MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒哪家好

中文名称：MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒哪家好
英文名称：MTT cell proliferation and Cytotoxicity Detection Kit产品规格500T|1000T
产品规格：发货周期1～3天
发货周期：1～3天
操作方法1.在96孔板加入细胞100μL/孔（约1×104），置37℃5%CO2细胞培养箱培养24小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96孔板在37℃，含5%CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。4.将5×MTT用DilutionBuffer稀释成1×MTT。5.每孔加50μL1×MTT，在37℃孵育4小时，使MTT还原为甲臜。6.吸出上清液，每孔加150μLDMSO使甲月赞溶解，用平板摇床摇匀。7.酶标仪在550nm波长处检测每孔的光密度（如无570nm波长，于490nm波长处检测亦可）。
结果分析
1.细胞的存活率将各测试孔的OD值减去本底OD值（完全培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD值（完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。细胞存活率%=（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
2.求出T/C=50%时的药物浓度(IC50)及T/C=10%时的药物浓度(IC90)。
实验报告：
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
以下是公司正在热销产品：
 2-(1H-吡唑-4-基)醇聚（1，4-二醇二酸）酯/二酸二醇聚酯/二酸-1,4-二醇聚酯/聚-1,4-二醇二酸酯/BDS/LAC-6R-860/HI-EFF-4B
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 2-溴-4-基-6-氟吡啶三油酸甘油酯/甘油三油酸醋/(Z)-9-十八烯酸-1,2,3-三基酯/三油精/三苯基化四唑/油酸三甘酯/三醇三甘油酸酯/油精/Glycerol trioleate
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 6-溴-2-酮三酸甘油酯/甘油三酸酯/三醋酯/三醋酸甘油酯/三醇三酸酯/醋酸甘油酯/三醋精/Glyceryl triacetate
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 4-羟基吖啶顺烯二酸二酯/马来酸二酯/Dimethyl maleate
 5-硝基-1H-吡唑-3-羧酸酯二酸二酯/琥珀酸二酯/琥珀酸酯/Diethyl succinate
 虫腈癸二酸二酯/皮脂酸酯/Diethyl sebacate
 (6-苄基-6H-[3,4-B]吡啶-5,7-二酮)邻苯二酸二酯/邻酞酸二酯/苯二酸二酯/酞酸二酯/DEP
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒哪家好Tin锡棒25克CP，
Tin锡5盒3N，0.2㎜
TIM糖磷异构酶100克超，99%
Ticarcillin disodium salt 羧青霉素100毫克BR，85%
TIBA2,3,5-三代5克CP，99%
Thymolphthalein百里香酞1750kuBR，80%
Thymol Blue sodium salt百里香蓝100毫克电子级，
Thymol blue百里香蓝50毫升CP，99%
Thymol百里香30毫升BR，95%
Thymine胸25UUSP级，
Thulium oxide铥500克BR，
Thrombin凝血活素5毫克BR，30u/mg
Thiourea代尿素500克BR，99%
Thiophanate-methyl1,2-二-(3-羰基-2-脲基)250毫克高，
Thionin劳氏青莲5克FMP，60%
注意事项：
      尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。