gly-Gly-Val
Percoll规格1溴十二(>95.0%(GC))英文名(EN)Chlorsulfuron特价促销 规格(SP)100MG
1溴(>90.0%(GC))英文名(EN)2iP Riboside特价促销 规格(SP)500MG
1溴正(>90.0%(GC))英文名(EN)5Fluoro′deoxyuridine特价促销 规格(SP)25MG
1溴正(>98.0%(GC))英文名(EN)Carbendazim,特价促销 规格(SP)5G
1溴正(>99.0%(GC)(T))英文名(EN)Uniconazole特价促销 规格(SP)10MG
1溴代(>98%,BR)英文名(EN)Nile Blue A特价促销 规格(SP)5G
1溴蒽(>97.0%(GC))英文名(EN)Hydroxynaphthol blue特价促销 规格(SP)1G
1溴英文名(EN)Thioflavine S特价促销 规格(SP)5G
1溴金刚(>,BR)英文名(EN)Maleic acid sodium salt,≥特价促销 规格(SP)5G
1溴芘(>94.0%(GC))英文名(EN)4Aminobenzoic acid sodium salt,≥特价促销 规格(SP)25G
1米平(米平质C)英文名(EN)Ethylenediaminetetraacetic acid disodi...特价促销 规格(SP)100G
1咪唑(>98%,BR)英文名(EN)αKetoglutaric acid,特价促销 规格(SP)25G
1月桂二英文名(EN)Putrescine dihydrochloride,≥98%特价促销 规格(SP)10G
2(2羟)并恶唑(>98.0%(GC)(T))英文名(EN)Acetamide,特价促销 规格(SP)100G
2(2羟)并噻唑(>98.0%(HPLC)(T))英文名(EN)NBenzoylNphenylhydroxylamine,98%特价促销 规格(SP)1G
2(4tert)嘧(>97.0%(GC))英文名(EN)4Nitroacetanilide,98%特价促销 规格(SP)5G
2(4偶）,8二羟,6二三盐水合物(>95.0%(HPLC))英文名(EN)Thisosalicyilic acid,特价促销 规格(SP)25G
2(4),6双(三) ,3,5三嗪(>98.0%(GC))英文名(EN)2,4Dihydroxybenzoic acid,特价促销 规格(SP)25G
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文献和实验相关实验
Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低( 不同浓度(密度)Percoll溶液的制备: 先用9份Percoll与1份8.5％ NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压，然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。 Percoll浓度(％) 70 60 50 40 30 20 比重g／ml
直径mm 压平宽度（半周长）mm 截留分子量Da 22 34 3500 22 34 7000
通常在整个HPLC系统中，使用.010"ID×1/16"OD的管子是很安全的。使用.010"ID的管子，一般使用的管长度下压降可忽略不计，而且，该内径连接管导致的谱带展宽可以忽略。Upchurch该规格PEEK管颜色为自然色或蓝色（1531和1531B）。 用1.8mmOD的管子取代一些药物系统中使用的含氟聚合物管子。Agilent1100 系统在高压流路中使用新的1/32"OD的管子。PEEK管还有其它尺寸，一般长度为50′和100′。 一个主要的制药
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