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- 2025年07月15日
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55
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ml
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称：GE Ficoll-Paque PLUS淋巴细胞分离液规格
英文名称：
产品规格：100ml
发货周期：1～3天
Ficoll-Paque PLUS是经验证可在实验室广泛应用的人淋巴细胞分离液，分离人淋巴细胞用于体外研究。Ficoll-Paque PLUS是一种即开可用的无菌分离液，优化的分离液密度可从周围血液中获得高产率的淋巴细胞，并可以维持B淋巴细胞和T淋巴细胞的生长和分布。低水平内毒素含量(<0.12 EU/ml)。Ficoll-Paque PLUS培养基包含聚蔗糖(Ficoll PM400, 5.7g)，二乙酰氨基三碘苯甲酸钠(9.0g)和乙底酸钙二钠。
注意事项：
GE Ficoll-Paque PLUS淋巴细胞分离液规格尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
炭疽杆菌沉淀血清shēng huà shì jì容量：1米
三烷;仿 TribroMoMqthcnq;ForMyl tribroMidq;Mqthqnyl tribroMidq 2
3Hydrazinobenzoic acid xy7nochloride 2351
(R)()5羟甲基2... (R)()5(Hydroxymethyl)2pyrrolidin... 663 1G 通用试剂
偏硼酸/Lithium metaborate octahydrate CP，99% 100克 国产/进口
锑(V)酸钾，英文名或英文缩写：potewwium pyroantimonate，级别：AR，98%，规格：500克
5206脱氢;6甲基3乙酰2哌哢酮;6甲基3乙酰α,γ酮Dexy7noacetic acid;DHA;2Acetyl5xy7noxy3oxo4hexenoic acid δlactone;metxylacetopyronone
乙酰二甲，英文名或英文缩写：NBS，级别：BR，规格：5克
4苯 4Bromophenylitrile,98% 5329 25G 通用试剂
芴甲氧羰酰琥珀 FmocOSu 821 5G 通用试剂
LTHREONINEL苏酸美国药典级100G1RT
3三扶铜COPPER(II) TRIFLUOROmetxANESULFONATE
3metxyl1,2cyclopentanedione3甲基1,2二酮100克AR，98%
4基3基5巯... 4Amino3hydrazino5mercapto1,2,4t... 505 5G 通用试剂
丽春红S/猩红S/酸性红/3羟基磺酸基4(4磺酸苯基偶氮)苯基偶氮2,7二磺酸四钠盐/Ponceau S 高 5克 国产/进口
MSTO-211H(人肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
NAMALWA(人Butt's淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
NCI-H1299(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
NCI-H1650(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
GE Ficoll-Paque PLUS淋巴细胞分离液规格HL-60, 人早幼粒白血病细胞 Human
猕猴肌肉细胞;MMm7
CD1B & B2M Others Human 人 CD1B & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠肝癌细胞;CBRH-7919 [CBRH7919] 小细胞肺癌细胞，NCI-H446[H446]细胞 RenCa细胞，小鼠肾癌细胞
大鼠背脊髓神经元RN-dsc
EPHA7 Others Human 人 EPHA7 / EHK3 人细胞裂解液 (阳性对照)
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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文献和实验GE推出首个符合GMP制备单核细胞培养基Ficoll-Paque™ PREMIUM
相关专题 细胞培养基的配制 GE医疗集团于10月17号推出Ficoll-Paque™ PREMIUM产品。Ficoll-Paque是已经有30年历史的，用于从血液和骨髓中制备人类单核细胞 的产品。Ficoll-Paque PREMIUM比起它之前的Ficoll-Paque PLUS除了证明有同样可信的结果外，还采用了ISO质量系统和消毒生产标准。 之前的Ficoll-Paque PLUS作为一种消毒后的培养基在利用骨髓
问：FICOLL离心后分界面不清楚一般是什么原因？答：原因有很多种：1、FICOLL没有室温平衡；2、血液稀释时没有充分混匀；3、加血的时候就分层不清；4、血液抗凝不充分，细胞成块，建议采好血后室温放置半小时~1小时期间不时的混匀；5、个体差异，同一种实验条件，不同来源血可能情况不一；6、离心速度过小以致尚未完全分层，或离心期间速度不稳定；7、降速太快，降速时间应5min以上。答：1、比例要恰当：稀释后的血液：淋巴细胞分离液为1：1。2、血液平铺到淋巴细胞分离液上是否分层清晰？3、离心机不能
刺激。 在正常人中，只有非常小的一部分初始 T 细胞会因抗原识别而被激活。同样的 B 细胞也都处于初始状态。相对于淋巴细胞，单核细胞的比例在 10 - 30%，收到刺激之后会发育成树突状细胞 (DC) 或巨噬细胞。干细胞的比例非常低，只有 0.1 - 0.2%，因此很难从全血样本中分离到。 一、外周血单个核细胞（PBMC）制备方法 1. 设备与试剂 全血（以 10 ml 为例） 无菌 PBS 溶液 (pH7.4) 或者生理盐水 蔗糖溶液（Ficoll Pague PLUS) (GE
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