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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
Folium perillae
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针(染料法只需设计引物)
2、抽提DNA、RNA,并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品(引物、RNA和cDNA)
| 产品名称 | 紫苏叶LAMP鉴定试剂盒说明书 |
| 英文名称 | Folium perillae |
| 货号 | BHP21089 |
特点优势:
特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
吲哚布芬(标准品) Indobufen 质量规格:含量测定 英文名称RatFIXELISAKit大鼠凝血因子IX(FIX)规格:96T/48T
盐酸曲普利啶(标准品) Triprolidine hydrochloride 质量规格:含量测定 活体细胞氧化应激活性氧(ROS)原位比色法定量检测试剂盒(超氧阴离子)100
米力农(标准品) Milrinone 质量规格:>98%,标准品 ELISAKitBV人细菌规格:48T/96T
壬二酸(标准品) Azelaic acid 质量规格:检查 小鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒 ,英文名: TG ELISA Kit
培哚普利杂质S9780(培哚普利拉)(标准品) Perindoprilat 质量规格:供HPLC法系统适用性试验用 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA检测试剂盒RatAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 96T/48T
山梨酸钾(标准品) Potassium Sorbate 质量规格:含量测定 人白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)试剂盒 Human IL-2sRβ ELISA Kit
甲磺酸倍他司汀(标准品) Betahistine mesylate 质量规格:含量测定 英文名称FREEPSA游离前列腺特异性抗原(FREEPSA)规格:96T/48T
葡醛内酯(标准品) Glucurolactone 质量规格:检查 PARP蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
反铂 transplatin 质量规格:>95% Porcineplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISA试剂盒猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
草酸(标准品) Oxalic acid 质量规格:含量测定 小鼠甘油-3-0酸脱氢酶(GAPDH/G3PDH)ELISA试剂盒 ,英文名: GAPDH/G3PDH ELISA Kit
N-氧基帕洛诺司琼 Palonosetron N-Oxide 质量规格:美国进口 英文名称HumanVascuolarcelladhesionmolecule1ELISAkit人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)ELISAkit规格:96T/48T
帕珠沙星 Pazufloxacin 质量规格:美国进口 英文名称HumanVasoactiveIestinalPeptide(VIP)人血管活性肠肽(VIP)规格:96T/48T
培美曲塞二钠 Pemetrexed Disodium 质量规格:美国进口 英文名称HumanVIII-AgELISAKit人凝血因子VIII相关抗原(VIII-Ag)规格:96T/48T
培美曲塞二钠-d5 Pemetrexed-d5 Disodium Salt 质量规格:美国进口 英文名称HumanVitaminB6ELISAKit人维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格:96T/48T
培美曲塞-15N,13C5 Pemetrexed - Labeled 15N,13C5 质量规格:美国进口 英文名称HumanVitaminCELISAKit人维生素C(VC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
磺胺噻唑钠盐 Sulfathiazole sodium salt 质量规格:美国进口 英文名称HumanVitaminDReceptorELISAKit人维生素D受体(VDReceptor)规格:96T/48T
匹格列酮-d4 Pioglitazone-d4 质量规格:美国进口 英文名称HumanVWFELISAKit人血管性血友病因子(VWF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
羟基匹格列酮(M-Ⅶ) Hydroxy Pioglitazone (M-VII) 质量规格:美国进口 英文名称Humanα1-AcidglycoproteinELISAKit人α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)规格:96T/48T
5-去乙基5-羧基匹格列酮 5-Desethyl 5-Carboxy Pioglitazone 质量规格:美国进口 英文名称Humanα-L-fucosidaseausefulELISAKit人α-L-岩藻糖苷酶(AFU)规格:96T/48T
酮基匹格列酮(M-Ⅲ) Keto Pioglitazone (M-III) 质量规格:美国进口 英文名称Humanβ2-GP1Ig(A,G,M)ELISAKit人β2糖蛋白1抗体Ig(A,G,M)(β2-GP1)规格:96T/48T
紫苏叶LAMP鉴定试剂盒说明书英文名称HumansVCAM-1人可溶性血管细胞粘附分子(sVCAM-1)规格:96T/48T 6α,3'-对二羟基紫杉醇 6α,3'-p-Dihydroxy Paclitaxel 质量规格:美国进口
英文名称Human-T人肌钙蛋白-T(Tn-T)规格:96T/48T 7-差向 10-去乙酰基紫衫醇 7-Epi 10-Desacetyl Paclitaxel 质量规格:美国进口
英文名称HumanVascularEndothelialcellGrowthFactor人血管内皮细胞生长因子(VEGF)规格:96T/48T (S,S)-帕洛诺司琼盐酸盐-d4 (S,S)-Palonosetron Hydrochloride Labeled d4 质量规格:美国进口
英文名称HumanVascuolarcelladhesionmolecule1人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)规格:96T/48T N-氧基帕洛诺司琼 Palonosetron N-Oxide 质量规格:美国进口
英文名称HumanVasoactiveIestinalPeptide(VIP)人血管活性肠肽(VIP)规格:96T/48T 帕珠沙星 Pazufloxacin 质量规格:美国进口
英文名称HumanVIII-Ag人凝血因子VIII相关抗原(VIII-Ag)规格:96T/48T 培美曲塞二钠 Pemetrexed Disodium 质量规格:美国进口
英文名称HumanVitaminB6人维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格:96T/48T 培美曲塞二钠-d5 Pemetrexed-d5 Disodium Salt 质量规格:美国进口
英文名称HumanVitaminC人维生素C(VC)ELISA试剂盒规格:96T/48T 培美曲塞-15N,13C5 Pemetrexed - Labeled 15N,13C5 质量规格:美国进口
英文名称HumanVitaminDReceptor人维生素D受体(VDReceptor)规格:96T/48T 磺胺噻唑钠盐 Sulfathiazole sodium salt 质量规格:美国进口
英文名称HumanVWF人血管性血友病因子(VWF)ELISA试剂盒规格:96T/48T 匹格列酮-d4 Pioglitazone-d4 质量规格:美国进口
操作流程:
1. 紫苏叶LAMP鉴定试剂盒说明书整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃
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文献和实验长度可达 20kb,适合于各种 GC 含量的扩增,可用于多种样本的直接 PCR 如植物叶片、全血等。且扩增仅需 30s/kb,甚至于 2kb/s。如此卓越,爱不释手了吧? 4. 选择直接扩增试剂盒对粗品扩增 vazyme 生产的各种直扩试剂盒,直接对粗品进行扩增,大大减少了实验的工作周期。如小鼠基因型鉴定可以直接使用 One Step Mouse Genotyping Kit,全血扩增可以直接使用 Blood Direct PCR Kit V2。
诊断中是不需要特殊仪器的,但临床使用的成品试剂盒有赖于和国内拥有毒株的老师合作开发针对中国国情的疾病LAMP引物,在研发过程中由于涉及引物的选择,引物浓度的调整,及反应温度和时间的优化,需要用一种量化的方式去帮助研究者分析选择数据,因此我们推荐用荣研公司的专利产品LA-320C实时基因扩增仪。 3. 操作的便捷性 LAMP方法较其他基因诊断方法,其最大的优势就在于操作的简便性及对仪器设备和人员要求低。LAMP操作步骤少,只需按照说明书要求将反应液、酶、引物和模板按照规定的量加入PCR
按照TaKaRa的说明书,我用了Cool Start法,就是所有操作和试剂都是放在冰上进行的,据说能够减少非特异性。我当时担心目的基因量不够,所以P了两管,分到四个孔跑胶回收的。胶回收用的是OMEGA的试剂盒。 切胶回收之后测得目的片段浓度大概为20 ng/ul。按照TaKaRa的pMD18T说明书的要求,pMD18T需要加入1 ul,而目的片段需要0.1 pmol-0.3 pmol,换算一下,需要的目的片段的量大概为0.1*1800*325=58500 pg=58.5 ng到0.3*1800
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