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Hifair® V nCov多重定量PCR反应RT-qPCR

试剂盒
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  • ¥915 - 90155
  • 翌圣生物(Yeasen)已认证
  • 13110ES
  • 上海翌圣
  • 2025年10月15日
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    • 英文名

      Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

    • 保质期

      有效期1年

    • 供应商

      翌圣生物科技(上海)股份有限公司

    • 保存条件

      冰袋运输。-20℃保存,推荐分装冻存,避免反复冻融。

    • 规格

      100T(13110ES60)/1000T(13110ES80)/10000T(13110ES93)/50T(13110ES50)/10000 T(13110ES92)

    规格:100T(13110ES60)产品价格:¥1575.0
    规格:1000T(13110ES80)产品价格:¥9725.0
    规格:10000T(13110ES93)产品价格:¥90155.0
    规格:50T(13110ES50)产品价格:¥915.0
    规格:10000 T(13110ES92)产品价格:¥90155.0
    Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。
    本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA,并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP BufferEnzymes Mix等,缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等,并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,能够保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。

    产品组分
    产品细节图片1
    组分编号组分名称产品编号/规格
      13110ES60 (100 T)13110ES80 (1000 T)13110ES92 (10000 T)
    13110-A2×Hifair® V MP Buffera,b1.2 mL12 mL 120 mL
    13110-BHifair® V Enzyme Mixc100 μL1 mL5 mL×2
    13110-CRNase Free H2O1.2 mL12 mL120 mL
    【注】a) 2×Hifair® V MP Buffer为Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的简写。
    b) 不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。
    c) Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。

    适用机型
    ABI系列:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus; 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;
    Bio-Rad系列:Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
    Roche系列:Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
    其他系列:Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;
    Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
    Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
    Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.

    运输与保存方式
    冰袋运输。-20保存,有效期2年。本品避免反复冻融。建议分装保存。

    注意事项
    1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
    2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。


    反应体系
    组分体积(μL体积(μL终浓度
    2×Hifair® V MP Buffer1215
    Hifair® V Enzyme Mix11.5-
    Primer/Probe Mix (10 μM)1-41-40.4 μM
    模板 RNA1-51-10-
    RNase Free H2OTo 25To 30 -
    】:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。
    1. 引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.4 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM间进行调整。
    2. 探针浓度:Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。
    c) 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在20-35之间适宜。
    d) 反应体系:推荐使用25 μL、30 μL50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
    e) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。

    标准扩增程序
     反应阶段温度时间循环数
    1逆转录50℃a10 min1
    2预变性95℃5 min1
    3扩增反应95℃15 sec45
    60℃b30 secc
    【注】                                                                                             
    1. 逆转录:42℃或者50℃均可,时间10-15 min。
    2. 扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整CDC官方推荐的ORF1ab和N引物,退火温度建议≥60℃。
    c) 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。


     

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