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钙荧光探针(Fluo 3-AM)规格

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  • 上海研生
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  • 2025年07月15日
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    • 供应商

      上海研生

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      100ug|1mg

    【细胞冻存】
    待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
    中文名称:钙荧光探针(Fluo 3-AM)规格
    英文名称:
    产品规格:100ug|1mg
    发货周期:1~3天
    Fluo-3,AMester是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3,AMester进入细胞后可以被细胞内源性酯酶剪切形成Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-3可以和钙离子结合,结合钙离子后可以产生较强的荧光,最大激发波长为506nm,最大发射波长为526nm。Fluo-3,AMester的一个重要作用是其在高通量药物筛选中的应用。

    别名钙荧光探针;钙离子探针
    CAS号121714-22-5
    分子式C51H50Cl2N2O23
    分子量1129.85
    纯度≥90%(HPLC)
    性状红色粉末
    储存条件-20℃干燥避光,有效期12个月
    【培养指南】
    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    【复苏的原则】
    产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
    细胞的种类:
    第一种:
    是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
    第二种:
    是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
    质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
    细胞培养操作规程:
    一.培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    二.细胞处理:
    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
     2-(2--5-)-5-(6-啶-3-)噻吩SDS-PAGE蛋白质高分子量/高分子量标准蛋白/高分子MARK/High range protein MW marker

     3-(二)-2-异烯酯SDS-PAGE蛋白质中分子量/中分子量标准蛋白/中分子MARK/Middle range protein MW marker
     B-(6,9-二-9H--3-)SDS-PAGE蛋白质次高分子标准/次高分子MARK/SDS-聚烯酰凝胶电泳次高分子量标准蛋白质/SDS-PAGE Molecular hight weight markers for proteins
     2--4-15-150kDa精确分子量MARK/Precise Protein Molecular weight Mark
     1--1H-唑-4-羧19-119kDa预先染色分子量MARK/Prestained Protein Molecular weight Mark
     (1S,4S)-2-Boc-2,5-二双环[2.2.1]庚刀豆素A/Concanamycin A
     Boc-D-精盐盐刀豆球蛋白A/刀豆凝集素A/伴刀豆球蛋白A/伴刀豆凝集素/刀豆凝集素A/刀豆球朊A/ConA
     3,5-二-唑-4-羧转铁蛋白/铁传递蛋白/Transferrin human/TF/TRF
     并[b]噻吩并-3-马脾铁蛋白/铁蛋白(马脾)/ Ferritin from horse spleen/HSF
     伊班人血纤维蛋白原/Fibrinogen from human plasma
    钙荧光探针(Fluo 3-AM)规格盐莫西沙星标准品  Moxifloxacin Hydrochloride   CAS186826868

    一水合标准品  Morphine Monohydrate CII (AS)  CAS6009810
    盐莫雷西嗪标准品  Moricizine Hydrochloride  CAS29560585
    莫仑太尔标准品  Morantel Tartrate   CAS26155317
    孟鲁司特标准品  Montelukast Sodium  CAS151767021
    马来单十八酯标准品  Monostearyl Maleate   CAS2424626
    谷一标准品  Monosodium Glutamate (AS)  CAS142472
    单甘酯标准品  Monoglycerides  CAS68990534
    标准品  Monoethanolamine   CAS141435
    莫诺宗标准品  Monobenzone  CAS103162
    莫能盐标准品  Monensin Sodium   CAS22373780
    糖莫米松标准品  Mometasone Furoate   CAS83919237
    盐吗茚标准品  Molindone Hydrochloride  CAS15622658
    莫达相关物质E标准品  Modafinil Related Compound E  CAS1726029
    莫达相关物质D标准品  Modafinil Related Compound D  CAS574425
     进口、国产  Yttriumoxide  含量BR,97%
     进口、国产  Ammoniumformate  含量CP,93.5%
      进口、国产  Potassiumformate  含量BR,95%
    βD代半糖糖苷  进口、国产  IPTG  含量BR,98%
    异铝  进口、国产  Aluminumisopropoxide  含量BR,89%
    异福尔  进口、国产  Isophorone  含量CP,99%
    异柠檬脱酶  进口、国产  Isocitratedehydrogenase  含量BR,30u/ul
     进口、国产  Sodiumcyanate  含量CP
    异三十  进口、国产  Squalane  含量97%
    异维生素C  进口、国产  DSodiumisoascorbiate  含量98.5%
    操作步骤(仅供参考):
    1、钙荧光探针(Fluo 3-AM)规格贴壁细胞的消化
    ①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
    ②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
    ③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
    化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
    ④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
    ⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
    2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。


     

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