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慢病毒转染稳转细胞系构建

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      细胞系/稳转细胞株株构建

    • 提供商

      艾柏森(北京)生物科技有限公司

    慢病毒转染稳转细胞系构建

           慢病毒构建并包装后,以进行贴壁细胞或悬浮细胞的转染。
                                             产品细节图片1
    具体流程如下:

    1. 对慢病毒基因进行改造,即敲除U3端的400bp的特定基因,使其逆转录和整合的能力,但保留产生病毒颗粒必须的蛋白的能力
    2. 向上述基因中插入目的基因。与具有包装功能的质粒同时进行对包装细胞的转染。在细胞上清中获得携带目的基因的复制缺陷型慢病毒载体颗粒
    3. 使用上述获得的慢病毒颗粒转染目的细胞
    4. 根据慢病毒携带的标记基因,转染得到的细胞进行荧光蛋白检测或加入抗生素进行细胞筛选。
    5. 荧光性强或者克隆数多的细胞系加以传代培养并保存
    网址
         
    http://www.ebiofield.com/goods-174115.html

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    • 实验 Q&A:如何用慢病毒转染构建稳转细胞系

      这里说的稳转细胞系构建是指慢病毒转染构建稳转细胞系,可以构建表达细胞系,也能构建敲降细胞系,经常有人问我什么叫稳转和顺转的区别。瞬转细胞系,一般情况下能够稳定表达最多长一周左右,而稳转细胞系,只要构建成功就能稳定表达,没有时间限制,但是也不是肯定的,一般实验构建细胞系超过 10 代以后,这个细胞系就有可能不靠谱了。接下来,咱们讲讲稳转细胞系构建。一般来讲 shRNA 用的是 HIV 病毒,虽然已经经过处理,但是一听这名字也觉得渗人,无论如何保护自己是在实验室永葆青春的基础,所以一定

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