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- 2025年07月12日
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稳转细胞系 是指在细胞中持续稳定表达特定基因或沉默特定基因表达。构建稳转细胞系的基本原理是用转染质粒或病毒感染的方法将构建好的含外源DNA的载体导入细胞，根据不同的基因载体中所含的抗性标志选用相应的药物进行选择性筛选，得到可稳定表达目的蛋白，或者稳定沉默特定基因表达的细胞系。常用的真核表达载体的抗性标志物有嘌呤霉素（puromycin）、潮霉素（hygromycin）和新霉素（neomycin）。
目的蛋白的过表达或沉默往往是硏究该 基因/蛋白功能的常规手段。在基因功能的研究中，基因是否有效转染靶细胞，是功能研究的前提条件之一。而稳定表达细胞系则弥补了瞬时感染（或转染）中外源基因表达时间短的缺陷，便于长期观察基因对于细胞功能的影响以及蛋白间相互作用。
原生生物有着多年构建稳转细胞株的经验，已在多个种属细胞中成功构建过表达的稳转细胞株。
二、服务内容
1. 基因过表达等科研用稳定细胞系的构建；
2. 重组抗体、细胞因子等生产蛋白用稳定细胞系的 构建。
三、服务优势
1. 拥有成熟的稳 转细胞系筛选平台，技术多样化，并且可以结合客户特殊需求，灵活地定制服务。
2. 对外源基因表达进行严格鉴定，有多种检测方法：q-PCR，RT-PCR，Western blot，
immunofluorescence，ELISA，FACS。
3. 质量保证：稳转细胞系无细菌、真菌及支 原体污染，其生长状态、活率及目的蛋白表达水平可长期保持稳定。
四、服务价格及周期
| 服务编号 | 服务项目 |
| XBX001 | 目的基因过表达慢病毒表达质粒构建 |
| XBX002 | 宿主细胞抗生素筛选浓度确认 |
| XBX003 | 多克隆稳定细胞株筛选及鉴定 |
| XBX004 | 单克隆稳定细胞株筛选及鉴定 |
| XBX005 | ESC多克隆稳定细胞株筛选及鉴定 |
| XBX006 | ESC单克隆稳定细胞株筛选及鉴定 |
| XBX007 | NK92多克隆稳定细胞株筛选及鉴定 |
| XBX008 | NK92单克隆稳定细胞株筛选及鉴定 |
六 、技术服务流程
1. 用户下载并填写稳 转细胞系构建技术服务协议书，发送到我们公司邮箱。
2. 双方确认并签订技术服务协议书，按照协议内容进行技术服务。
七、客户须知
1. 客户提供需过 表达或沉默的基因/蛋白相关信息；
2. 客户提供需稳转的宿主细胞系。
八、交付结果
1. 含慢病毒表达质粒相应的慢病毒；
2. 多克隆稳定细胞系或单克隆稳定细胞系（干冰运输或活细胞培养）；
3. 完整的实验报告。
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文献和实验这里说的稳转细胞系的构建是指慢病毒转染构建的稳转细胞系，可以构建表达细胞系，也能构建敲降细胞系，经常有人问我什么叫稳转和顺转的区别。瞬转细胞系，一般情况下能够稳定表达最多长一周左右，而稳转细胞系，只要构建成功就能稳定表达，没有时间限制，但是也不是肯定的，一般实验构建的细胞系超过 10 代以后，这个细胞系就有可能不靠谱了。接下来，咱们讲讲稳转细胞系的构建。一般来讲 shRNA 用的是 HIV 病毒，虽然已经经过处理，但是一听这名字也觉得渗人，无论如何保护自己是在实验室永葆青春的基础，所以一定
，无法达到持续表达外源基因的目的。一般用转染试剂进行质粒转染，多是瞬时转染。非常好，你能区分什么时候需要构建稳转株吗？细胞：需要构建稳转株的，有这些类型：1. 长期在目的细胞中研究基因功能；2. 部分蛋白半衰期极长，瞬时 RNA 只能干扰表达，无法去除已经表达的目的蛋白，想要实现更好的基因干扰效果；3. 想要实验更精准，筛选拷贝数适量的细胞进行实验研究；4. 需要用诱导表达系统的，主要是一些致死基因或者是需要时空表达的；5. 需要用细胞做动物实验的，比如裸鼠成瘤等。以下实验就不需要构建稳定
细胞系，通过在胚胎发育前期进行显微注射，使 TetraOneTM ES 细胞 100% 代替内源 ES 细胞，实现跨越“嵌合体”阶段从而一步直接获得 TetraOneTM 小鼠的基因打靶专利技术。实验结果显示，TetraOneTM 小鼠的特征均与传统 ES 打靶技术产生的 F1 代小鼠一致。 提供 TetraOneTM KO 技术服务的公司 目前，赛业生物提供利用 TetraOneTM KO 技术构建的完全性基因敲除小鼠、条件性基因敲除小鼠、基因定点敲入等基因修饰小鼠
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