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- 中国
- XK0145
- 2025年07月12日
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- 文献和实验
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2-8℃
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2年
- 英文名：
无
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100
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 规格：
1g
- 产品简介：
DTT即DL-Dithiothreitol，中文名称为二硫苏糖醇，也称作Cleland’s Reagent，是一种强效的还原剂，将-SH基保持在还原态，常用以还原蛋白和多肽中的二硫键，或更普遍用以防止蛋白半胱氨酸残基形成分子内和分子间的二硫键。DTT还具有抗氧化作用，对一些隐藏的二硫键（溶剂无法渗透发挥作用），DTT可借助变性条件下来还原二硫键，如高温或钠离子变性剂，如6 M盐酸胍，8 M尿素，或1% SDS。 - DTT粉末的稳定性很高，但是储存液/工作液必须现配现用，多余液体需丢弃。
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文献和实验相关专题 蛋白纯化技术专题 DTT( 二硫苏糖醇)是实验室常用的还原试剂，常被用于蛋白质保存以及蛋白二硫键的还原。DTT的入特点是极易被氧化，稳定性较差，一般DTT常保存于-20度中可以长达数年。 DTT是一种很强的还原剂，其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。 DTT特点与DDT的保存 DTT是一种常用还原剂，有抗氧化作用，进口
，一组使用 NaHS 处理，一组则不作处理；然后用荧光马来酰亚胺染料 Alexa Fluor 488 C5 maleimide（下文简称MAL，Invitrogen，A10254）标记半胱氨酸上的硫醇基团，使正常的半胱氨酸通过 -S- 与 MAL 连接，而硫巯基化的半胱氨酸通过二硫键 -S-S- 与 MAL 连接，如下图： 图 1. 文献 Fig. 6G，硫巯基化分析步骤 接下来加入 DTT，硫巯基化蛋白上特有的二硫键就会被解开，导致荧光 MAL 分子脱落，荧光信号减弱。所以，荧光信号发生变化就验证
个细胞。考虑到我们后续还要对酶切用量进行优化，实际准备了足量细胞（每组约 1.5×107 个细胞）。在我们实验前，我们仔细观察了细胞的状态和密度，细胞状态很健康，贴壁良好，也达到了 80% 左右的汇合率，一切都符合 ChIP 实验的要求。拿出试剂盒，我们首先对各种标配试剂置于冰浴中进行了标记。由于试剂盒标配的 DTT 为干粉，因此我们需要配制 1M DTT 溶液（具体地，192.8 mg DTT#7016 加 1.12 ml dH2O，确保 DTT 完全溶解）。然后，我们取出并室温预热 200
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