发酵/纯化工艺开发优化及确认等

施一公团队突破性进展再登 Science！以超高分辨率解析核孔复合物的结构细节

点。 在过去二十年中，结构生物学家们将单个核孔蛋白和亚复合体的 X 射线结构与低温电子断层成像重建相结合的综合建模，逐步地增进了人们对 NPC 的了解。 本研究利用单粒子冷冻电子显微镜（cryo-EM）对非洲爪蟾卵母细胞中的 NPC 结构进行探索，结合以往的研究结果，加强了蛋白样品制备，优化冷冻电镜图片的采集，并开发出有效的数据处理策略，获得高分辨率的 NPC 结构。 该结构的核心和 Nup358 区域的平均分辨率分别提高到 3.7Å和 4.7Å，其中核心区域的最高局部分辨率达到 3.3Å

【原创】蛋白质纯化武器—工艺篇（欢迎补充）

相关，那就是单位体积的菌体量。两者的乘积才是单位体积发酵液的目标蛋白产率。 与表达量相关的指标还有纯化倍数、纯化收率等，这些指标我们也常常在发表的文章中看到。同样，我也认为都是不准确的。除非你用的是活性测定的方法，用蛋白活性收率来表征。 纯化工艺的难易有时候也与表达量相关，表达量高时往往纯化也方便的多。所以，尽量提高你的目标蛋白表达量不只是基因工程上游和产量的问题，还是纯化工艺开发的问题。 四、菌体破碎 （1）破菌前处理 诱导表达的菌体在发酵离心后，最好先用PBS缓冲液或其它缓冲液立即

蛋白质纯化武器—工艺篇

定量，只能定性。如用：很低、较低、中等、较高、很高等来描述。 有一个指标与表达量密切相关，那就是单位体积的菌体量。两者的乘积才是单位体积发酵液的目标蛋白产率。 与表达量相关的指标还有纯化倍数、纯化收率等，这些指标我们也常常在发表的文章中看到。同样，我也认为都是不准确的。除非你用的是活性测定的方法，用蛋白活性收率来表征。 纯化工艺的难易有时候也与表达量相关，表达量高时往往纯化也方便的多。所以，尽量提高你的目标蛋白表达量不只是基因工程上游和产量的问题，还是纯化工艺开发的问题。四、菌体