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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
26
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ml|500ml
使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称：Tris-Maleate缓冲液(1mol/L,pH6.5-8.5)说明
英文名称：
产品规格：100ml|500ml
发货周期：1～3天
用途：
又称Tris-马来酸缓冲液，免疫组化和染色中的常规缓冲液。
注意事项：
主要由马来酸/顺丁烯二酸溶于去离子水获得，未调整pH值。
储存条件：室温，12个月
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
肉桂醇shēng huà shì jì容量：0.5毫升
620,6二录靛酚钠;二录蓝靛酚钠;2,6二录酚靛酚钠;双录酚靛酚钠;2,6双录靛酚钠盐2,6Dichloroindopxenol wo7ium;wo7ium 2,6dichlorobenzenone indopxenol;2,6Dichloropxenolindopxenol wo7ium;2,6DichloroN(pxy7noxypxenyl)pbenzoinoneoneiMine wo7ium;TillMan's reagent
D乳酸脱氢酶1克保存：20℃，避光
2,6二本安;2安基间二本;1安基2,6二本;2安基1,3二基本;连间二本安 2,6DiMqthylcnilinq;2cMino1,3diMqthylbqnzqnq;vicMXylidinq;2,6Xylidinq;2cMinoMxylqnq;1cMino2,6diMqthylbqnzqnq 87/6/7
磺胺二5克2～8℃
DIETHANOLAMINE二试剂级透明粘稠液体RT不sigma
酸盐肉汤NA
钠培养基10克RT
邻苯二甲酰 Phthalhydrazide,99% 8 25G 通用试剂
N,N双(2乙磺... PIPES (cell culture tested, ≥99%) 56253 25G 缓冲液
台盼蓝，英文名或英文缩写：Trypan blue，级别：超，99%，规格：5克
洛嗪 wo7ium 3(pyridin2yl)1,2,4triczinq5,6diyl]bis(bqnzqnq4,4'sulphonctq) hydrctq 8989
3nitno4isobutylpxenyl)boronic acid 059
秋水仙碱 Colchicine (≥98%,HPLC) 6 20MG 通用试剂
DL苏酸/DLα基β羟基/(±)2基3羟基/DL羟基/DL异赤丝藻基酸/DLTheronine BR，99% 10g 国产/进口
小鼠B细胞活化因子(BAFF/CD257/TNFSF13B)ELISA试剂盒 ，英文名： BAFF/CD257/TNFSF13B ELISA Kit
鱼类主要组织相容性复合体(MHC)ELISA检测试剂盒Fishmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit 96T/48T
犬脂多糖/内毒素(LPS)免疫试剂盒 Canine Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
英文名称MouseBAFF-RELISAKit小鼠B细胞活化因子受体(BAF
Tris-Maleate缓冲液(1mol/L,pH6.5-8.5)说明人超敏生长激素(U S-GH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
豚鼠皮质醇(Coisol)免疫试剂盒 Guinea Pig Coisol ELISA Kit
酶9(CA9)ELISA试剂盒 ，英文名： CA9 ELISA Kit
Mousethrombospondin1,TSP-1ELISA试剂盒小鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
cit瓜氨酸规格：96T/48T
Humanalkalinephosphatase，ALPELISAK
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
注意事项：
Tris-Maleate缓冲液(1mol/L,pH6.5-8.5)说明尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验相关实验
一. 实验原理SDS-PAGE是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂，可与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折叠结构，并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后，电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分子量。二. 试剂和器材试剂：1. 5x样品缓冲液（10ml）：0.6ml 1mol/L的Tris-HCl（pH6
HCI调pH 值至8.7，定容至100ml 。( 6)浓缩胶缓冲液（0.5mol/L Tris-Hcl，pH6.8）Tris 6.06g ，适量水溶解，然后用1mol/L HCI 调pH值至6.8，定容至l00ml。( 7 ) 10%SDS SDS1g，加水10ml溶解。( 8 ) 10%过硫酸铵 1g过硫酸铵，加水10ml溶解，现用现配，冰箱中最多可贮存一周。( 9 ) TEMED（四甲基乙二胺）4℃，棕色瓶中贮存。( 10)样品缓冲液（pH8.0）Tris 6.05g，甘油50ml，巯基乙醇25
Tris-HCl缓冲液，最后加重蒸水至1000ml，充分摇匀使Tris终浓度为0.05mol/L。 TBS主要用于漂洗标本，常用于免疫酶技术中。 6、Tris-TBS（PBS） 试剂： Triton X-100 10ml（1%）或3ml（0.3%） 0.5mol/L Tris缓冲液（pH7.6） 1000ml（50
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