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34
- 英文名:
Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
1、Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)哪家好
英文名称:Cu/Zn-SOD and Mn-SOD Assay Kit with WST-8
产品规格:100次
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天
本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应,通过比色来检测细胞、组织或其它样品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或总SOD活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
试剂盒组分:
SOD检测缓冲液———————70ml
WST-8———————————800μl
酶溶液———————————100μl
储存条件:-20℃,有效期6个月。
反应启动液(40X)——————60μl
Cu/Zn-SOD抑制剂A——————500μl
Cu/Zn-SOD抑制剂B——————500μl
储存条件:-20℃,有效期6个月。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Matrii sulfas exsiccatus玄明粉LAMP鉴定试剂盒 TPA英文名称RNF24内皮素3抗体
Radix scrophulariae玄参LAMP鉴定试剂盒 TBRG1英文名称RNF25酸化细胞外信号调节激酶5抗体
Sanguis draxonis血竭LAMP鉴定试剂盒 phospho-Tau protein(Ser416)英文名称RNF31酸化细胞外信号调节激酶5抗体HPLC≥99%抗胸腺细胞球蛋白检测试剂盒250mgGelsolin
Fructus bruceae鸦胆子LAMP鉴定试剂盒 HPLC≥95%抗信号识别颗粒54kDa蛋白检测试剂盒20mgTM
Herba commelinae鸭跖草LAMP鉴定试剂盒 HPLC≥98%抗心脂抗体IgM检测试剂盒20mgTAT
Siduron规格:分析标准品HPLC≥98%抗心脂抗体IgG检测试剂盒10mgPT
S-HydroxyTopiramate规格:美国进口HPLC≥98%抗心脂抗体IgA检测试剂盒20mgF1+2
Shikonin规格:HPLC≥98%,标准品HPLC≥98%抗心肌抗体检测试剂盒10mgPIVKA-II
Shikimicacid规格:≥98%,BRHPLC≥98%抗心肌β1受体检测试剂盒10mgF248T/96TELISAKitforDefensinAlpha6,PanethCellSpecific(DEFa6)种保存培养
Shikimicacid规格:HPLC≥98%,标准品48T/96TELISAKitforFibrinopeptideB(FPB)糖蛋白胨培养液
Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)哪家好IFN-γR1-CDw119射干苷
H-ras四氢小檗
HLA-DR4吲哚醇
HLA-DPB1盐酸益母草
HLA-DPA1酸
HLA-DQA13-异倒捻子素
Immunodeficiency Virus Type 1 p24香紫苏内酯
G Protein Coupled Receptor 32柠檬酸
Angiogenic Factor With G Patch And FHA Domains 1沙蟾毒精
FMS-like tyrosine kinase 3桑皮苷C
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文献和实验动物血中超氧化物歧化酶的提取和活性测定 [原理] 超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase,简称 SOD)广泛存在于生物体内的含Cu、Zn、Mn、Fe的金属类酶。它作为生物体内重要的自由基清除剂,可以清除体内多余的超氧阴离子,在防御生物体氧化损伤方面起着重要作用。离子(0 2 - )是人体氧代谢产物,它在体内过量积累会引起炎症
探针分为2种,一种是光泽精,另一种是荧光素衍生物(MCLA)。这种化学发光反应对pH有高度的依赖性。例如,光泽精只有在pH 9.0或者更高处会发出强烈的化学光。因此,在生理的pH条件下用这种方法检测SOD是不可行的。另一方面,MCLA在生理条件下能够发出较强的化学荧光,因此可以用于人脑的Cu,Zn-SOD活性的检测。但是,MCLA不适合用作SOD检测的探针,因为它不单单和O2-反应,还会和单质氧反应。而且MCLA与溶解氧反应后会发出化学光,转移的金属离子还会加速氧化反应。 3.电子
9.0或者更高处会发出强烈的化学光。因此,在生理的pH条件下用这种方法检测SOD是不可行的。另一方面,MCLA在生理条件下能够发出较强的化学荧光,因此可以用于人脑的Cu,Zn-SOD活性的检测。但是,MCLA不适合用作SOD检测的探针,因为它不单单和O2-反应,还会和单质氧反应。而且MCLA与溶解氧反应后会发出化学光,转移的金属离子还会加速氧化反应。 3.电子自旋共振(ESR)光谱法 在室温下,溶液中O2-的ESR信号不能直接被检测出,但能够通过自旋捕捉法间接获得。最常见的诱捕剂
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