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- 2025年07月13日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
46
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ml
英文名称：Antigen Retrieval Buffer (50×EDTA Buffer, pH 8.0)
产品规格：100ml
发货周期：1～3天
免疫染色实验，细胞或组织往往需要经多醛、甲醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构，然而此步操作通常会封闭抗原决定簇，使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应，从而引起染色信号衰减，甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于：1）醛类固定剂导致组织上的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键，从而封闭抗原表位；2）醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联
注意事项：
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测，反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质，在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水（1:9）稀释至 1×备用。
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
公司优势：
1.EDTA抗原修复液(50×)说明具有多年的销售经验和资深的行业背景，我司秉承质量优先的理念，重视自主创新，希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系；
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，英文名或英文缩写：Thiourea，级别：BR，99%，规格：500克
325L异亮酸;;;Lα基β甲基酸LIsoleucine;L2AMino3metxylpentanoic acid;L2AMino3metxylvaleric acid
BASICFUCHSIN,CERTIFIED碱性品红生物染料级25G6329RT
2全 ; 9833
轻氧化 McgnqsiuM xy7noxidq (cS);Mcrinco H 09
GENTLEREVIEWSTRIPPINGBUFFER温和剥离缓冲液1LCOLD
(聚乙二醇8000)
N水杨酰本，英文名或英文缩写：Salicylanilide，级别：高，98%，规格：500毫克
聚二流二炳烷磺醋内 Bis(wo7ium sulfopropyl)disulfidq 706322
无水录化钙，英文名或英文缩写：Calcium chloride anxy7nous，级别：CP，98%，规格：1克
葡聚糖T200500u保存：20℃
59钛酸四异Titanium tetraisopropanolate
甜菜碱盐酸盐25克RT
4基4'基 4′Pentyl4biphenylcarbonitrile,98% 408081 250MG 通用试剂
甲基环醇酮/3甲基1,2二酮/3甲基1,2环二酮/3Methyl1,2cyclopentanedione BR，98% 25克 国产/进口
人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠组胺(HIS)免疫试剂盒 Mouse Histamine,HIS ELISA Kit
猪圆环病毒通用型(PCV-Ⅰ)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
Humanphosphoglyceratemase2,PGAM2ELISA试剂盒人0酸甘油酸变位酶2(PGAM2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
ELISAKitLIFR猪白血病抑制因子受体规格：48T/96T
HumanDehydroepiandros
EDTA抗原修复液(50×)说明鸡孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人载脂蛋白C1(APO-C1)免疫试剂盒 Human Apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit
类白细胞抗原A(HLA-A)ELISA试剂盒 ，英文名： HLA-A ELISA Kit
RatCollageypeⅢ,ColⅢELISA试剂盒大鼠Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
HumanCyclinDependeKinase5,CDK5ELISA试剂盒人周期素依赖性激酶5(C
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文献和实验），请先用样品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（ ×n ×5 ）。 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6． 底物请避光保存。 7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准 . 8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9． 本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
topicare 做细胞信号转导实验，研究了一个抑制剂的说明书（ICI182780），说明书中提供了一个IC50值，在某些已经报道的文献中使用的浓度跟说明书提供的IC50值相差甚多。 =============================== 请问各位站友：1.说明书提供的IC50值有何参考意义？2.如果要得到自己的IC50值，是不是参考说明书提供的IC50值并在其附近设置多个不同梯度的浓度？
酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate ） 12ml 10 ×标本稀释液（Sample Buffer ） 12ml 20×浓缩洗涤液（ Wash Buffer ） 50
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