茜草探针法PCR鉴定试剂盒说明书

PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
产品名称：茜草探针法PCR鉴定试剂盒说明书
英文名称：Radix rubiae
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
石墨粉(>99%,BR)  Graphite powder  质量规格：>99%,BR Human3-Niotyrosine,3-ELISA试剂盒人3-硝基酪氨酸(3-)ELISA试剂盒规格：96T/48T
己二醇(>98%，BR)  Hexylene glycol  质量规格：>98%，BR 真菌/酵母总巯基含量比色法定量检测试剂盒20
六甲基磷酰三胺(>98%,BR)  HMPA, hexamethylphosphoramide  质量规格：>98%,BR Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T
还原茚三酮二水合物(>98%,BR)  Hydrindantin hydrate  质量规格：>98%,BR 小鼠脑源性神经生长因子(BDNF)ELISA试剂盒 ，英文名： BDNF ELISA Kit
中粘度羟丙基纤维素  Hydroxypropyl cellulose  质量规格：4000~6500 mpa.s,BR 大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA检测试剂盒RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit 96T/48T
3-吲哚基-beta-D-吡喃半乳糖苷(>98%(TLC),BR)  Indoxyl-Gal  质量规格：>98%(TLC),BR 人鹅膏蕈碱试剂盒 Human Amanitin ELISA Kit
3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸环已胺盐(>98%(HPLC),BR)  Indoxyl-Glucuronide  质量规格：>98%(HPLC),BR Ratmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
代苯(>98%,医药级)  Iodobenzene  质量规格：>98%,医药级 DMDC处理试剂盒100
硫化铁 (II)(>70%,BR)  Iron (II) sulfide  质量规格：>70%,BR MousePerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISA试剂盒小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
四氧化三铁(>98%,BR)  Iron (II,III ) oxide  质量规格：>98%,BR 小鼠脑型肌酸激酶(CKB)ELISA试剂盒 ，英文名： CKB ELISA Kit
茜草探针法PCR鉴定试剂盒说明书克螨特标准溶液(1.00mg/ml)  Propargite solution  质量规格：1.00mg/ml 人αL岩藻糖苷酶(AFU)试剂盒 Human alpha-L-fucosidase,AFU ELISA Kit
三氯杀虫酯标准溶液(10μg/ml,u=2%)  Plifenat solution  质量规格：10μg/ml,u=2% 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA检测试剂盒HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit 96T/48T
三氯杀虫酯标准溶液(100μg/ml,u=2%)  Plifenat solution  质量规格：100μg/ml,u=2% 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)试剂盒 Human αN-acetylglucosaminidase,αNAG ELISA Kit
霜霉威(分析标准品,99%)  Propamocarb  质量规格：分析标准品,99% 人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA检测试剂盒Humanα-galactosidase,αGALELISAKit 96T/48T
解毒喹(标准品)  Cloquintocet-mexyl  质量规格：分析标准品 人α半乳糖苷酶(αGAL)试剂盒 Human α-galactosidase,αGAL ELISA Kit
绿麦隆标准溶液(100μg/ml,u=4%)  Chlortoluron solution  质量规格：100μg/ml,u=4% 人α半乳糖基(α-Gal)试剂盒 Human α-galactoyl,α-Gal ELISA Kit
敌草隆(99%)  Diuron  质量规格：0.99 人α半乳糖基抗体(Gal)ELISA检测试剂盒Humanα-galactoyl,GalELISAKit 96T/48T
四螨嗪(分析标准品,98.6%)  Clofentezine  质量规格：分析标准品,98.6% 人α淀粉酶(AMY1)试剂盒 Human alpha-amylase,AMY1 ELISA Kit
非草隆(标准品)  Fenuron  质量规格：分析标准品 人α-防御素4(NP-4)试剂盒 Human NP-4 ELISA Kit
丁(B9)(标准品)  Daminozide  质量规格：分析标准品 人α-辅肌动蛋白1(ACTN-1)试剂盒 Human ACTN-1 ELISA Kit
人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)试剂盒 Human α-L-iduronidase,IDUA ELISA Kit 伏杀硫磷(标准品)  Phosalone  质量规格：分析标准品
人αL岩藻糖苷酶(AFU)试剂盒 Human alpha-L-fucosidase,AFU ELISA Kit 克螨特标准溶液(1.00mg/ml)  Propargite solution  质量规格：1.00mg/ml
人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA检测试剂盒HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAG 96T/48T 三氯杀虫酯标准溶液(10μg/ml,u=2%)  Plifenat solution  质量规格：10μg/ml,u=2%
人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)试剂盒 Human αN-acetylglucosaminidase,αNAG ELISA Kit 三氯杀虫酯标准溶液(100μg/ml,u=2%)  Plifenat solution  质量规格：100μg/ml,u=2%
人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA检测试剂盒Humanα-galactosidase,αGAL 96T/48T 霜霉威(分析标准品,99%)  Propamocarb  质量规格：分析标准品,99%
人α半乳糖苷酶(αGAL)试剂盒 Human α-galactosidase,αGAL ELISA Kit 解毒喹(标准品)  Cloquintocet-mexyl  质量规格：分析标准品
人α半乳糖基(α-Gal)试剂盒 Human α-galactoyl,α-Gal ELISA Kit 绿麦隆标准溶液(100μg/ml,u=4%)  Chlortoluron solution  质量规格：100μg/ml,u=4%
人α半乳糖基抗体(Gal)ELISA检测试剂盒Humanα-galactoyl,Gal 96T/48T 敌草隆(99%)  Diuron  质量规格：0.99
人α淀粉酶(AMY1)试剂盒 Human alpha-amylase,AMY1 ELISA Kit 四螨嗪(分析标准品,98.6%)  Clofentezine  质量规格：分析标准品,98.6%
人α-防御素4(NP-4)试剂盒 Human NP-4 ELISA Kit 非草隆(标准品)  Fenuron  质量规格：分析标准品
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。