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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit
- 保质期:
有效期1年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
冰袋运输。-20℃保存,推荐分装冻存,避免反复冻融。
- 规格:
100T(13110ES60)/1000T(13110ES80)/10000T(13110ES93)/50T(13110ES50)/10000 T(13110ES92)
| 规格: | 100T(13110ES60) | 产品价格: | ¥1575.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1000T(13110ES80) | 产品价格: | ¥9725.0 |
| 规格: | 10000T(13110ES93) | 产品价格: | ¥90155.0 |
| 规格: | 50T(13110ES50) | 产品价格: | ¥915.0 |
| 规格: | 10000 T(13110ES92) | 产品价格: | ¥90155.0 |
本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA,并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer,Enzymes Mix等,缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等,并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,能够保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | ||
| 13110ES60 (100 T) | 13110ES80 (1000 T) | 13110ES92 (10000 T) | ||
| 13110-A | 2×Hifair® V MP Buffera,b | 1.2 mL | 12 mL | 120 mL |
| 13110-B | Hifair® V Enzyme Mixc | 100 μL | 1 mL | 5 mL×2 |
| 13110-C | RNase Free H2O | 1.2 mL | 12 mL | 120 mL |
b) 不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。
c) Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
适用机型
ABI系列:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus; 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;
Bio-Rad系列:Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Roche系列:Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
其他系列:Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;
Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存,有效期2年。本品避免反复冻融。建议分装保存。
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
反应体系
| 组分 | 体积(μL) | 体积(μL) | 终浓度 | |
| 2×Hifair® V MP Buffer | 12 | 15 | 1× | |
| Hifair® V Enzyme Mix | 1 | 1.5 | - | |
| Primer/Probe Mix (10 μM) | 1-4 | 1-4 | 0.4 μM | |
| 模板 RNA | 1-5 | 1-10 | - | |
| RNase Free H2O | To 25 | To 30 | - | |
- 引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.4 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM间进行调整。
- 探针浓度:Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。
d) 反应体系:推荐使用25 μL、30 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
e) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
标准扩增程序
| 反应阶段 | 温度 | 时间 | 循环数 | |
| 1 | 逆转录 | 50℃a | 10 min | 1 |
| 2 | 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 3 | 扩增反应 | 95℃ | 15 sec | 45 |
| 60℃b | 30 secc |
- 逆转录:42℃或者50℃均可,时间10-15 min。
- 扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。CDC官方推荐的ORF1ab和N引物,退火温度建议≥60℃。
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