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- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
35
- 英文名：
Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
20T
操作步骤(仅供参考)：
1、Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)哪家好
英文名称：Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric
产品规格：20T
发货周期：1～3天
Caspase3，即Cysteine-requiringAspartateProtease3，也称CPP32、Yama或apopain，属于Caspase家族的CED-3亚家族(CED-3subfamily)，系一种在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶，也是哺乳动物细胞中研究最多的一个Caspase。Caspase3可以剪切procaspase3、6、7和9，且可以直接特异性剪切多种Caspase底物，包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)、ICAD(Inhibitorofcaspase-activateddeoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。这些由Caspase3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外，caspase3在细胞核凋亡和细胞起泡(Cellblebbing)过程中也起到了关键作用，包括染色质固缩(chromatincondensention)，DNA片段化(DNAfragmentation)等。
Caspase3AssayKit,Colorimetric是一款简单快速检测细胞或组织内Casepase3活性的试剂盒，其检测原理是基于Casepase3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Aspp-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline)，pNA在405nm附近有强吸收，从而可以通过测定吸光度来检测Caspase3的活性（黄色产物与Caspase3酶的活性成正比）。另外，本试剂盒中还提供了Caspase3催化产生的黄色产物pNA，以此作为定量caspase3酶活性的标准品。
试剂盒组份
LysisBuffer裂解液————8ml
AssayBuffer检测缓冲液——8ml
Ac-DEVD-pNA(2mM)—————200μl
pNA(10mM)————————200μl
储存条件-20℃
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
盐酸万乃洛韦卡那霉素盐
酸异酯衣霉素/Tunicamycin from Streptomyces lysosuperficus
4-溴腈乳酸氧苄啶/2,4-二基-5-(3,4,5-三氧基苄基)嘧啶乳酸盐；乳酸氧苄嘧啶；氧苄嘧啶乳酸盐；乳酸三氧苄嘧啶/Trimethoprim lactate salt
5-基-2,4-二酸酯金丝桃素/金丝桃蒽/4,5,7,4ˊ,5ˊ,7ˊ-六羟基-2,2ˊ-二基萘并二蒽/海帕里辛/Hypericin
2-氧基-4-溴腈长春新/长春新化物/基长春/长春/VCR
4--2-氧基-3-啶酸酯D-地衣酸/(+)-松萝酸/松萝酸/地衣酸/D-2,6-二酰基-7,9-二羟基-8,9b-二基-1,3(2H,9bH)-二并二/(+)-Usniacin
葡乳酸钙噁唑/恶唑/基异恶唑/基异噁唑/新明/新诺明/3-对酰基-5-基恶唑/4-基-N-(5-基-3-异恶唑基)酰/SMZ
二酸二酰肼5-胞嘧啶/胞嘧啶/4-基-5--2(1H)-嘧啶/5-Fluorocytosine
(二基基)盐酸盐唑/痢特灵/3-（5-糠叉基）-2-唑/3-(5-糠缩基)-2-恶唑/3-(5-叉基)-2-恶唑/Furazolidone
4-氧基-2,3-二腈基嘧啶/Sulfamerazine
Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)哪家好二异相关物质A标准品 规格10mg
右芬相关物质A标准品 规格50mg
蛋白A标准品 规格ea
原儿茶标准品 规格25mg Protocatechuic Acid
噻嘧啶相关物质A标准品 规格25mg
除虫菊提取物标准品 规格100mg Pyrethrum Extract
夸西相关物质A标准品 规格30mg Quazepam Related Compound A
雷贝拉相关物质A标准品 规格ea
雷米普利相关物质C标准品 规格20mg
雷尼替混合物标准品 规格20mg Ranitidine Resolution Mixture
神经 进口、国产 Nervonicacid 含量CP，98%
生根 进口、国产 RootingPowde 含量AR
失水甘露糖单油酯 进口、国产 ArlacelA 含量BR，97%
失水苹 进口、国产 MA 含量CP
湿霉素 进口、国产 HygromycinB 含量II型，牛鼻膜
湿润剂P40 进口、国产 NP40 含量BR，98%
十八钡 进口、国产 Bariumstearate 含量BR，99%
十八钙盐 进口、国产 Calciumstearate 含量98.5%
十八 进口、国产 Potassiumstearate 含量CP，98%
十八 进口、国产 Lithiumstearate 含量FGC，4060目
1、Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)哪家好
英文名称：Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric
产品规格：20T
发货周期：1～3天
Caspase3，即Cysteine-requiringAspartateProtease3，也称CPP32、Yama或apopain，属于Caspase家族的CED-3亚家族(CED-3subfamily)，系一种在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶，也是哺乳动物细胞中研究最多的一个Caspase。Caspase3可以剪切procaspase3、6、7和9，且可以直接特异性剪切多种Caspase底物，包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)、ICAD(Inhibitorofcaspase-activateddeoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。这些由Caspase3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外，caspase3在细胞核凋亡和细胞起泡(Cellblebbing)过程中也起到了关键作用，包括染色质固缩(chromatincondensention)，DNA片段化(DNAfragmentation)等。
Caspase3AssayKit,Colorimetric是一款简单快速检测细胞或组织内Casepase3活性的试剂盒，其检测原理是基于Casepase3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Aspp-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline)，pNA在405nm附近有强吸收，从而可以通过测定吸光度来检测Caspase3的活性（黄色产物与Caspase3酶的活性成正比）。另外，本试剂盒中还提供了Caspase3催化产生的黄色产物pNA，以此作为定量caspase3酶活性的标准品。
试剂盒组份
LysisBuffer裂解液————8ml
AssayBuffer检测缓冲液——8ml
Ac-DEVD-pNA(2mM)—————200μl
pNA(10mM)————————200μl
储存条件-20℃
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
盐酸万乃洛韦卡那霉素盐
酸异酯衣霉素/Tunicamycin from Streptomyces lysosuperficus
4-溴腈乳酸氧苄啶/2,4-二基-5-(3,4,5-三氧基苄基)嘧啶乳酸盐；乳酸氧苄嘧啶；氧苄嘧啶乳酸盐；乳酸三氧苄嘧啶/Trimethoprim lactate salt
5-基-2,4-二酸酯金丝桃素/金丝桃蒽/4,5,7,4ˊ,5ˊ,7ˊ-六羟基-2,2ˊ-二基萘并二蒽/海帕里辛/Hypericin
2-氧基-4-溴腈长春新/长春新化物/基长春/长春/VCR
4--2-氧基-3-啶酸酯D-地衣酸/(+)-松萝酸/松萝酸/地衣酸/D-2,6-二酰基-7,9-二羟基-8,9b-二基-1,3(2H,9bH)-二并二/(+)-Usniacin
葡乳酸钙噁唑/恶唑/基异恶唑/基异噁唑/新明/新诺明/3-对酰基-5-基恶唑/4-基-N-(5-基-3-异恶唑基)酰/SMZ
二酸二酰肼5-胞嘧啶/胞嘧啶/4-基-5--2(1H)-嘧啶/5-Fluorocytosine
(二基基)盐酸盐唑/痢特灵/3-（5-糠叉基）-2-唑/3-(5-糠缩基)-2-恶唑/3-(5-叉基)-2-恶唑/Furazolidone
4-氧基-2,3-二腈基嘧啶/Sulfamerazine
Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)哪家好二异相关物质A标准品 规格10mg
右芬相关物质A标准品 规格50mg
蛋白A标准品 规格ea
原儿茶标准品 规格25mg Protocatechuic Acid
噻嘧啶相关物质A标准品 规格25mg
除虫菊提取物标准品 规格100mg Pyrethrum Extract
夸西相关物质A标准品 规格30mg Quazepam Related Compound A
雷贝拉相关物质A标准品 规格ea
雷米普利相关物质C标准品 规格20mg
雷尼替混合物标准品 规格20mg Ranitidine Resolution Mixture
神经 进口、国产 Nervonicacid 含量CP，98%
生根 进口、国产 RootingPowde 含量AR
失水甘露糖单油酯 进口、国产 ArlacelA 含量BR，97%
失水苹 进口、国产 MA 含量CP
湿霉素 进口、国产 HygromycinB 含量II型，牛鼻膜
湿润剂P40 进口、国产 NP40 含量BR，98%
十八钡 进口、国产 Bariumstearate 含量BR，99%
十八钙盐 进口、国产 Calciumstearate 含量98.5%
十八 进口、国产 Potassiumstearate 含量CP，98%
十八 进口、国产 Lithiumstearate 含量FGC，4060目
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文献和实验相关实验
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase-3的活性明显下降。1、Western blot 分析Procaspase-3的活化，以及活化
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase-3的活性明显下降。1 Western blot 分析Procaspase-3的活化，以及活化
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