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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
58
- 英文名：
Radix angelicae sinensis
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
服务流程：
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针（染料法只需设计引物）
2、抽提DNA、RNA，并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品（引物、RNA和cDNA）
特点优势：
特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
蜕皮激素 HPLC≥98% 20mg 小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒 ，英文名： HBsAg ELISA Kit
褪黑素 HPLC≥98% 20mg 小鼠细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA检测试剂盒Mouselymphotactin,Lptn/LTNELISAKit 96T/48T
脱甲氧基脱乙酰土荆皮乙酸 HPLC≥98% 20mg 人角化细胞生长因子(KGF)试剂盒 Human KGF ELISA Kit
脱氢雌马酚 HPLC≥98% 20mg Ratai-redcellaibodyELISAKit大鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
脱氢海粟碱 HPLC≥98% 5mg 组蛋白H3-K36(mono/di/i)甲基化检测试剂盒10/20等
脱氢紫堇碱 HPLC≥97.50% 20mg Mouseai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISA试剂盒小鼠抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
脱水长春碱 HPLC≥98% 20mg 小鼠乙型肝炎表面抗体(HBsAb)ELISA试剂盒 ，英文名： HBsAb ELISA Kit
脱水穿心莲内酯 HPLC≥98% 20mg 小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA检测试剂盒MousegranzymesA,Gzms-AELISAKit 96T/48T
脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯 HPLC≥99% 20mg 人角化细胞因子(KAF)/双调蛋白(AR)试剂盒 Human KAF/AR ELISA Kit
脱水淫羊藿素 HPLC≥99% 20mg RatAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
盐酸哌唑嗪 Prazosin HCl 质量规格：>99%,BR 大鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)试剂盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA KIT
醋酸泼尼松龙 Prednisolone acetate 质量规格：>97%,USP,BR 大鼠坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)试剂盒 Rat tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A/RANK ELISA kit
醋酸泼尼松 Prednisone Acetate 质量规格：>98%,BR 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体(AIL)试剂盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,AIL ELISA Kit
醋酸泼尼松（标准品） Prednisone Acetate 质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(AIL-R1)试剂盒 Rat AIL-R1 ELISA Kit
普瑞巴林 Pregabalin 质量规格：>99%,S构型 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(AIL-R3)试剂盒 Rat AIL R3 ELISA Kit
盐酸丙卡巴肼/盐酸甲基苄肼 Procarbazine HCl 质量规格：>98.5%,USP,BR,可用于细胞培养 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(AIL-R4)试剂盒 Rat AIL-R4 ELISA Kit
盐酸丙卡巴肼(标准品) Procarbazine HCl 质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠坏死因子诱导蛋白6(TSG-6)试剂盒 Rat tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein,TSG-6 elisa kit
盐酸丙卡特罗 Procaterol HCl 质量规格：>98.5%,CP2005,半水合物 大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit 96T/48T
丙泊酚 Propofol 质量规格：>98.0%,熔点18 大鼠环孢素A(CsA)ELISA检测试剂盒RatCyclosporineA,CsAELISAKit 96T/48T
盐酸雷洛昔芬 Raloxifene HCl 质量规格：>98.5%,BR 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA检测试剂盒RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit 96T/48T
当归染料法PCR鉴定试剂盒说明书大鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)试剂盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA KIT 吡喹酮（标准品） Praziquantel 质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)试剂盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA KIT 盐酸哌唑嗪 Prazosin HCl 质量规格：>99%,BR
大鼠坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)试剂盒 Rat tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A/RANK ELISA kit 醋酸泼尼松龙 Prednisolone acetate 质量规格：>97%,USP,BR
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体(AIL)试剂盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,AIL ELISA Kit 醋酸泼尼松 Prednisone Acetate 质量规格：>98%,BR
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(AIL-R1)试剂盒 Rat AIL-R1 ELISA Kit 醋酸泼尼松（标准品） Prednisone Acetate 质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(AIL-R3)试剂盒 Rat AIL R3 ELISA Kit 普瑞巴林 Pregabalin 质量规格：>99%,S构型
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(AIL-R4)试剂盒 Rat AIL-R4 ELISA Kit 盐酸丙卡巴肼/盐酸甲基苄肼 Procarbazine HCl 质量规格：>98.5%,USP,BR,可用于细胞培养
大鼠坏死因子诱导蛋白6(TSG-6)试剂盒 Rat tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein,TSG-6 elisa kit 盐酸丙卡巴肼(标准品) Procarbazine HCl 质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMP 96T/48T 盐酸丙卡特罗 Procaterol HCl 质量规格：>98.5%,CP2005,半水合物
大鼠环孢素A(CsA)ELISA检测试剂盒RatCyclosporineA,CsA 96T/48T 丙泊酚 Propofol 质量规格：>98.0%,熔点18
操作流程：
1. 当归染料法PCR鉴定试剂盒说明书整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针（染料法只需设计引物）
2、抽提DNA、RNA，并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品（引物、RNA和cDNA）
| 产品名称 | 当归染料法PCR鉴定试剂盒说明书 |
| 英文名称 | Radix angelicae sinensis |
| 货号 | BHP20253 |
特点优势：
特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
蜕皮激素 HPLC≥98% 20mg 小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒 ，英文名： HBsAg ELISA Kit
褪黑素 HPLC≥98% 20mg 小鼠细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA检测试剂盒Mouselymphotactin,Lptn/LTNELISAKit 96T/48T
脱甲氧基脱乙酰土荆皮乙酸 HPLC≥98% 20mg 人角化细胞生长因子(KGF)试剂盒 Human KGF ELISA Kit
脱氢雌马酚 HPLC≥98% 20mg Ratai-redcellaibodyELISAKit大鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
脱氢海粟碱 HPLC≥98% 5mg 组蛋白H3-K36(mono/di/i)甲基化检测试剂盒10/20等
脱氢紫堇碱 HPLC≥97.50% 20mg Mouseai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISA试剂盒小鼠抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
脱水长春碱 HPLC≥98% 20mg 小鼠乙型肝炎表面抗体(HBsAb)ELISA试剂盒 ，英文名： HBsAb ELISA Kit
脱水穿心莲内酯 HPLC≥98% 20mg 小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA检测试剂盒MousegranzymesA,Gzms-AELISAKit 96T/48T
脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯 HPLC≥99% 20mg 人角化细胞因子(KAF)/双调蛋白(AR)试剂盒 Human KAF/AR ELISA Kit
脱水淫羊藿素 HPLC≥99% 20mg RatAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
盐酸哌唑嗪 Prazosin HCl 质量规格：>99%,BR 大鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)试剂盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA KIT
醋酸泼尼松龙 Prednisolone acetate 质量规格：>97%,USP,BR 大鼠坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)试剂盒 Rat tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A/RANK ELISA kit
醋酸泼尼松 Prednisone Acetate 质量规格：>98%,BR 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体(AIL)试剂盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,AIL ELISA Kit
醋酸泼尼松（标准品） Prednisone Acetate 质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(AIL-R1)试剂盒 Rat AIL-R1 ELISA Kit
普瑞巴林 Pregabalin 质量规格：>99%,S构型 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(AIL-R3)试剂盒 Rat AIL R3 ELISA Kit
盐酸丙卡巴肼/盐酸甲基苄肼 Procarbazine HCl 质量规格：>98.5%,USP,BR,可用于细胞培养 大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(AIL-R4)试剂盒 Rat AIL-R4 ELISA Kit
盐酸丙卡巴肼(标准品) Procarbazine HCl 质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠坏死因子诱导蛋白6(TSG-6)试剂盒 Rat tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein,TSG-6 elisa kit
盐酸丙卡特罗 Procaterol HCl 质量规格：>98.5%,CP2005,半水合物 大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit 96T/48T
丙泊酚 Propofol 质量规格：>98.0%,熔点18 大鼠环孢素A(CsA)ELISA检测试剂盒RatCyclosporineA,CsAELISAKit 96T/48T
盐酸雷洛昔芬 Raloxifene HCl 质量规格：>98.5%,BR 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA检测试剂盒RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit 96T/48T
当归染料法PCR鉴定试剂盒说明书大鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)试剂盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA KIT 吡喹酮（标准品） Praziquantel 质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)试剂盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA KIT 盐酸哌唑嗪 Prazosin HCl 质量规格：>99%,BR
大鼠坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)试剂盒 Rat tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A/RANK ELISA kit 醋酸泼尼松龙 Prednisolone acetate 质量规格：>97%,USP,BR
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体(AIL)试剂盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,AIL ELISA Kit 醋酸泼尼松 Prednisone Acetate 质量规格：>98%,BR
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(AIL-R1)试剂盒 Rat AIL-R1 ELISA Kit 醋酸泼尼松（标准品） Prednisone Acetate 质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(AIL-R3)试剂盒 Rat AIL R3 ELISA Kit 普瑞巴林 Pregabalin 质量规格：>99%,S构型
大鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(AIL-R4)试剂盒 Rat AIL-R4 ELISA Kit 盐酸丙卡巴肼/盐酸甲基苄肼 Procarbazine HCl 质量规格：>98.5%,USP,BR,可用于细胞培养
大鼠坏死因子诱导蛋白6(TSG-6)试剂盒 Rat tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein,TSG-6 elisa kit 盐酸丙卡巴肼(标准品) Procarbazine HCl 质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMP 96T/48T 盐酸丙卡特罗 Procaterol HCl 质量规格：>98.5%,CP2005,半水合物
大鼠环孢素A(CsA)ELISA检测试剂盒RatCyclosporineA,CsA 96T/48T 丙泊酚 Propofol 质量规格：>98.0%,熔点18
操作流程：
1. 当归染料法PCR鉴定试剂盒说明书整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃
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文献和实验相关实验
这两个条件我们才可以选择快速反应模式。而 Standard Mode 和 Fast Mode 的主要区别在于不同模式下仪器升降温速率不同，快速模式下升降温速度更快。下图列举了当前部分用于基因表达和基因分型的 Master Mix 所支持的反应模式，供大家参考（图 4）。另外针对当前使用较为广泛的体外诊断试剂盒，如新冠检测试剂盒，大家在运行模式选择时需要根据试剂盒说明书做相应的设置，保证实验设置与试剂盒说明书一致。 图 4 常见基因表达和基因分型 master mix 支持反应模式整理
或存放不当：质粒提取试剂盒成分复杂且保存条件不同，有的试剂还容易出现浑浊。在使用之前需要检查试剂是否保存得当，如果出现浑浊，可参考试剂盒说明书，进行 37℃ 温浴至溶液澄清，再冷却至室温使用。 ⑦洗脱液体积不合适：洗脱液使用体积过大会导致提取浓度偏低，过小会导致洗脱不充分，产量过低。建议参考试剂盒说明书来确定洗脱体积，如果洗脱浓度偏低，可以重复洗脱一次； ⑧洗脱液未添加到硅胶膜中心：可能会导致洗脱液覆盖不完全，导致洗脱效率降低。此外洗脱液可以使用碱性洗脱缓冲液或者无核酸酶的水，避免使用 PH＜
按照TaKaRa的说明书，我用了Cool Start法，就是所有操作和试剂都是放在冰上进行的，据说能够减少非特异性。我当时担心目的基因量不够，所以P了两管，分到四个孔跑胶回收的。胶回收用的是OMEGA的试剂盒。 切胶回收之后测得目的片段浓度大概为20 ng/ul。按照TaKaRa的pMD18T说明书的要求，pMD18T需要加入1 ul，而目的片段需要0.1 pmol-0.3 pmol，换算一下，需要的目的片段的量大概为0.1*1800*325=58500 pg=58.5 ng到0.3*1800
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