BINKIT ® NK细胞增殖套装（外周血单核细胞来源）

"BINKIT ^® NK细胞增殖套装（外周血单核细胞来源）
BINKIT ^® for NK cells expansion from PBMCs
BINKIT自然杀伤细胞（NK细胞）扩增培养试剂盒
◆原理
　　BINKIT 可从外周血单核细胞扩增高活性的自然杀伤（NK）细胞。
◆优点・特色
• 无需饲养层细胞，即可从外周血细胞 (PBMCs)中扩增NK细胞
• 3周时间内NK细胞的数目可扩增几百到几千倍
• NK细胞将获得增强的细胞杀伤性
• 该试剂盒适合20~50mL的外周血细胞
• Xeno-free（不含动物来源的材料）
◆案例・应用
<试剂盒组成>
• NK 细胞初始培养基
• NK细胞初始培养瓶
• NK细胞传代培养基
• BINKIT^® 明细表(PDF格式)
 
<未提供材料>
• Ficoll 淋巴细胞分层液（GE Healthcare）
• 无菌PBS
• FBS或自体血浆（56℃加热30分钟以灭活）
<结果>

图 1 使用BINKIT^®进行体外NK细胞扩增
利用BINKIT^®对外周血单核细胞进行NK细胞扩增，CD3-CD56+细胞从15.8％增加到88.6％。
 
图 2 使用BINKIT^®进行体外NK细胞扩增
利用BINKIT^®对外周血单核细胞（来自健康自愿者，HD, n=3）进行NK细胞扩增。
细胞计数（左）和倍率的变化（右）表明NK细胞体在外高效扩增。
 
 
图3  使用BINKIT^®进行体外NK细胞扩增
分别以BINKIT扩增的NK细胞（实线）和从3名志愿者新鲜分离的NK细胞（虚线）来检测NK细胞对K562细胞的杀伤性。
结果表明，扩增后的NK细胞对K562细胞杀伤性显著增强（P<0.01）。
<培养步骤>
(1) 准备试剂
在NK细胞初始培养基和NK细胞传代培养基中，加入5% (v/v) 的热灭活FBS或自体血浆。
(2) 制备外周血单核细胞（PBMCs）
通过Ficoll密度梯度离心，从人全血中分离外周血单核细胞。
(3)清洗NK细胞初始培养瓶
加入10毫升PBS至NK细胞初始培养瓶。倾斜培养瓶使PBS覆盖整个表面。
将培养瓶中液体全部倒出，小心以免刮伤培养瓶的表面。重复洗涤过程两次。
(4)从PBMCs中培养NK细胞
将1X 10⁶ cells/mL 的PBMCs 悬浮于NK细胞初始培养基中。每1 mL 细胞悬浮液加入40 uL的NK细胞初始混合物。
细胞悬液转移至预洗涤的NK细胞初始培养瓶，在37℃，5％的CO₂培养3天。
(5)更换培养基及传代
同贴壁细胞处理一样，转移时置于锥形离心管，200×g离心8分钟。
去除上清，将1X 10⁶ cells/mL 的NK细胞悬浮于传代培养基中，培养基内加入5ml
转移后的悬浮细胞置于常规培养瓶中，在37℃，5％ CO₂条件下培养。
每2-3天将 0.8X 10⁶ cells/mL 细胞置于完全NK细胞传代培养基中，进行传代培养。
<建议培养期>
2 - 3 周
注意：试剂仅供科研使用，不可用于临床。 

产品编号	产品名称	产品规格
N501-1	BINKIT ®  for NK cells expansion from PBMCs  BINKIT ®  NK细胞增殖套装（外周血单核细胞来源）	1 kit
N501-2	BINKIT ®  for NK cells expansion from PBMCs  BINKIT ®  NK细胞增殖套装（外周血单核细胞来源）	2 kits
N501-4	BINKIT ®  for NK cells expansion from PBMCs  BINKIT ®  NK细胞增殖套装（外周血单核细胞来源）	4 kits
N501-8	BINKIT ®  for NK cells expansion from PBMCs  BINKIT ®  NK细胞增殖套装（外周血单核细胞来源）	8 kits

 "