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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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26
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
0.75ml/1ml/1.5ml
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：转染试剂说明书
英文名称：
产品规格：0.75ml/1ml/1.5ml
发货周期：1～3天
产品优势
◆一步转染，转染前和转染后均不需要换液，操作简单；
◆高转染效率，低细胞毒性，对细胞生长无影响；
◆对贴壁细胞和悬浮细胞的瞬时转染或稳定转染均有效；
◆适用于微孔板转染，也适用于生物反应器的大量转染；
◆高效转染很多细胞，如293,CHO,COS-7,HeLa,HepG2,MDCK,PC12,HT29,NIH-3T3,MCF7,Vero,SF9等。
保存条件4°保存，一年有效。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
转染试剂说明书待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
1,8-双二萘双三（羟）/二(2-羟)亚三(羟)/双(2-羟)(三羟)/2,2-双二羟/BIS-TRIS
(R)-环氧三羟/缓血铵/三（羟）/2--2-(羟)-1,3-二醇/三醇/三醇/三醇/TRIS/Tris-base/THAM
(S)-环氧2-(N-啉)盐/吗啉盐/MES sodium salt
(S)-1-N-Boc-Isobutylpiperazine2-(N-啉)/吗啉/2-(4-吗啉)/2-(N-吗啉)/MES
7-溴靛红2-()/2-/2-(N-)/N--2-/CHES
2--4-醇3-(3-胆固醇)二-2-羟-1-/3-(3-胆)二-2-羟-1-内盐/CHAPSO
偶二异咪唑啉3-(3-胆固醇)二-1-/3-3-(胆酰)二内盐/CHAPS
1-(2-嘧啶)嗪N-三（羟）甘/三羟甘/N-三-(羟)/三(羟)甘/TRICINE
2,4,5-三N,N-双（2-羟）甘/N,N-二(2-羟)/N,N-二羟甘/BICINE
2-氧N,N-双（2-羟）-2-盐/N,N-二(2-羟)-2-/BES sodium salt
转染试剂说明书1,2Dihydro5methyl2phenyl3Hpyrazol3one135唑啉19735898
2,2Diphenylacetic acid2,2二117340
6Hydroxyquinoline6羟580165
Triclosan三生3380345
2AZACYCLONONANONE2环壬935308
LAspartic acid 4benzyl esterL天冬4苄2177631
Ethylcyclohexane环1678917
Origanum oil牛至油2230843
NA肼苄
mulberroside A桑皮苷A102841429
HDGLU(OME)OHL谷 11637964
Isoprene异二78795
ISOBUTYLLITHIUM异锂920365
LY 294002 HYDROCHLORIDE82(啉4)色原154447366
INDOXYL ACETATE吲哚608082
1，8二羟蒽醌;1,8Dihydr 117102 订购|咨询 规格 100mg
胆;Cholic acid 81254 订购|咨询 规格 200mg
重楼皂苷E;Progenin III 19057671 订购|咨询 规格 20mg
苍术苷A;Atractyloside A 126054771 订购|咨询 规格 20mg
长春;Vincristine 57227 订购|咨询 规格 20mg
贝萼皂苷元;Bayogenin 6989248 订购|咨询 规格 20mg
贝母素;Peimine 23496415 订购|咨询 规格 20mg
;品型;标准品;有证书 967806 订购|咨询 规格 0.1g
脲;品型;标准品;有证书 103055078 订购|咨询 规格 0.1g
甜菜;品型;标准品;有证书 13684565 订购|咨询 规格 0.1g
;品型;标准品;有证书 6607 订购|咨询 规格 0.1g
噻酰;品型;标准品;有证书 130000407 订购|咨询 规格 0.1g
蚜唑;品型;标准品;有证书 78579 订购|咨询 规格 0.1g
四;品型;标准品;有证书 271241146 订购|咨询 规格 0.1g
炔;品型;标准品;有证书 23031369 订购|咨询 规格 50mg
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：转染试剂说明书
英文名称：
产品规格：0.75ml/1ml/1.5ml
发货周期：1～3天
产品优势
◆一步转染，转染前和转染后均不需要换液，操作简单；
◆高转染效率，低细胞毒性，对细胞生长无影响；
◆对贴壁细胞和悬浮细胞的瞬时转染或稳定转染均有效；
◆适用于微孔板转染，也适用于生物反应器的大量转染；
◆高效转染很多细胞，如293,CHO,COS-7,HeLa,HepG2,MDCK,PC12,HT29,NIH-3T3,MCF7,Vero,SF9等。
保存条件4°保存，一年有效。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
转染试剂说明书待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
1,8-双二萘双三（羟）/二(2-羟)亚三(羟)/双(2-羟)(三羟)/2,2-双二羟/BIS-TRIS
(R)-环氧三羟/缓血铵/三（羟）/2--2-(羟)-1,3-二醇/三醇/三醇/三醇/TRIS/Tris-base/THAM
(S)-环氧2-(N-啉)盐/吗啉盐/MES sodium salt
(S)-1-N-Boc-Isobutylpiperazine2-(N-啉)/吗啉/2-(4-吗啉)/2-(N-吗啉)/MES
7-溴靛红2-()/2-/2-(N-)/N--2-/CHES
2--4-醇3-(3-胆固醇)二-2-羟-1-/3-(3-胆)二-2-羟-1-内盐/CHAPSO
偶二异咪唑啉3-(3-胆固醇)二-1-/3-3-(胆酰)二内盐/CHAPS
1-(2-嘧啶)嗪N-三（羟）甘/三羟甘/N-三-(羟)/三(羟)甘/TRICINE
2,4,5-三N,N-双（2-羟）甘/N,N-二(2-羟)/N,N-二羟甘/BICINE
2-氧N,N-双（2-羟）-2-盐/N,N-二(2-羟)-2-/BES sodium salt
转染试剂说明书1,2Dihydro5methyl2phenyl3Hpyrazol3one135唑啉19735898
2,2Diphenylacetic acid2,2二117340
6Hydroxyquinoline6羟580165
Triclosan三生3380345
2AZACYCLONONANONE2环壬935308
LAspartic acid 4benzyl esterL天冬4苄2177631
Ethylcyclohexane环1678917
Origanum oil牛至油2230843
NA肼苄
mulberroside A桑皮苷A102841429
HDGLU(OME)OHL谷 11637964
Isoprene异二78795
ISOBUTYLLITHIUM异锂920365
LY 294002 HYDROCHLORIDE82(啉4)色原154447366
INDOXYL ACETATE吲哚608082
1，8二羟蒽醌;1,8Dihydr 117102 订购|咨询 规格 100mg
胆;Cholic acid 81254 订购|咨询 规格 200mg
重楼皂苷E;Progenin III 19057671 订购|咨询 规格 20mg
苍术苷A;Atractyloside A 126054771 订购|咨询 规格 20mg
长春;Vincristine 57227 订购|咨询 规格 20mg
贝萼皂苷元;Bayogenin 6989248 订购|咨询 规格 20mg
贝母素;Peimine 23496415 订购|咨询 规格 20mg
;品型;标准品;有证书 967806 订购|咨询 规格 0.1g
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蚜唑;品型;标准品;有证书 78579 订购|咨询 规格 0.1g
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细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验相关实验
病毒载体在生物医学的基础研究和产品开发中具有重要作用，细胞转染是制备病毒载体的关键步骤。然而现有转染试剂价格昂贵、操作繁琐，已成为快速、高效和大规模制备病毒载体的限制因素。QuickShuttle系列转染试剂是由北京康碧泉生物科技有限公司研发的一类具有自主知识产权、独特配方的阳离子型转染试剂，具有高效、低毒和易于使用等优点。QuickShuttle区别于常规转染试剂的两个最主要特点是：（1）可以在细胞传代后尚未贴壁时立即进行转染（立传立转）；（2）转染操作可在一分钟内完成
高效转染试剂盒说明书.pdf 关于百恩维生物
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