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- 上海研生
- YSRIBIO-C1189
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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
54
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100T
英文名称：
产品规格：100T
发货周期：1～3天
产品说明
作为细胞染色剂之一的台盼蓝(TrypanBlue)已被证明受到活体细胞的排斥，而死亡细胞摄入染料显示蓝色。通过常用的光学显微镜可以观察到细胞染色情况，同时可以定量计数，但是该染色无法定性区别自杀细胞还是坏死细胞。台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒，是利用正常的健康细胞能够排斥台盼蓝，而丧失细胞膜完整性的细胞可以被台盼蓝染色。通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已经死亡。台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
注意事项
1.本产品为1000次操作
2.染色只需3-5分钟即可完成,操作简单
3.避免台盼蓝染色时间过长，否则由于其毒性导致细胞死亡
4.注意安全防护
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：1．台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
3,5-二水杨酸5-邻菲啰啉
L-酸叔酯盐酸盐邻二紫
4-基-2-盐酸盐活性碳
间酰比布里希猩红猩红B
4-羟基-6,7-二氧基间紫
3,5-二-4-异氧酸二酸
溴化锂水合物滂天蓝
2-羟基-5-溴啶牛去氧胆酸/牛脱氧胆酸/Sodium taurodeoxycholat
3-溴-2-羟基啶香酸/4-羟基-3,5-二氧酸/3,5-二氧基-4-羟酸/4-羟基-3,5-二氧基酸/梧酸-3,5-二/紫香酸/Syringic acid
2,6-二醇香/3,5-二氧基-4-羟/Syringaldehyde
台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒说明书一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒（100次） 规格HPLC≥98%;20mgCryptochlorogenic acid
一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒（30次） 规格HPLC≥98%;20mgIndiaconitine
植物总蛋白提取 规格HPLC≥98%;20mgPrunetin
植物线粒体总蛋白提取试剂盒（见关联产品） 规格HPLC≥95%;20mgBiochanin A
植物叶绿体蛋白提取试剂盒（见关联产品） 规格HPLC≥98%;20mgBelsoline
植物总蛋白质微量提取试剂盒（2DE专用）（100次） 规格HPLC≥98%;20mgd-Tetrahydropalmatine
植物总蛋白质微量提取试剂盒（2DE专用）（30次） 规格HPLC≥98%;20mgNaringin
植物总蛋白质微量提取试剂盒（SDS-PAGE专用） 规格HPLC≥95%;20mgNaringenin
真菌总蛋白提取 规格HPLC≥98%;20mgLupeol
真菌总蛋白质微量提取试剂盒 规格HPLC≥98%;20mgTectorigenin
细菌总蛋白提取 规格HPLC≥98%;20mgGenkwanin
ConA糖蛋白分离试剂盒 规格HPLC≥98%;20mgProtopine
WGA糖蛋白分离试剂盒 规格HPLC≥98%;20mgprotocatechuic aldehyde
化蛋白化试剂盒（见关联产品） 规格HPLC≥98%;20mgprotocatechuic acid
化蛋白富集试剂盒 规格HPLC≥98%;20mgproanthocyanidins
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验定OD值，可向每孔中加入10 μL 0.1 M HCl溶液或者1%（W/V）SDS溶液，并遮盖培养板避光室温保存。在24小时内吸光度不会发生变化。 7．结果分析： A．细胞存活率：将各测试孔的OD值减去本底OD值（空白组），各重复孔的OD值取平均数±SD。 细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100%。 B．求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。 五、经验总结 1．种板数：通过文献确认，看实验所用细胞别人是否做过，找出大致范围
- 3) 及 CD45 -PE (HI30，白细胞标志) 抗体染色后，进行流式分析，死细胞以 DAPI 染色先行排除，左右分别为分选前后的细胞群分布。 总结： 几次实验的结果，使用 Fab-TACS® Gravity column 来从全血直接进行 CD3+ T 细胞分选，平均得率为 84.5%，纯度大于 90%，细胞存活率高于 95%，且目标细胞不含标记，贴近天然，使下游实验更精确。
Q：Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么？ A：Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，核染料 PI 或 7-AAD
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